GBT30359-2013蜂花粉.pdf 24页

'ICS65.140B47中华人民共和国国家标准GB/T30359—2013蜂花粉Beepollen2013-12-31发布2014-06-22实施 GB/T30359—2013前言本标准最初于1989年发布，后调整为行业标准（GH/T1014-1999）。现重新修订为国家标准。本标准与GB/T11758-1989《蜂花粉》相比主要变化如下：—修订了标准的适用范围，术语、定义；—蜂花粉的质量等级由三个等级改为二个等级；—删除了过氧化氢酶、维生素C指标；—理化指标中增加脂肪、总糖、黄酮类化合物、酸度、过氧化值指标；—修订了蛋白质、水分、灰分、单一品种花粉率的检测方法；—修订了附录A、附录B，增加了资料性附录C；本标准的附录A、B是规范性附录，附录C是资料性附录。本标准由中华全国供销合作总社提出并归口。本标准起草单位：杭州澳医保灵药业有限公司、国家轻工业食品质量监督检测杭州站。本标准主要起草人：胡晓岚虞英民陈青俊安然赵志良朱金梁徐承志楼晓燕本标准所代替的历次版本发布情况为：—GB/T11758-89（1999年调整为GH/T1014-1999）I GB/T30359—2013蜂花粉1范围本标准规定了蜂花粉的定义、要求、等级、试验方法、包装、标志、储存、运输要求。本标准适用于工蜂采集形成的团粒（颗粒）状蜂花粉或碎蜂花粉，不适用于破壁蜂花粉及以蜂花粉为原料加工成的产品。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T191包装储运图标标志GB5009.3食品安全国家标准食品中水分的测定GB5009.4食品安全国家标准食品中灰分的测定GB5009.5食品安全国家标准食品中蛋白质的测定GB/T5009.6食品中脂肪的测定GB/T5009.7食品中还原糖的测定GB/T5009.8食品中蔗糖的测定GB/T5009.37食用植物油卫生标准的分析方法GB7718食品安全国家标准预包装食品标签通则GB16326坚果食品卫生标准3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1花粉pollen雄配子体gametophyte由一个营养细胞和一个至二个生殖细胞组成的显花植物的雄性种质。3.2花粉壁pollenwall由纤维素和孢粉素构成的花粉（3.1）外壳。3.3蜂花粉Beepollen工蜂采集花粉（3.1），用唾液和花蜜混合后形成的物质。1 GB/T30359—20133.4单一品种蜂花粉monofloralbeepollen工蜂采集一种植物的花粉（3.1）形成的蜂花粉（3.3）。3.5杂花粉multifloralbeepollen工蜂采集二种以上植物的花粉（3.1）形成的蜂花粉（3.3），或二种以上单一品种蜂花粉的混合物。3.6破壁蜂花粉beepollenofbreakingwall经加工，花粉（3.1）壁被打破的蜂花粉（3.3）。3.7碎蜂花粉beepollendebris蜂花粉团粒（3.3）破碎后形成的蜂花粉粉末。3.8工蜂Worker在蜂群内担当采集、守卫、清理、哺育等内外勤工作的生殖器官发育不完全的雌性蜜蜂。4技术要求4.1感官要求感官要求应符合表1的规定。表1蜂花粉的感官要求要求项目团粒（颗粒）状蜂花粉碎蜂花粉色泽呈各种蜂花粉各自固有的色泽，单一品种蜂花粉色泽见附录A不规则的扁圆形团粒（颗粒），无明显能全部通过20目筛的粉末，无明显的状态的砂粒、细土，无正常视力可见外来杂砂粒、细土，无正常视力可见外来杂质，质，无虫蛀、无霉变无虫蛀、无霉变气味具有该品种蜂花粉特有的清香气，无异味滋味具有该品种蜂花粉特有的滋味，无异味2 GB/T30359—20134.2理化要求产品等级和理化要求符合表2要求。