水处理生物学实验 29页

水处理生物学实验\n实验要求上课准时、不得无故缺席，实验报告要及时上交。实验期间不得大声喧哗、服从老师的安排、注意安全。实验器材专人专用，对仪器要爱护，损坏实行赔偿制度。维护好实验室的环境卫生，实行值日生制度。\n实验报告要求统一用A4纸手写实验报告封面格式1、实验课程名称2、实验项目名称3、学生所在的专业、班级、姓名、学号4、实验日期5、同组者姓名\n实验报告格式1、实验目的2、实验原理3、实验仪器、溶液试剂4、实验步骤5、实验结果（如绘图、列表等）6、思考题\n实验内容显微镜的使用，曝气池中微生物与放线菌、霉菌的形态观察油镜的使用、细菌的单染色和革兰氏染色酵母菌的形态观察，微生物大小测定、显微镜直接计数法培养基的制备及灭菌水体中细菌总数测定与大肠菌群生理生化反应\n实验一（一）显微镜的构造、性能和使用方法\n一、目的要求了解普通光学显微镜的构造、基本原理、维护和保养的方法学习并掌握普通光学显微镜的正确使用方法\n二、显微镜的基本结构（一）机械装置镜座镜臂镜筒：单筒和双筒两种物镜转换器载物台载物台转移器调焦装置粗调节器细调节器\n（二）光学系统接目镜（目镜）接物镜（物镜）低倍镜（10×）高倍镜（40×）油镜（100×）聚光镜虹彩光圈反光镜\n显微镜的放大倍数=物镜放大倍数×目镜放大倍数显微镜的分辨率：显微镜能辨别两点之间的最小距离的能力。D=λ/2NA=λ/2n·sin(α/2)D：分辨率NA：物镜的数值孔径值：可见光的波长（平均0.55m)n:物镜和被检标本间介质的折射率：镜口角（即入射角）\n四、显微镜的使用方法观察前的准备显微镜的安置光源调节根据个人情况，调节双筒显微镜的目镜右眼看清调节左目镜的视度调节圈扳动镜管，调节至瞳孔间距\n显微观察低倍镜观察高倍镜观察（同焦现象）油镜观察在待观察的样品区域滴加香柏油，从侧面注视，用粗调节器将镜筒小心地降下，使油镜浸在镜油中。\n显微镜用毕后的处理上升镜筒，取下载玻片；用擦镜纸拭去镜头上的镜油，然后用擦镜纸沾取少量二甲苯擦去镜头上残留的油迹，最后用干净的擦镜纸擦去残留的二甲苯；用擦镜纸清洁物镜及目镜，用绸布清洁显微镜的金属部件；将镜体各部分复原。\n五、思考题使用显微镜时哪些地方须特别？\n（二）、曝气池中微生物等形态观察目的要求观察并绘图出曝气池中的菌胶团、原生动物、藻类等微生物形态。实验器材菌种曝气池活性污泥混合液仪器或其他用具显微镜，盖玻片，载玻片，滤纸，擦镜纸。\n步骤在载玻片中央加一滴活性污泥曝气池混合液→盖上盖玻片→用滤纸吸取渗出液体→低倍镜观察→高倍镜观察→绘出所观察到的微生物形态实验结果分别绘出你在低倍镜、高倍镜观察到的菌胶团、原生动物、藻类等的基本形态。\n（三）、放线菌、霉菌的形态观察目的要求学习并掌握观察放线菌、霉菌形态的基本方法；初步了解放线菌的形态特征；了解四类常见霉菌的基本形态特征。实验器材菌种细黄链霉菌，曲霉、青霉、根霉、毛霉\n培养基高氏Ⅰ号琼脂培养基察氏琼脂培养基溶液或试剂0.1%美蓝染色液，乳酸石碳酸棉蓝染色液仪器或其他用具显微镜，盖玻片，载玻片，接种环，解剖针等。\n扦片法倒平板→取孢子划线接种→无菌操作将灭菌的盖玻片以大约45℃扦在接种线上→28℃倒置培养3-5d→取培养后的盖玻片直接镜检或用0.1%美蓝对盖玻片染色后观察观察基内菌丝、气生菌丝、孢子丝的卷曲状况，以及分生孢子的形状，并绘图说明。放线菌的形态观察\n\n（二）霉菌的形态观察直接制片观察法在载玻片中央加一滴乳酸石炭酸棉蓝染色液；用解剖针挑取少量已产孢子的霉菌菌丝，先用50％乙醇洗去脱落的孢子，再放在载玻片的染液中(青霉、曲霉取菌丝时需连同培养基一起挑取)；用解剖针小心分散菌丝，盖上盖玻片；置低倍镜或高倍镜下观察。绘图说明四种霉菌的形态特征(有无横隔)。\n根霉：假根、匍匐菌丝、孢囊梗、孢子囊及孢子囊孢子\n毛霉：菌丝、孢囊梗、孢子囊及孢子囊孢子\n青霉：菌丝、分生孢子梗、帚状分支小梗及分生孢子\n曲霉：菌丝、足细胞、分生孢子梗、初生小梗、次生小梗、顶囊、分生孢子\n实验结果绘图说明你所观察到的放线菌和霉菌的形态特征。思考题镜检时，你如何区分放线菌的基内菌丝和气生菌丝？你主要根据哪些形态特征来区分四种不同的霉菌？\n\n调节手动光轮调节孔径光阑手柄聚光器的升降\n镜头复原、手动光轮调到最低档