EJT950-1995人绒毛膜促性腺激素放射免疫分析试剂盒.pdf 9页

'免费标准网(www.freebz.net)石J中华人民共和国核行业标准EJ/T950一95‘人绒毛膜促性腺激素放射免疫分祈试剂盒1995一07一05发布1995一11一01实施中国核1业总公司发布免费标准网(www.freebz.net)无需注册即可下载 免费标准网(www.freebz.net)中华人民共和国核行业标准人绒毛膜促性腺激紊放射免疫EJ/Tg苏0一95分析试剂盒主题内容与适用范围本标准规定了人绒毛膜促性腺激素(简称HCG)放射免疫分析试剂盒的技术条件、检验方法等。本标准适用于以免疫沉淀剂为分离剂的HCG放射免疫分析试剂盒。2引用标准GBll806放射性物质安全运输规定EJ/TSo4放射性同位素产品代号3产品代号及试剂盒的组成3.1产品代号应根据EJ/T804的规定编写相应产品代号，HCG放射免疫分析试剂盒的代号为:RIAI253142丫包装规格代码分离剂类别代码产品代码:--一‘一二二类别代码核素质量数代码元素代号放射免疫分析试剂盒代号3.2试剂盒的组成及主要试剂特性试剂盒的主要组成为:a.1251一HCG，中国核工业总公司1995一07一05批准199弓一11一01实施1免费标准网(www.freebz.net)无需注册即可下载 免费标准网(www.freebz.net)EJ/T950一95b.HCG标准品;c.杭HCG抗体;d.分离剂。3.3主要试剂特性主要试剂特性为:一a.‘251一HCG比活度:“.5~13G现·拌mol一’;放射化学纯度:大于90%。b.HCG标准品应用国家标准品标定，标定值与国家标准品的标示值偏差应不大于士10%。c.抗HCG抗体亲和常数:K》1又1口“L·mol一”。‘4试剂盒技术指标4.1灵敏度最小检出值不大于40mIU/mL。入厂少认4.2非特异结合率(N占B)应不大于5%。4.3最大结合率(B。)应大于40%。4.4精密度用样品测定值的变异系数(CV)表示。批内CV应不大于8%(n妻10);批间CV应不大于12%(n》10)。4.5准确度在一次测定中，低‘中高三个剂量的质控血清测定值均应在允许范围(又士ZSD一)内。4。6一回收率(及)应在90%~no%之间。_4.7相关系数:和有效剂量值ED剂量响应曲线的相关系数:的绝对值应不小于。.99。有效剂量ED75、ED50、ED25(即结合率分别为75%、50%、25%时对应的剂量值)应在可测范围内，其变化均应在(戈士ZSD)范围内。4.8测量范围推荐在40~1600IU·L一‘之间。4.，有效期在2一8℃条件下贮存。自生产之日起，有效期不少于42d。免费标准网(www.freebz.net)无需注册即可下载 免费标准网(www.freebz.net)EJ/T950一95检验方法按附录A(补充件)实验程序操作，也可以按其它等效实验程序操作。5.1灵敏度的测定按实验程序操作，做标准曲线，求出零标准管结合率(B。)的平均值及标准偏差SD(n)10)。用平均值减两倍标准偏差所得结合率在标准曲线上相应的剂量值即为试剂盒的灵敏度。5。2NSB的测定，分别加入与测定样品和抗血清相同体积的温育液及’“51一HCG，然后按取两支放免试管实验程序操作。NSB按公式(1)计算。NSB=〔(二一Cb)/(Ct一Cb)〕XloO铸..............⋯⋯，⋯⋯(1)式中:Cn—非特异管计数率，计数/而川Cb—仪器本底计数率，计数/min;c.—总放射性管计数率，计数/min。乐3B。的测定‘’:一’.:::.:，:一’‘六按实验程序操作，B。按公式(2)计算。B。=〔(C。一C。)/(C:一Cb)〕又100铸··················.·⋯⋯‘·(2)式中:C。—零标准管计数率，计数/min。5.4精密度的测定精密度用样品测定值的变异系数C犷表示。