GBT5009.20-1996食品中有机磷农药残留量的测定方法.pdf 10页

'GB/T5009.20—1996中华人民共和国国家标准食品中有机磷农药残留量的测定方法MethodfordeterminationoforganophosphoruspesticideresiduesinfoodsGB/T5009.20—1996第一篇水果、蔬菜、谷类中有机磷农药的多残留测定方法1主题内容与适用范围本标准规定了水果、蔬菜、谷类中敌敌畏、速灭磷、久效磷、甲拌磷、巴胺磷、二嗪农、乙嘧硫磷、甲基嘧啶硫磷、甲基对硫磷、稻瘟净、水胺硫磷、氧化喹硫磷、稻丰散、甲喹硫磷、克线磷、乙硫磷、乐果、喹硫磷、对硫磷、杀螟硫磷的残留量分析方法。本标准适用于使用过敌敌畏等二十种农药制剂的水果、蔬菜、谷类等作物的残留分析。2原理含有机磷的样品的富氢焰上燃烧，以HPO碎片的形式，放射出波长526nm的特性光；这种光通过滤光片选择后，由光电倍增管接收，转换成电信号，经微电流放大器放大后被记录下来。样品的峰面积或峰高与标准品的峰面积或峰高进行比较定量。3试剂3．1丙酮。3．2二氯甲烷。3．3氯化钠。3．4无水硫酸钠。3．5助滤剂Celite545。3．6农药标准品：3．6．1敌敌畏（DDVP）：99%。3．6．2速灭磷（mevinophos）：顺式60%，反式40%。3．6．3久效磷（monocrotophos）：99%。3．6．4甲拌磷（phorate）：98%。3．6．5巴胺磷（propetumphos）：99%。3．6．6二嗪农（diazinon）：98%。3．6．7乙嘧硫磷（etrimfos）97%。3．6．8甲基嘧啶硫磷（paratehion-methyl）：99%。3．6．9甲基对硫磷（parethion-methylo）：99%。3．6．10稻瘟净（kitazine）：99%。3．6．11水胺硫磷（isocarboiphos）：99%。3．6．12氧化喹硫磷（po-quinalphos）：99%。3．6．13稻丰散（phenthoate）：99.6%。3．6．14甲喹硫磷（methdathion）：99.6%.中华人民共和国卫生部1996—06—19批准1996—09—01实施 GB/T5009.20—19963．6．15克线磷（phenamiphos）：99.6%。3．6．16乙硫磷（ethion）：95%。3．6．17乐果（dimethoate）：99.0%。3．6．18喹硫磷（quinaphos）：98.2%。3．6．19对硫磷（parathion）：99.0%。3．6．20杀螟硫磷（fenitrothion）：98.5%。3．7农药标准溶液的配制：分别准确称取3.6.1至3.6.20标准品，用二氯甲烷为溶剂，分别配制成1.0mg/mL的标准储备液，贮于冰箱（4℃）中，使用时用二氯甲烷稀释配成单一品种的标准使用液（1.0μg/mL）。再根据各农药品种的食品相应值或最小检测限，吸取不同量的标准储备液，用二氯甲烷稀释成混合标准使用液。4仪器4．1组织捣碎机。4．2粉碎机。4．3旋转蒸发仪。4．4气相色谱仪：附有火焰光度检测器（FPD）。5试样的制备取粮食样品经粉碎机粉碎，过20目筛制成粮食试样；取水果、蔬菜样品洗净，晾干，去掉非可食部分后制成待分析试样。6分析步骤6．1提取6．1．1水果、蔬菜称取50.00g试样，置于300mL烧杯中，加入50mL水和100mL丙酮（提取液总体积为150mL），用组织捣碎机提取1～2min。