GBT30636-2014燕窝及其制品中唾液酸的测定液相色谱法.pdf 8页

'中华人民共和国国家标准GB/T3063s-z014燕窝及其制品中唾液酸的测定液相色谱法ˉDeterminationoF·s山刂icacidinsⅥ泛ⅡetsnestandsⅥ吐ⅡetsnestproductsˉLiquidchromatographic:nethod201⒋1⒉31发布⒛15ˉ05¨01实施中华人民共和国国家质量监督检验捡疫总局发布中国国家标准化管理委员会/亻" GB/T30636-⒓014前言本标准按照GB/T1.1—zOOg给出的规则起草。本标淮由全国食品工业标准化技术委员会(SAC/TC“)提出。本标准由全国食品工业标淮化技术委员会食品通用检浏技术分技术委员会(sAC/TC铒/sC8)·归口。本标准起草革位:国家农业深加工产品质量监督裣验中心、吉林省产品质量监督检验院。本标准主要起萆人:李剐、刘俊会、李界一、华霄、李媛嫒、王伟、置莹、史艳宇、安伟、王庆蜂、李丹、李宁。亻 GB/T30636ˉ—2014燕窝及其制品中唾液酸的测定液相色谱法1范围本标准规定了液相色谱法测定燕窝及其制品中唾液酸的方法。本标准适用于燕窝及其制品中唾液酸的测定。本标准的方法检出限:燕窝为0.3g/kg,燕窝制品为0。003g/kg。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文(包括所有的修改单)适用于本文件。件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本GB/T6379.2溜量方法与结果的准确度(正确度与精密度)第2部分:确定标准测量方法重复性与再现性的基本方法GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3方法提要燕窝及燕窝制品在乙酸溶液中加热水解,液相色谱-,释放出唾液酸,水解液用强阳离子交换柱分离紫外检测器检测,外标法定量。4试剂及材料4.1水:符合GB/T6682规定的-级水要求。4.2乙腈:色谱纯。4.3冰乙酸:分析纯。4.4磷酸:分析纯。4.5唾液酸(N-乙酰神经氨酸,C11H19No9):纯度大于99%。4.6聚乙二醇:平均相对分子质量不低于17000。4.70.1%磷酸溶液:取1mL磷酸,加水定容至1000mL,混匀后用0.45um微孔潞膜过滤。4.850%乙酸溶液:取100mL冰乙酸,加水100mL混匀。4.910%聚乙二醇溶液:称取50g聚乙二醇,加水500mL搅拌溶解。4.10唾液酸标准储备溶液(1。00mg/mD:称取唾液酸100。Omg,加水zOmL溶解后,加乙腈定容至lOOmL。4℃条件下避光保存,保存期一个月。4.1l透析袋:可透过相对分子质量10000以下的化合物,临用前用水浸泡1h。4.120.45um微孔滤膜:有机相。4.130。45um针筒式过滤器:有机相。1 GB/T30636—20144,l0流动相:取0,1%磷酸溶液100mL,加乙腈定容至1o00mL,混匀后用0.45um有机相微孔滤膜过滤。5仪器5.1液相色谱仪:带紫外检测器。5.2恒温水浴锅。5.3研钵。5.4匀浆机:转速10000r/min。5.5烘箱。5.6分析天平:感量0.15.7具塞比色管:256分析步骤6.1试样处6.1.1干燕取适量o。1g(精确至0。000浴中水解10min,取,混匀,取上清液用0。46.1.2冰耱燕取适量试样试样10g(精确至0.01g),置于lO00mL烧杯中在流水下透析24h∶出,至袋中试液体积小于5mL,将试液转移管中,加等体积冰乙酸,使水解液中乙酸浓度为50%。解10min,取出比色管冷却至室温。将水解液转移至100mL容,混匀,取上清液用0。45u血针筒式过滤器过滤,待测。6.2唾液酸系列杯准工作溶液配制分别量取唾液酸标准储备液1。00mL、2。o0mL、4。00mL、6。00mL、8。00mL、10。OmL,置于100mL容量瓶中,加流动相定容至刻度,配制成唾液酸浓度为10.0ug/mL、⒛。0ug/mL、如。0ug/mL、GO。0ug/mL、80.0ug/mL、100。0ug/mL的唾液酸标准溶液,待测。7测定7.1色谐参考条件7.1.1色谱柱:300sCX阳离子交换色谱柱,4.6mm×25omm,粒径5um,或相当者。2 GB/T30636-20147.1.2流动相:乙腈-0.1%磷酸水溶液(90+10,体积比)。7.1,3柱温:30℃。7.1.4流速:1。OmL/min。7.1.5进样量:10uL。7.1.6检测波长:zO5nm。7.2液相色谱猁定取唾液酸系列标准溶液和试液分别进样,以标准系列溶液峰面积为纵坐标、浓度为横坐标作图,绘制标准曲线。以保留时间定性,唧液及燕窝试样水解液色谱图参见附录A。8结果计耸测定结·⋯⋯⋯⋯(1)式中XV钔计算9糖密度9.1一般规定本标准的精密度按以95%的可信度来计算。9.2重复性在重复性条件下,获得两次独立测试结果的绝对差值不超过重复性限(r)。不同试样的含量范围及重复性方程见表1。表1燕窝及其制品唾液酸含Ⅱ范围及重复性和再现性方程试样名称含量范围/(g/kg)重复佳限(")再现性限巛)干燕窝o。6"ˇ60.4〓0。0067-卜0。0357勿R=0.018在+o.0356狃"〓燕窝制品o.006冖ˇ0.5600。0387勿"==0.0387勿"=〓注:勿表示两次测定结杲的算术平均值,革位为克每千克(g/kg〉。 ˉˉˉ——————ˉˉˉˉˉˉˉˉˉˉˉˉˉˉˉˉˉˉˉˉˉˉ冖ˉ■■口□■■□口口口口口口■■■■■■■================================ΞGB/T3∷0636-△2014如果差值超过簋复桂隈9应舍弃试验缔桑并窒新完戚两次革个试验的泔定,9.3再∷现性在再现性条件下”获得两∷次独立溺斌结果的绝∷对差∷值不∷超过冉现性眼《R》。∷不同试挣曲贫丘范围及再现性方程见表1。 GB/T30s3G-⒛"附录A(资料性附录)唾液酸标准溶液及燕窝试样水解液色谐曰A。1唾液酸标准溶液色谱图(见图A。1)。1614烈12诩F巾10胆8642o囡A。1唾液酸标准溶液色谱国(浓皮60ug/mL)A。2燕窝水解液色谱图(见图A。2)。们⒛鹚钶客⒛申璎⒑ο囡A。2燕窝水解液色谮田 寸冖0Ν]I°∞ω0∞卜`臼0中华人民共和国国家标准燕窝及其制品中唾液酸的测定液相色谱法GB/T3063⒍-2014中国标准出版社出版发行北京市朝阳区和平里西街甲2号(100⑿9)北京市西城区三里河北街16号(100∝5)网址www。spC。net。cn总编窒:(010)642zs323发行中心:(010)517BO235读者服务部:(010)68523946中国标淮出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销开本8gO×12301/16印张0.75字数12千字2015年2月笫一版2015年2月笫一次印刷书号:15sOGG·卜51008定价16,00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵杈必究GB/T30636-2014举报电话:(010)6gs10107'