按实验程序操作，C犷按公式(3)计算。CV=(SD/又)xloo铸······························⋯⋯(3)式中:SD—n(n)10)次测定HCG值的标准差，工U·L一’;又—n(n)10)次测定HCG的均值，IU·L一’。5.5准确度的测定按实验程序操作，用低、中高三个剂量的质量控制一血清测定绮果计算SD。______一东6二R的测定一二--一认.-一“二一矛:-------一扮一几_一_少/--一:二在已知HCG含量的血样中加入一定量的HCG，然后测定血样中总HCG含量。按实验程序操作，R按公式(4)计算。R=〔(D:一Dk)/D:〕X10O铸···························⋯⋯(4)式中:D，—血样中测得的总HCG值，IU·L一‘;Dk—血样中已知的HCG含量，IU·L一‘;D。—血样中加入的HCG量，IU·L一’。5.7剂量响应曲线的绘制及r、ED值的计算按实验程序操作。各标准剂量点的放射性结合率B(习惯用B/B。表示)，按公式(5)计算:B=〔(C一二)/(C。一C。)〕又100呱···········，············⋯⋯(5)式中:C。—各标准剂量点的放射性计数率，计数/min。免费标准网(www.freebz.net)无需注册即可下载 免费标准网(www.freebz.net)EJ/T950一95以各标准剂量点的B为纵坐标，以各相应的标准剂量点的浓度为横坐标，绘制剂量响应曲线并计算得出ED巧、ED50、ED25的值。6检验规则6.1型式检验产品投产前及投产后工艺流程改变，原料更换，均须按本标准技术要求5.1一5.7中规定的内容检验。6.2出厂检验6.2.1全检方式与全检项目对出厂的每一个试剂盒均用目视法检查其组分、包装及标志。6.2.2抽检.6.2.2.1抽检项目NsB、B。剂量响应曲线及质量控制血清测定值。6.2.2.2抽检方式采取随机取样方式。发货量为1一100盒时抽1盒;101~30盒时抽2盒;301一500盒时抽3盒;501盒以上时抽4盒，6.2.2.3抽检结果判断以本标准规定的技术要求作为判断依据。所检各项指标全部符合要求时判为合格;若有一项不符合要求，应重新以原来的两倍的数量抽样复检，复检中有一项指标不合格，则整批试剂盒判为不合格。6.2.3检验证书产品应有检验合格证书，见附录B(参考件)。7标志，包装、运输和贮存7.1标志包括试剂盒封面标志、放射性试剂瓶标志‘试剂瓶标志。-二·7。1。1试剂盒封面标志包括:a生产厂家;.n产品名称;c.注册商标;d.产品代号;e.产品批号;f.批准文号;g.注意事项;h.有效期。7.1.2放射性试剂瓶标志包括:a。名称;免费标准网(www.freebz.net)无需注册即可下载 免费标准网(www.freebz.net)EJ/Tg弓0一95b.批号，c.放射性活度;d.测量日期;e.放射性标志。7.1.3试剂瓶标志包括:a.名称;b.批号;c。浓度;d.贮存条件;e.有效期。7.2包装和运输7.2.1包装包装盒内必须附有产品使用说明书。说明书内容包括:a。生产厂家;b.产品名称;c.产品代号;d.批准文号;e.产品批号;f.适用范围;9.方法原理;h.试剂盒的组成及试剂配制;1.操作程序;j.结果计算;k.技术指标;1.注意事项;---一m:一有效期;------二-.------一厂--一:-n.参考文献。包装必须保证运输及防护安全，应符合GBllso6豁免运输包装规定。7.2.2运输运输应符合GB11806的规定。7.3贮存试剂盒应贮存于2一8℃条件下。