GBT23225-2008烟草及烟草制品总植物碱的测定光度法.pdf 9页

'ICS65．160X87缮圄中华人民共和国国家标准GB／T23225--2008烟草及烟草制品总植物碱的测定光度法Tobaccoandtobaccoproducts--Determinationofalkaloids--Spectrometricmethod2008—12—31发布(IS02881：1992，MOD)2009—06-01实施宰瞀粥鬻獬警雠瞥星发布中国国家标准化管理委员会““4 刖吾GB／T23225--2008本标准修改采用ISO2881：1992《烟草及烟草制品总植物碱的测定光度法》(英文版)。本标准根据ISO2881：1992重新起草。考虑到我国国情，本标准与ISO2881：1992相比存在少量技术性差异，有关技术性差异已编入正文中并在它们所涉及的条款的页边空白处用垂直单线标识。在附录B中给出了这些技术性差异及其原因的一览表以供参考。为便于使用，对于ISO2881：1992做了下列编辑性修改：a)删除1SO2881：1992的“前言”；b)删除ISO2881：1992的参考文献；c)增加了附录A；d)增加了附录B。本标准的附录A、附录B为资料性附录。本标准由国家烟草专卖局提出。本标准由全国烟草标准化技术委员会(sAC／TC144)归口。本标准起草单位：国家烟草质量监督检验中心。本标准主要起草人：张威、王芳、王颖、刘惠民。 1范围烟草及烟草制品总植物碱的测定光度法GB／T23225--2008本标准规定了烟草及烟草制品中总植物碱的光度法测定方法。本标准适用于加工和未加工的烟草及烟草制品。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB／T5606．1卷烟第1部分：抽样GB／T19616烟草成批原料取样的一般原则(GB／T196162004，ISO4874：2000，MOD)YC／T31烟草及烟草制品试样的制备和水分测定烘箱法3原理试样在强碱性条件下进行水蒸气蒸馏，光度法测定馏出液的吸光值，计算出总植物碱的含量，以烟碱表示。4试剂所用试剂均为分析纯级试剂，水应为蒸馏水或同等程度的纯净水。4．1氯化钠。4．2氢氧化钠溶液，8mol／L。4．3硫酸溶液，1mol／L。4．4硫酸溶液，0．025mol／L。4．5烟碱，纯度不低于98％。5仪器常用的实验室仪器及下述各项：5．1水蒸气蒸馏装置，按第7章对蒸馏装置进行调整，使用烟碱(4．5)，回收率应至少达到98％。如果不能达到，通过调整蒸馏速度来进行优化。对于常规分析，可使用烟碱的酒石酸氢化物标准样品来校准烟碱(4．5)。5．2光度计，波长能够覆盖230nm～290nm范围。5．3匹配的石英比色皿，光径长1cm。5．4容量瓶：100mL、250mL。5．5移液管：5mL、10mL、25mL。5．6玻璃漏斗：直径大约55mm。5．7定性滤纸，快速。 GB／T23225--20086抽样6．1烟叶按GB／T19616抽取烟叶作为实验室样品。6．2卷烟按GB／T5606．1抽取卷烟作为实验室样品。7分析步骤7．1试样的制备按YC／T31制备试样。7．2测定7．2．1测定次数每个试样应平行测定两次。7．2．2称样根据样品中预计的总植物碱含量，称取1g～2g试料于500mL蒸馏瓶中，精确至0．001g。7．2．3水分的测定按照Yc／T31测定试样的水分含量。7．2．4总植物碱含量的测定7．2．4．1蒸馏注I：蒸馏过程中加入氢氧化钠时一定要注意。将20g～40g氯化钠和5mL氢氧化钠溶液(4．2)加入到蒸馏瓶中(7．2．2)，用5mL～15mL水将试料冲下，立即将蒸馏瓶连接于水蒸气蒸馏装置(5．1)，进行蒸馏。注2：NaCI的量应足够，保证在蒸馏完毕后还有少量的未溶解盐存在。用水蒸气将混合物蒸馏进入盛有10mL硫酸溶液(4．3)的250mL容量瓶中。蒸馏速度至少每分钟馏出物10mL～12mL。蒸馏过程中不要让蒸馏瓶中液体的体积有较大的变化。如果需要，使用辅助升温。收集馏出物220mL～230mL。取下容量瓶，同时用少量水将连接管冲洗干净。停止蒸馏，冲洗剩余物。确认容量瓶处于室温，用水定容至刻度(体积V，)，摇匀。若馏出液不澄清，则将其过滤。注3：若需要过滤，将前150mL滤液弃去，或使用滤纸在使用前用足量的水冲洗并干燥。