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'ICS65.150B52DB33浙江省地方标准DB33/T872—2012杂交鳢“杭鳢1号”种质要求Requirementsforgermplasmofhybridsnakehead“HangliNo.1”[Channamaculate(♀)×Channaargus(♂)F1]2012-12-21发布2013-01-21实施浙江省质量技术监督局发布
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DB33/T872—2012前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由浙江省海洋与渔业局提出。本标准由浙江省水产标准化技术委员会归口。本标准起草单位:杭州市农业科学研究院。本标准主要起草人:谢楠、冯晓宇、郭水荣、刘凯、刘新轶、王宇希、姚桂桂。I
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DB33/T872—2012杂交鳢"杭鳢1号"种质要求1范围本标准规定了杂交鳢“杭鳢1号”的术语与定义、主要外部形态特征、生长、遗传学特性、检测方法及检验规则与结果判定等内容。本标准适用于杂交鳢“杭鳢1号”的种质检测与鉴定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T18654.1养殖鱼类种质检验第1部分:检验规则GB/T18654.3养殖鱼类种质检验第3部分:性状测定GB/T18654.4养殖鱼类种质检验第4部分:年龄和生长的测定GB/T18654.12养殖鱼类种质检验第12部分:染色体组型分析GB/T18654.13养殖鱼类种质检验第13部分:同工酶电泳分析3术语与定义下列术语和定义适用于本标准。3.1杂交鳢“杭鳢1号”HybridSnakehead“HangliNo.1”【Channamaculata(♀)×Channaargus(♂)F1】以珠江水系斑鳢为母本、钱塘江水系乌鳢为父本,通过杂交获得的杂交种F1。4主要外部形态特征4.1体形与体色鱼体呈纺锤形,头部尖而扁平,躯干前部浑圆后部侧扁,尾鳍呈圆形。口端位,下颌稍突出。背部青绿色,体侧灰黑色,腹部白色或灰白色。头侧具2条纵行黑色条纹,向后延伸在躯干部呈两列块状斑纹。头部上方具“”形斑纹,尾鳍基部具2至3条弧形斑纹。杂交鳢“杭鳢1号”外形见图1。杂交鳢“杭鳢1号”与亲本斑鳢、乌鳢体形与体色差异见附录A。1
DB33/T872—2012侧面观头部背面观图1杂交鳢“杭鳢1号”外形图4.2可数性状背鳍鳍式为D.0-42~48,臀鳍鳍式为A.0-27~32,侧线鳞数51~64,第一鳃弓外侧鳃耙数8~12。4.3可量性状杂交鳢“杭鳢1号”外部形态主要可量性状见表1。表1杂交鳢“杭鳢1号”外部形态主要可量性状全长/体长吻长/体长头长/体长眼径/体长眼间距/体长杂交鳢“杭鳢1号”(n=60)1.139±0.0550.036±0.0090.253±0.0090.027±0.0130.060±0.0155生长5.1生活习性杂交鳢“杭鳢1号”可摄食人工配合饲料、鲜活鱼虾及冰鲜鱼。水温14℃以下停止摄食,江浙地区自然条件下可安全越冬,最适生长水温25℃~30℃。5.2体重与体长关系2.295杂交鳢“杭鳢1号”体重与体长和关系式为y=0.1965x(体长30cm~35cm)。式中x代表体长(单位:cm);y代表体重(单位:g)。6遗传学特性6.1细胞遗传学特性染色体数:2n=45染色体组型见图2。2标准分享网www.bzfxw.com免费下载
DB33/T872—2012图2杂交鳢“杭鳢1号”染色体组型6.2生化遗传学特性杂交鳢“杭鳢1号”肾脏组织乳酸脱氢酶同工酶电泳图谱及电泳扫描图见图3。图3杂交鳢“杭鳢1号”乳酸脱氢酶电泳图谱及扫描图6.3分子遗传学特性以微卫星引物CHA19对杂交鳢“杭鳢1号”及斑鳢、乌鳢DNA进行PCR扩增、电泳,电泳图见图4。如图所示,能同时扩增出160bp条带和168bp条带的可确定为杂交鳢“杭鳢1号”,只扩增出160bp条带的可确定为斑鳢,只扩增出168bp条带的可确定为乌鳢。说明:M:标准分子量;1-7:乌鳢;8-14:斑鳢;15-28:杂交鳢“杭鳢1号”。图4引物CHA19PCR电泳图谱7检测方法3
DB33/T872—20127.1主要外部形态特征检测按GB/T18654.3规定的方法进行。7.2细胞遗传学特性检测按GB/T18654.12方法进行。7.3生化遗传学特性检测按GB/T18654.13规定的方法进行。7.4分子遗传学特性检测7.4.1DNA提取取肌肉组织,尽量剪碎,用DNA提取试剂盒或常规酚方法提取基因组DNA,TE溶解后-20℃保存备用。7.4.2PCR扩增CHA19引物序列为F:CTTGAGAACTGGCGACGTTT,R:TACGAAGAAATCCCCGTCTG。10μLPCR扩增反应体积内含:1XPCRBuffer,1.5mmol/LMgCl2,200μmol/LdNTP,200μmol/L上下游引物,0.1UTaq酶,100ng模板DNA,灭菌去离子水补齐。PCR反应程序为:95℃预变性3min;94℃变性30s,53℃退火30s,72℃延伸1min,23个循环;最后72℃延伸10min。7.4.3电泳PCR产物经8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,用Puc18DNA/MspI作为标准分子量,快速银染法染色,拍照后观察分析。8检验规则与结果判定按GB/T18654.1的规定执行。4
DB33/T872—2012AA附录A(资料性附录)杂交鳢“杭鳢1号”与亲本斑鳢、乌鳢体形与体色差异A.1概述本资料性附录给出了杂交鳢“杭鳢1号”与亲本斑鳢、乌鳢的体形与体色差异。A.2杂交鳢“杭鳢1号”与亲本斑鳢、乌鳢体形与体色差异杂交鳢“杭鳢1号”与亲本斑鳢、乌鳢的外形相似,主要差异表现在头长比例与体表斑纹,见图A.1和表A.1。杂交鳢“杭鳢1号”斑鳢乌鳢侧面观头部背面观图A.1杂交鳢“杭鳢1号”及斑鳢、乌鳢外形图5
DB33/T872—2012表A.1杂交鳢“杭鳢1号”与斑鳢、乌鳢外形差异差异部位杂交鳢“杭鳢1号”斑鳢乌鳢较杂交鳢“杭鳢1号”及斑鳢头长比例较乌鳢小与杂交鳢“杭鳢1号”接近大头部上方斑纹具“”形斑纹具“”形斑纹具“”形斑纹体侧具两列斑纹,上侧列斑体侧具两列排列整齐的块状纹呈连续状或少数几处断体侧斑纹排列不规则,呈块体侧斑纹斑纹开,下侧斑纹呈块状整齐排状斑纹列尾鳍基部斑纹具2至3条弧形斑纹具2至3条弧形斑纹无弧形斑纹_________________________________6'
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