表2蜂花粉的等级和理化指标指标项目一等品二等品水分g/100g≤810碎蜂花粉率g/100g≤35单一品种蜂花粉的花粉率要求g/100g≥9085蛋白质g/100g≥15脂肪g/100g1.5-10.0总糖(以还原糖计)g/100g15-50黄酮类化合物（以无水芦丁计）（mg/100g）≥400灰分g/100g≤5酸度（以pH值表示）≥4.4过氧化值（以脂肪计）g/100g≤0.08注1：如果是碎蜂花粉，则碎蜂花粉率不作要求。4.3单一品种蜂花粉定性鉴别单一品种蜂花粉定性鉴别应符合附录A的要求。4.4安全卫生要求应符合国家相关法律、法规、规章、标准规定。5试验方法5.1感官指标检验5.1.1色泽、状态：将样品置于洁净的白瓷盘中，在自然光下用肉眼观察。5.1.2气味：鼻嗅。5.1.3滋味：口尝。5.2理化指标检验5.2.1水分测定按GB5009.3规定的第二法执行。5.2.2碎蜂花粉率测定用天平称取试样约50g，精确到0.1g，用20目筛筛出碎粒及碎粉末并称重。按式（1）计算。筛出的碎蜂花粉粉末质量碎蜂花粉率（%）100%（1）试样质量3 GB/T30359—20135.2.3蛋白质测定按GB5009.5规定的方法执行。5.2.4黄酮类化合物的测定按附录B的规定的方法执行。5.2.5灰分测定按GB5009.4规定的方法执行。5.2.6脂肪测定按GB/T5009.6规定的第二法执行。5.2.7总糖测定样品按GB/T5009.8中的盐酸水解处理后，再按GB/T5009.7规定的第一法执行。5.2.8单一品种蜂花粉的花粉率测定5.2.8.1第一法按附录A中的A.2处理样品，以100倍或400倍光学显微镜下镜检，如发现涂片中花粉细胞重叠，则重新涂片，每视野中花粉细胞总数在30-100范围为宜，调节显微镜的光线和焦距，使花粉细胞清晰，选取5个视野区域并对视野内的所有的花粉细胞进行计数，5个视野中某一品种的花粉数的总数与5个视野中所有的花粉数的总数之比即为单一品种的蜂花粉的花粉率。平行试验应重新涂片检测，两次平行试验的相对误差应不大于10%。5.2.8.2第二法称取试样约(1-3)g,拣出其中该品种蜂花粉团粒，分别称量，按式（2）计算。该品种蜂花粉团粒数重量单一品种蜂花粉率（%）100%（2）试样蜂花粉团粒总数重量5.2.9酸度的测定取花粉20g，加入5倍量的纯化水，75℃水浴提取1.5h待冷却，滤过，离心20min，取上清液，然后按仪器操作说明书进行测量，并记录其pH值，精确至0.02，pH值的结果以两次测量的平均值表示。5.2.10过氧化值的测定样品的前处理按照GB16326(坚果食品卫生标准)中的9.1，然后按GB/T5009.37中的4.2中的第一法测定。5.3单一品种蜂花粉的定性鉴别：按附录A。6包装、标志、贮存、运输6.1包装用于食用的蜂花粉包装材料应符合食品安全要求，包装容器牢固、严密、整洁、无破损、无泄漏。6.2标志4 GB/T30359—20136.2.1包装物或者标识上应当按照规定标明产品的品名、净含量、产地、生产者（加工者或包装者）或经营单位、生产日期、保质期、产品质量等级、单一品种需注明粉源植物等内容。6.2.2预包装食品标签应符合GB7718的要求，运输包装应符合GB/T191的规定。6.3贮存6.3.1用真空充氮包装，在常温下保存。其他包装的应在-5℃以下保存。6.3.2短期临时存放，应经过干燥和密闭处理后存于阴凉干燥处。6.3.3不同产地、花种、等级或不同季节采集的产品应分别贮存。6.3.4贮存场所应清洁卫生，防高温、防风雨、远离污染源。6.3.5不得与有毒、有害、有腐蚀性、有异味、易挥发的物品同场所贮存。6.4运输6.4.1运输工具应清洁卫生。运输过程中，要避免高温，防风沙、放曝晒、防雨淋、防湿。6.4.2轻装轻卸，不得与有毒、有害、有异味、易污染的物品同装混运。