免费标准网(www.freebz.net)无需注册即可下载 免费标准网(www.freebz.net)EJ/T950一95附录A放射免疫法测血清HCG浓度(补充件)Al原理一rHcG和‘25LHcG与限量抗HCG抗体进行竟争免疫反应，‘251一HCG与抗HCp抗体的量保持一定，‘2‘1一HCG和抗HCG抗体的结合量与HCG的加入量呈函数关系，即HCG加入量越多，’251一HCG和抗HCG抗体的结合量越少。加人分离剂，使妞51一HCG和抗HCG抗体的结合物沉淀出来，弃上清液，通过测定沉淀的放射性计数率即可得知HCG的加入量。A2仪器设备心一界卜，华_几_、_.‘.._.厂;·;.;微量加样器、恒温水浴箱、免疫试管、冰箱、离心机、负压泵及，’51放单巡量仪等。A飞爪俘一比朴:一:拜范小级;召炭，︸实验程序一’一‘一钾勺-一卜..‘猛才以饥熟了A卜芯奋魂3.1按说明书要求配制有关试剂。莎三一飞了一厂与A3.2试管编号。1，2为总放射性(T)管;3，4为非特异管(NSB)管;5，6为零标准管刃一18为标准管;标准管编号以后为质量控制血清及样品管。一少一、A3.3操作顺序，按表Al实验顺序进行操作，逐步加人相应的试剂。溶液量以拌L表示。表AIHCG测定操作程序表试剂编号、、·:几操作程序T(1，2)NSB(3，4)零标准(5，6)标准(7~18)样品:卜.，产蒸馏水100...一..J..一沁、、二.右书、压口100100.---一-一一叨、Tl尤P日--一-一10以零标准)-.~J..一..一.一‘一1.、-—-一一一一一.一二一代_-一-扮二_三_分二_厂只拼二一性---一一万.一一一100.待测血清样品一’:-一二一、二-二:丫一1一..，.1125IesHCG、，100，._.100100一100、·处-IOp、皿.抗HCG抗体100100:100、，37，C温育Zh户一觅疾芬神.}’一””一’.}:”’100}..⋯:遍一仁-些二上二竺二摇匀，离心(35oor/min)，20min弃上清液(T管除外)。测量T管和各管放射性计数率。A4结果计算各管放射性结合物计数率减去NSB管放射性计数率，算出标准管或样品管的B。标准管按式(5)计算。样品管按式(AI)计算。免费标准网(www.freebz.net)无需注册即可下载 免费标准网(www.freebz.net)EJ/Tg动一95B=〔(q二C)/(Co一C)〕XIOO%...............⋯⋯0..⋯(Al)式中:q—样品管结合物的放射性计数率，计数/而n。以各标准管的B为纵坐标，HCG标准剂量点的浓度为横坐标，绘制剂量响应曲线。根据待测样品的B，在剂量响应曲线上查得样品HCG含量(见图AI)。、芝、赞J旅片云/瓦嗯，J，认沦一!荞毛砰、:廿‘:.“.认入头!占、少卜、岌气-飞尸阶‘声5叮、代写﹄之‘护月舒3又。盯.-1，|司1_资_;…/不1‘犷丹节玄一月一卜响浩迁一’-一!1—;下弘!﹃;吮(〕.汀!J;，刊1冬fl。!..)州.;碑10020050010002000青了之示IU夕ml，屯J户丈界.目‘护二r闷一.望‘廿HCG浓度卜‘尸几产二Jl.图AIHCG剂量响应曲线下月形7免费标准网(www.freebz.net)无需注册即可下载 免费标准网(www.freebz.net)月里泽涯于星急蓄1EJ/T950一95犷王，，，、?1·"附‘录B飞HCG放射免疫试荆盒检验合格证书格式竺:’、‘.(参考件)HCG放射免疫分析试剂盒检验合格证书产品名称产品批号标准批号抗体批号州习每瓶标记物标记物批号放射性活度_‘.”’、检验结果万SB/TB。/T忍D50酬二止质控血清测定结果(批号:*肾甲争弓·低值中值:/高值范围实测范围实测范围检验结论检验员复核员一‘检验单位盖章年月日七.口.口匀.目...目.口.口.1冬f十附加说明:f;本标准由全国核能标准化委员会放射性同位素分技术委员会提出本标准由北京北方免疫试剂研究所负责起草。本标准主要起草人:应希堂、刘秀珍、张庚宽二.‘_.声一污几气代免费标准网(www.freebz.net)无需注册即可下载'