匀浆液经铺有二层滤纸和约10gCelite545的布氏漏斗减压抽滤。从滤液中分取100mL移至500mL分液漏斗中。6．1．2谷物称取25.00g试样，置于300mL烧杯中，加入50mL水和100mL丙酮，以下步骤同6.1.1。6．2净化向6.1.1或6.1.2的滤液中加入10～15g氯化钠使溶液处于饱和状态。猛烈振摇2～3min，静置10min，使丙酮从水相中盐析出来，水相用50mL二氯甲烷振摇2min，再静置分层。将丙酮与二氯甲烷提取液合并，经装有20～30g无水硫酸钠的玻璃漏斗脱水滤入250mL圆底烧瓶中，再以约40mL二氯甲烷分数次洗涤容器和无水硫酸钠。洗涤液也并入烧瓶中，用旋转蒸发器浓缩至约2mL，浓缩液定量转移至5～25mL容量瓶中，加二氯甲烷定容至刻度。6．3气相色谱测定6．3．1色谱参考条件6．3．1．1色谱柱a．玻璃柱2.6m×3mm（i.d），填装涂有4.5%（m/m）DC-200+2.5%（m/m）OV-17的ChromosorbWAWDMCS（80～100目）的担体。b．玻璃柱2.6m×3mm（i.d），填装涂有1.5%（m/m）DCOE-1的ChromosorbWAWDMCS（60～80目）。中华人民共和国卫生部1996—06—19批准1996—09—01实施 GB/T5009.20—19966．3．1．2气体速度氮气（N2）50mL/min、氢气（H2）100mL/min、空气50mL/min。6．3．1．3温度：柱箱240℃、汽化室260℃、检测器270℃。6．4测定吸取2～5μL混合标准液及样品净化液注入色谱仪中，以保留时间定性。以试样的峰高或峰面积与标准比较定量。7计算A×V×V×E×1000i13siX=…………………………………（1）iA×V×V×m×1000si24式中：Xi——i组分有机磷农药的含量，mg/kg；Ai——试样中i组分的峰面积，积分单位；Asi——混合标准液中i组分的峰面积，积分单位；V1——试样提取液的总体积，mL；V2——净化用提取液的总体积，mL；V3——浓缩后的定容体积，mL；V4——进样体积，mL；Esi——注入色谱仪中的i标准组分的质量，ng；m——样品的质量，g。结果的表述：报告算术平均平均值的二位有效数。8允许值相对相差≤15%。9其他9．1十六种有机磷农药的色谱图图中最低检测浓度，mg/kg1－敌敌畏（1.21min）0.0052－速灭磷（1.67min）0.0043－久效磷（3.03min）0.0144－甲拌磷（3.37min）0.0045－巴胺磷（3.94min）0.0116－二嗪农（4.27min）0.0037－乙嘧硫磷（4.65min）0.0038－甲基嘧啶硫磷（5.01min）0.0049－甲基对硫磷（6.54min）0.00410－稻瘟净（6.54min）0.00411－水胺硫磷（7.46min）0.00512－氧化喹硫磷（8.51min）0.025中华人民共和国卫生部1996—06—19批准1996—09—01实施 GB/T5009.20—199613－稻丰散（9.33min）0.01714－甲喹硫磷（9.95min）0.01415－克线磷（11.64min）0.00916－乙硫磷（17.00min）0.0149．213种有机磷农药的色谱图1－敌敌畏；2－甲拌磷；3－二嗪农；4－乙嘧硫磷；5－巴胺磷；6－甲基嘧啶硫磷；7－稻瘟净；8－乐果；9－喹硫磷；10－甲基对硫磷；11－杀螟硫磷；12－对硫磷；13－乙硫磷第二篇粮、菜、油中有机磷农药残留量测定方法10主题内容与适用范围本标准规定了粮、菜、油等食品中敌敌畏、乐果、马拉硫磷、对硫磷、甲拌磷、稻瘟净、杀螟硫磷、倍硫磷、虫螨磷的测定方法。