5 GB/T30359—2013AA附录A（规范性附录）单一品种蜂花粉的定性鉴别和显微镜检验方法A.1单一品种蜂花粉色泽和细胞形态A.1.1油菜（Brassicacampestrie）花粉油菜花粉为黄色细胞呈近似长球形，按形态特征分为白菜型、甘蓝型、芥菜型。极面观为三列片状，三道萌发沟明显；赤道面观为圆形或椭圆形。电子显微镜下观察外壁具网状雕纹。白菜型长径为32m～39m，甘蓝型和芥菜型长径为40m～46m。见图A.1。a)油菜花粉赤道面观形态（×400）b)油菜花粉极面观形态（×400）图A.1油菜花粉细胞显微镜下的形态A.1.2芝麻(Sesamumindicum)花粉芝麻花粉为白色或咖啡色。细胞呈扁球形（似扁南瓜），少数为球形。赤道面观为阔椭圆形，极面观为12裂圆形。表面有瘤状雕纹，从正面观察为负网状，35.3m×40.1m。具有10～13道萌发沟，间隙较宽。极面直径约65m，赤道面直径约45m。见图A.2。a)芝麻花粉赤道面观形态（×100）b)芝麻花粉极面观形态（×100）6 GB/T30359—2013图A.2芝麻花粉细胞显微镜下的形态A.1.3荞麦(FagopyrumesculentumMoench)花粉荞麦花粉为暗黄色。花粉细胞呈长球形，表面有细网状雕纹，赤道面观为椭圆形，极面观为3裂圆形。极面观察可见三道明显萌发沟。极面直径约44m。赤道面直径经约31m。见图A.3。a)荞麦花粉赤道面观形态（×100）b)荞麦花粉极面观形态（×100）图A.3荞麦花粉细胞显微镜下的形态A.1.4向日葵(Helianthusannuus)花粉向日葵花粉为桔黄色。花粉细胞呈圆球形，赤道面观为椭圆形，极面观为3裂圆形，直径约为35m。外壁有尖剌，刺长3m～5m。表面有3孔沟，间隔5m～10m。见图A.4。a)向日葵花粉赤道面观形态（×100）b)向日葵花粉极面观形态（×100）图A.4向日葵花粉细胞显微镜下的形态A.1.5玉米(Zeamays)花粉玉米花粉为淡黄色。花粉细胞呈近似球形，直径约80m。外壁光滑，有一个圆的萌发孔。见图A.5。7 GB/T30359—2013a)玉花粉赤道面观形态（×100）b)玉米花粉极面观形态（×100）图A.5玉米花粉细胞显微镜下的形态A.1.6紫云英(Astragalussinicus)花粉紫云英花粉为桔红色。花粉细胞呈长球形，赤道面观长椭圆形，极面观为钝三角形或三裂片状。极面直径约30m，赤道面直径约15m。表面具细网状雕纹，有三孔沟。见图A.6。a)紫云英花粉赤道面观形态（×100）b)紫云英花粉极面观形态（×100）图A.6紫云英花粉细胞显微镜下的形态A.1.7蚕豆(Viciafaba)花粉蚕豆花粉为黑绿色。花粉细胞呈长球形，赤道面观为椭圆形，极面观为钝三角形，大小约为30m×50m。表面具细颗粒雕纹，有三条萌发沟。见图A.7。8 GB/T30359—2013a)蚕豆花粉赤道面观形态（×100）b)蚕豆花粉极面观形态（×100）图A.7蚕豆花粉细胞显微镜下的形态A.1.8西瓜(Citrulluslanatus)花粉西瓜花粉为紫黄色。花粉细胞呈近似球形，约55m×60m。外壁表面具有较大的网状雕纹，有3孔沟。极面观为三裂片状。见图A.8。a)西瓜花粉赤道面观形态（×100）b)西瓜花粉极面观形态（×100）图A.8西瓜花粉细胞显微镜下的形态A.1.9南瓜(Cucurbitamoschata)花粉南瓜花粉为深黄色。花粉细胞呈圆球形，直径150m。表面有尖刺，刺长约5m～10m。见图A.9。9 GB/T30359—2013a)南瓜花粉赤道面观形态（×100）b)南瓜花粉极面观形态（×100）图A.9南瓜花粉细胞显微镜下的形态A.1.10柑桔(CitrusreticulataBanco)花粉柑桔花粉为黄色。花粉细胞呈近似球形，赤道面观为椭圆形或近似矩形。极面观为4～5裂圆形。具4～5孔沟，表面具网状雕纹。近似球形的直径约30m。椭圆形的赤道直径为28m，极面直径为32m。见图A.10。