7．2．4．2馏出液中总植物碱的测定从容量瓶中移取一定体积(v：，通常为25mL)的馏出液至一个容量瓶中(容量为U，通常为100mL)，用硫酸溶液(4．4)定容至刻度。用光度计测定溶液在236rim、25913,m和282nm处的吸光值。参比溶液为10mL硫酸溶液(4．3)，用水稀释到250mL。若259rim处的吸光度超过了0．7，则应取较小体积的馏出液重新稀释测定。8结果的计算与表达8．1计算方法和公式校正吸光度按式(1)计算得出：2A一1．059(A25。A236+A282式中A。⋯A：。。和A。分别是在236nm、259nm和282nm处吸光度的实测值。总植物碱的质量百分含量N，按式(2)计算得出：N一#嬲筹b(2) 式中：A——校正吸光度；”——试样的水分含量(见7，2．3)，％；m——用来进行蒸馏的样品质量，单位为毫克(rag)y。——馏出液定容的体积，单位为毫升(mL)；Vz——移取馏出液的体积，单位为毫升(mL)；U——稀释容量瓶的容量，单位为毫升(mL)。8．2精密度两次平行测试结果之差不应大于0．05％。9试验报告GB／T23225--2008试验报告应包括以下内容：a)使用的标准；b)样品来源和制样方法；c)样品数目；d)样品接收日期；e)测试日期；f)用质量百分含量来表示的样品平均水分含量，精确到0．5％；g)用烟碱含量表示的总植物碱含量(所有单个试验的结果)，是占于基试验部分的样品含量，精确至0．01％；h)用烟碱含量来表示的平均总植物碱含量，是占干基试验部分的样品含量，精确至0．01％。3 GB／T23225--2008附录A(资料性附录)烟碱和烟碱盐纯度的铡定硅钨酸重量法本附录修改采用国际烟草科学研究合作中心(CORESTA)推荐方法39。A．1CORESTA引言自1920年以来，已经提出了几种制作标准曲线用烟碱的纯度测定方法。当时，苦味酸重量法被认为是最专一性的方法，硅钨酸法最为灵敏，但实际上这两种方法都不是完全专一的。自20世纪60年代以来，使用最为广泛的方法是紫外光度法和硅钨酸法。20世纪80年代后期，英国的研究工作表明，谱带宽度大于2nm的光谱仪不适合烟碱纯度的测定。他们还发现，使用will·ts校正系数(见注1)时，谱带宽度小于2nm的光谱仪测得的烟碱含量小于实际值。而且，在进行实验室认证的国家，认证审查人员通常规定基准物质应是可追溯的。这样，只有重量法可以符合认证要求。下述方法报告了英国对美国公职分析化学家协会(AOAc)方法(第十四版，1984年)中硅钨酸重量法测定烟碱的方法改进结果。注】：Willits，c0．等，Anal．Chem．，22，430(1950)。1992年～1993年CORESTA在19个实验室对这个改进方法进行了研究。结果表明，改进方法对烟碱、酒石酸氢烟碱和水杨酸烟碱的测定结果非常一致。即使如此，对这个方法的专一性仍存有疑问，特别是有资料认为其他植物碱和烟碱的降解产物干扰测定。1993年，CORESTA研究了各种贮存条件对烟碱(色谱质量纯高于99％)降解的影响，以及降解物对硅钨酸法、气相色谱法和紫外光度法测定烟碱的影响。研究结果表明：高纯度烟碱降解缓慢。例如，将烟碱(色谱质量纯高于99％)暴露于冰箱的空气中贮存18个月，纯度降为97％，在室温下暴露于光和空气中三个月纯度的降低程度与此相同。——水是贮存过程中的主要污染物，其含量大约为1％。从理论上讲，测定这种污染物是比较容易的。——气相色谱／质谱测定表明纯烟碱贮存过程中的主要降解产物是可提因和麦斯明，试验中测到的最大值为1％。——上述两种降解产物都不同程度地影响除气相色谱／质谱法以外的所有三种纯度测定方法的测定结果，对硅钨酸法和紫外光度法来讲，这种影响相同，且比较小。——实际上，在校正了水分之后，硅钨酸法与气相色谱／质谱法的测定结果相同，也就是说，对纯度高于96％的烟碱，可得到最佳测定值。——另一方面，紫外光度法的测定结果与“最佳测定值”相同或稍低，这个研究结果印证了英国的研究发现。CORESTA关于硅钨酸的研究表明，最切实可行和妥当的测定纯度高于96％烟碱的方法是硅钨酸法，在这个纯度下，降解物的干扰可以忽路不计。