本标准适用于粮、菜、油使用过敌敌畏、乐果、马拉硫磷、对硫磷、甲拌磷、稻瘟净、杀螟硫磷、倍硫磷、虫螨磷等农药的残留量分析。最低检出量为0.1～0.3ng，进样量相当于0.01g样品，最低检出浓度范围为0.01～0.03mg/kg。11原理样品中有机磷农药经提取，分离净化后在富氢焰上燃烧，以HPO碎片的形式，放射出波长526nm光，这种特征光通过滤光片选择后，由光电倍增管接收，转换成电信号，经微电流放大器放大后，被记录下来。样品的峰高与标准的峰高相比，计算出样品相当的含量。12试剂中华人民共和国卫生部1996—06—19批准1996—09—01实施 GB/T5009.20—199612．1二氯甲烷。12．2无水硫酸钠。12．3丙酮。12．4中性氧化铝：层析用，经300℃活化4h后备用。12．5活性炭：称取20g活性炭用盐酸（3mol/L）浸泡过夜，抽滤后，用水洗至无氯离子，在120℃烘干备用。12．6硫酸钠溶液（50g/L）。12．7农药标准溶液：准确称取适量有机磷农药标准品，用苯（或三氯甲烷）先配制储备液，放在冰箱中保存。12．8农药标准使用液：临用时用二氯甲烷稀释为使用液，使其浓度为敌敌畏、乐果、马拉硫磷、对硫磷和甲拌磷每毫升各相当于1.0μg，稻瘟净、倍硫磷、杀螟硫磷和虫螨磷每毫升各相当于2.0μg。13仪器13．1气相色谱仪：具有火焰光度检测器。13．2电动振荡器。14分析步骤14．1提取与净化14．1．1蔬菜：将蔬菜切碎混匀。称取10.00g混匀的样品，置于250mL具塞锥形瓶中，加30～100g无水硫酸钠（根据蔬菜含水量）脱水，剧烈振摇后如有固体硫酸钠存在，麻痹大意暖气加无水硫酸钠已够。加0.2～0.8g活性炭（根据蔬菜色素含量）脱色。加70mL二氯甲烷，在振荡器上振摇0.5h，经滤纸过滤。量取35mL滤液，在通风柜中室温下自然挥至近干，用二氯甲烷少量多次研洗残渣，移入10mL（或5mL）具塞刻度试管中，并定容至2.0mL，备用。14．1．2稻谷：脱壳、磨粉、过20目筛、混匀。称取10.00g置于具塞锥形瓶中，加入0.5g中性氧化铝及20mL二氯甲烷，振摇0.5h，过滤，滤液直接进样。如农药残留量过低，则加30mL二氯甲烷，振摇过滤，量取15mL滤液浓缩并定容至2.0mL进样。14．1．3小麦、玉米：将样品磨碎过20目筛、混匀。称取10.00g置于具塞锥形瓶中，加入0.5g中性氧化铝、0.2g活性炭及20mL二氯甲烷，振摇0.5h，过滤，滤液直接进样。如农药残留量过低，则加30mL二氯甲烷，振摇过滤，量取15mL滤液浓缩，并定容至2mL进样。14．1．4植物油：称取5.0g混匀的样品，用50mL丙酮分次溶解并洗入分液漏斗中，摇匀后加10mL水，轻轻旋转振摇1min，静置1h以上，弃去下面析出的油层，上层溶液自分液漏斗上口倾入另一分液漏斗中，当心尽量不使剩余的油滴倒入（如乳化严重，分层不清，则放入50mL离心管中，以2500r/min离心0.5h，用滴管吸出上层溶液）。加30mL二氯甲烷，100mL硫酸钠溶液（50g/L），振摇1min。静置分层后，将二氯甲烷提取液移至蒸发皿中。丙酮水溶液再用10mL二氯甲烷提取一次，分层后，合并至蒸发皿中。自然挥发后，如无水，可用二氯甲烷少量多次研洗蒸发皿中残液移入具塞量筒中，并定容至5mL。加2g无水硫酸钠振摇脱水，再加1g中性氧化铝、0.2g活性炭（毛油可加0.5g）振摇脱油和脱色，过滤，滤液直接进样。二氯甲烷提取液自然挥发后如有少量水，可用5mL二氯甲烷分次将挥发后的残液洗液小分液漏斗内，提取1min，静置分层后将二氯甲烷层分入具塞量筒内，再以5mL二氯甲烷提取一次，合并入具塞量筒内，定容至10mL，加5g无水硫酸钠，振摇脱水，再加1g中性氧化铝、中华人民共和国卫生部1996—06—19批准1996—09—01实施 GB/T5009.20—19960.2g活性炭，振摇脱油和脱色，过滤，滤液直接进样。或将二氯甲烷和水一起倒入具塞量筒中，用二氯甲烷少量多次研洗蒸发皿，洗液并入具塞量筒中，以二氯甲烷层为准定容至5mL，加3g无水硫酸钠，然后如上加中性氧化铝和活性炭依法操作。14．2气相色谱测定14．2．1色谱柱：玻璃柱，内径3mm，长1.5～2.0m。14．2．1．1分离测定敌敌畏、乐果、马拉硫磷和对硫磷的色谱柱。a.内装涂以2.5%（m/m）SE-30和3%（m/m）QF-1混合固定液的60～80目ChromosorbWAWDMCS。b.内装涂以1.5%（m/m）OV-17和2%（m/m）QF-1混合固定液的60～80目ChromosorbWAWDMCS。c.或内装涂以2%（m/m）OV-101和2%（m/m）QF-1混合固定液的60～80目ChromosorbWAWDMCS。14．2．1．2分离测定甲拌磷、虫螨磷、稻瘟净、倍硫磷和杀螟硫磷的色谱柱。a.内装涂以3%（m/m）“PE-GA和5%（m/m）QF-1混合固定液的60～80目ChromosorbWAWDMCS。b.内装涂以2%（m/m）NPGA和3%（m/m）QF-1混合固定液的60～80目ChromosorbWAWDMCS。14．2．2气流速度：载气为氮气80mL/min；空气50mL/min；氢气180mL/min（氮气、空气和氢气之比按各仪器型号不同选择各自的最佳比例条件）。14．2．3温度：进样口为220℃；检测器为240℃；柱温为180℃，但测定敌敌畏为130℃。15测定将12.8所述的混合农药标准使用液2～5μL分别注入气相色谱仪中，可测得不同浓度有机磷标准溶液的峰高。分别绘制有机磷标准曲线。同时取样品溶液2～5μL注入气相色谱仪中，测得的峰高从标准曲线图中查出相应的含量。16计算m×10001X=……………………（2）1m×1000×10002式中：X1——样品中有机磷农药的含量，mg/kg；m1——进样体积中有机磷农药的质量，ng；m2——进样体积（μL）相当于样品的质量，g。结果的表述：报告算术平均值的二位有效数字。17允许差敌敌畏、甲拌磷、倍硫磷、杀螟硫磷相对相差≤10%；乐果、马拉硫磷、对硫磷、稻瘟净相对相差≤15%。18气相色谱图中华人民共和国卫生部1996—06—19批准1996—09—01实施 GB/T5009.20—1996图1图22.5%SE-30和3%QF-1柱2.5%SE-30和3%QF-1柱柱温180℃，1—乐果；2—马拉硫磷；3—对硫磷柱温130℃，敌敌畏图3图43%PEGA+5%QF-1柱2%NPGA+3%QF-1柱1—甲拌磷；2—稻瘟净；3—倍硫磷；4—杀螟硫磷1—甲拌磷；2—稻瘟净；3—倍硫磷；4—杀螟硫磷中华人民共和国卫生部1996—06—19批准1996—09—01实施 GB/T5009.20—1996第三篇肉类、鱼类中有机磷农药残留量的测定方法19主题内容与适用范围本标准规定了肉类、鱼类中敌敌畏、乐果、马拉硫磷、对硫磷的残留分析方法。