1992年cORESTA进行的初步研究显示，虽然用硅钨酸法测定酒石酸氢烟碱和水杨酸烟碱的精确度高，但一些样品的实测纯度超过100％，用气相色谱法和紫外光度法所作的进一步分析证实，这些样品的烟碱确实超过100％纯度的化合物所含的烟碱。CORESTA的资料表明这些盐是被未反应的烟碱所污染。因此，对于烟碱盐，硅钨酸法测定的是烟碱含量而非烟碱盐的纯度。由于烟碱盐化学性质稳定，贮存对于未反应成盐的烟碱的影响与纯烟碱相比就显得微不足道，因此，硅钨酸法适用于烟碱盐中烟碱的测定。4 GB／T23225--2008A．2原理烟碱与十二钨硅酸(硅钨酸)络合形成不溶性的烟碱硅钨酸盐，将沉淀过滤于烧结玻璃坩埚中测定出沉淀的质量。A．3试料A．3．1十二钨硅酸(siO：·12WO。·26H20)溶液将12g钨硅酸溶于100mL蒸馏水中。注2：应避免使用其他形式的硅钨酸，如4H：O·Si02·10WO：·3HzO或4HzO·Si02·12WOa·20HzO，因为它们与烟碱不形成晶形沉淀。A．3．2盐酸溶液，20％(体积分数)将20mL盐酸(密度1．18)用蒸馏水稀释至100mL。A．3．3盐酸溶液，0．1％(体积分数)将5mL20％盐酸(A．3．2)用蒸馏水稀释至1L。A．3．4烟碱溶液(c1。H，。N2)将烟碱用蒸馏水稀释，制备25mL0．1mg／mL烟碱溶液。A．4仪器设备A．4．1实验室常用设备。A．4．2烘箱，可保持(120±5)℃温度。A．4．3烧结玻璃坩埚，G2型。A．5分析步骤A．5，1于5个250mL烧杯中各称取约0．1g烟碱(或相当烟碱量的烟碱盐)，精确至0．0001g，每个烧杯各配一根玻棒。A．5．2向每个烧杯中各加入100mL蒸馏水，2mL20％盐酸(A．3．2)，搅拌均匀。不要拿掉玻棒。A．5．3缓慢加入15mL硅钨酸溶液(A．3．1)，边加边持续搅拌。不要拿掉玻棒，盖上表面皿，放置过夜。过滤之前，用玻棒搅拌以确认沉淀能迅速沉降且呈晶形。加几滴硅钨酸溶液(A．3．1)检查，应沉淀完全。A．5．4沉淀过滤A．5．4，1在120℃烘箱(A．4．2)中烘干烧结玻璃坩埚直至恒重(±1mg)，取出教人硅胶干燥器中，冷却至室温。A．5．4，2称取烧结玻璃坩埚质量，精确至0．0001g。将烧结玻璃坩埚置于抽滤装置上，抽滤沉淀，用0．2％盐酸(A．3．3)洗涤烧杯3次，每次15mL，将烧杯中和玻棒上的沉淀全部洗人烧结玻璃坩埚中，弃去滤液。A．5．4．3继续用0．1％盐酸冲洗沉淀(约需400mL)。收集滤液，加人几滴烟碱溶液(A．3．4)检查，应无乳白色浑浊产生，即钨硅酸已被洗涤干净。A．5．4，4将烧结玻璃坩埚放入烘箱(A．4．2)中，烘干3h，取出放入硅胶干燥器中冷却至室温，称重，精确至0．0001g。将烧结玻璃坩埚重新放人烘箱，烘干1h，取出，放人硅胶干燥器中冷却至室温，重新称重，重复操作至恒重(土1mg)。A．6计算由式(A．I)计算烟碱纯度”，数值以％表示：S GB／T23225--2008训一旦：!旦!!里!×loo％m式中：m，——沉淀的质量，单位为毫克(rag)；m——试料质量，单位为毫克(mg)。结果为5次测定的平均值，精确至0．1％。(A．1) 咐录B(资料性附录)本标准与ISO2881：1992的技术性差异及其原因本标准与ISO2881：1992的技术性差异及其原因的一览表见表B．1。表&1本标准与ISO2881：1992的技术性差异及其原因GB／T23225--2008本标准的章条编号技术性差异原因删除ISO2881：1992的参考文献；增加“规2以适合我国国情范性引用文件”删除1S02881：1992的6“样品”；增加了66与“规范性引用文件”一致“抽样”删除ISO2881：1992的7．1“样品的准71与“规范性引用文件”一致备”；增加了7．1“试样的制各”删除ISO2881：1992的7．2．3“水分的测72．3与“规范性引用文件”一致定”；增加了7．2．3“试样的制备”进行水蒸气燕馏装置的回收率测定需要使用纯烟碱和烟碱盐。纯烟碱或烟碱盐的纯度测定需要有相应的方法，因此，将CORESTA39号推荐方法(1994年发布)修改采用为附录A(资料性附录)，以便于水蒸附录A增加“附录A”气蒸馏装置回收率的测定和其他需要纯烟碱制作标准曲线的分析方法时参考使用。在制定本标准的附录A时，我们选择了烧结玻璃坩埚过滤沉淀的方法，取消了滤纸过滤法，这样就消除了由于方法不一致可能造成的测定误差'