本标准适用于肉类、鱼类中敌敌畏、乐果、马拉硫磷、对硫磷农药的残留分析。敌敌畏、乐果、马拉硫磷、对硫磷最低检出量为0.6,0.3,0.3,0.15ng，当进样量相当于0.002g时，最低检出浓度分别为0.03,0.015,0.015,0.008mg/kg。20原理同第2章。21试剂21．1丙酮。21．2二氯甲烷。21．3无水硫酸钠：在700℃灼烧4h后备用。21．4中性氧化铝：在550℃灼烧4h。21．5硫酸钠溶液（20g/L）。21．6农药标准溶液：准确称取敌敌畏、乐果、马拉硫磷、对硫磷标准品各10.0mg，用丙酮溶解并定容至100mL，混匀，每毫升相当于农药0.10mg，作为储备液，保存于冰箱中。21．7农药标准使用液：临用时用丙酮稀释至每毫升相当2.0μg。22仪器22．1气相色谱：附FPD检测器。22．2电动振摇器。23分析步骤23．1提取净化将有代表性的肉、鱼样品切碎混匀，称取20.00g于250mL具塞锥瓶中，加60mL丙酮，于振荡器上振摇0.5h，经滤纸过滤，取滤液30mL于125mL分液漏斗中，加60mL硫酸钠溶液（20g/L）和30mL二氮甲烷，振摇提取2min后，静置分层，将下层提取液放入另一个125mL分液漏斗中，再用20mL二氯甲烷于丙酮水溶液中同样提取后，合并二次提取液，在二氯甲烷提取液中加1g中性氧化铝（如为鱼肉加5.5g），轻摇数次，加20g无水硫酸钠。援摇脱水，过滤于蒸发皿中，用20mL二氯甲烷分二次洗涤分液漏斗，倒入蒸发皿中，在55℃水浴上蒸发浓缩至1mL左右，用丙酮少量多次残液洗入具塞刻度小试管中，定容至2～5mL，如溶液含少量水，可在蒸发皿中加少量无水硫酸钠后，再用丙酮洗入具塞刻度小试管中，定容。23．2色谱条件23．2．1色谱柱：内径3.2mm，长1.6m玻璃柱，内装涂以OV-17（1.5%m/m）和QF-1（2%m/m）的混合固定液的80～100目ChromosorbWAWDMCS。2223．2．2流量：氮气60mL/min；氢气0.7kg/cm；空气0.5kg/cm。23．2．3温度：检测器250℃，进样口250℃，柱温220℃（测定敌敌畏时为190℃）。如同时测定四种农药可用程序升温。23．2．4色谱图中华人民共和国卫生部1996—06—19批准1996—09—01实施 GB/T5009.20—1996图51—敌敌畏；2—乐果；3—马拉硫磷；4—对硫磷23．3测定将标准使用液或样品液进样1～3μL，以保留时间定性；测量峰高，与标准比较进行定量。24计算m×10003X=……………………………………（3）2m4式中：X2——样品中有机磷农药的含量，mg/kg；m3——进样体积中有机磷农药的质量，mg；m4——进样体积相当于样品的质量，g。结果的表述：报告算术平均值的二位有效数值。25允许差相对相差≤10%。附加说明：本标准由卫生部卫生监督司提出。本标准第一篇由中国农业科学院分析测试中心、南京农业大学、卫生部食品卫生监督检验所负责起草；第二篇由卫生部食品卫生监督检验所、上海市卫生防疫站、北京市卫生防疫站负责起草；第三篇由江苏省卫生防疫站负责起草。中华人民共和国卫生部1996—06—19批准1996—09—01实施 GB/T5009.20—1996本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部食品卫生监督检验所负责解释。中华人民共和国卫生部1996—06—19批准1996—09—01实施'