a)柑桔花粉赤道面观形态（×100）b)柑桔花粉极面观形态（×100）图A.10柑桔花粉细胞显微镜下的形态A.1.11党参(Codonopsispilosula)花粉党参花粉为黄色。花粉细胞呈近似球形，赤道面观近扁圆形，极面观为6裂圆形，表面有颗粒状雕纹，有6～7道细条状萌发沟。大小约35m×40m。见图A.11。10 GB/T30359—2013a)党参花粉赤道面观形态（×100）b)党参花粉极面观形态（×100）图A.11党参花粉细胞显微镜下的形态A.1.12蒲公英(HerbaTaraxaci)花粉蒲公英花粉为黄色。花粉细胞呈近似球形，直径约28.3m。表面有明显刺网状雕纹，有三孔沟。见图A.12。a)蒲公英花粉赤道面观形态（×100）b)蒲公英花粉极面观形态（×100）图A.12蒲公英花粉细胞显微镜下的形态A.1.13荷花(Nelumbonucifera)花粉荷花花粉为黄色。花粉细胞呈近似球形。赤道面观椭圆形，极面观为三裂圆形，直径约65m～68m。具三沟，沟宽。壁厚4.4m～5.2m。表面有颗粒状纹。见图A.13。11 GB/T30359—2013a)荷花花粉赤道面观形态（×100）b)荷花花粉极面观形态（×100）图A.13荷花花粉细胞显微镜下的形态A.1.14茶花(CamelliaJaponica)花粉茶花花粉为黄色。花粉细胞呈近似球形。赤道面观椭圆形，极面观为钝三角形或3裂圆形，直径34m～52m。有三孔沟，内孔大，横长。表面有细网状纹。见图A.14。a)茶花赤道面观形态（×100）b)茶花花粉极面观形态（×100）图A.14茶花花粉细胞显微镜下的形态A.1.15玫瑰(Rosarugosa)花粉玫瑰花粉为黄色。花粉细胞呈近似球形。赤道面观椭圆形，极面观为三裂圆形，直径约17m～22m。具三沟。表面有细网状或脑状雕纹。见图A.15。12 GB/T30359—2013a)玫瑰花粉赤道面观形态（×100）b)玫瑰花粉极面观形态（×100）图A.15玫瑰花粉细胞显微镜下的形态A.1.16五味子（FructusSchisandraeChinensis）花粉五味子花粉为黄色。花粉细胞呈近似球形。赤道面观椭圆形，极面观为近球形，极面观6裂圆形，花粉大小约25m×23m。见图A.16.a)五味子花粉赤道面观形态（×100）b)五味子花粉极面观形态（×100）图A.16五味子花粉细胞显微镜下的形态A.2蜂花粉品种的鉴别—显微镜镜析法A.2.1仪器光学显微镜：10×10倍、10×40倍。A.2.2步骤取蜂花粉10～15粒置于刻度指形管中，加入硫酸和冰乙酸的混合液（1：9），浸没花粉粒。用玻璃棒捣碎花粉后，加热至沸，保持5min。冷却后加蒸馏水转移至离心管中离心，离心后弃去上清液，再加蒸馏水摇匀离心，共离心3次。沉淀物加甘油数滴搅匀。用玻璃棒蘸取1滴涂在载玻片上，盖上盖玻片，在显微镜下检视。按本附录A.1的图谱对照鉴别。13 GB/T30359—2013BB附录B（规范性附录）花粉中黄酮类化合物的分析测定方法B.1试剂除非另有说明，分析中至少使用分析纯试剂和蒸馏水或去离子水。B.1.1无水乙醇B.1.270%(V/V)乙醇：纯化水30ml加无水乙醇70ml，即得。B.1.35%亚硝酸钠溶液：称取5.0g亚硝酸钠，用纯化水定容至100ml。B.1.410%硝酸铝溶液：称取17.6g硝酸铝，用纯化水定容至100ml。B.1.5氢氧化钠试液：称取4.3g氢氧化钠，用纯化水定容至100ml。B.1.6芦丁标准溶液B.1.6.1芦丁对照品贮备液：精密称取芦丁对照品50mg，置50ml量瓶中，加70%乙醇（B.1.2）适量，振摇使溶解，并稀释至刻度。B.1.6.2芦丁对照品使用溶液：精密吸取10ml芦丁对照品贮备液（B.1.6.1），置50ml量瓶中，加70%乙醇（B.1.2）适量，振摇使溶解，并稀释至刻度。B.2仪器设备B.2.1紫外可见分光光度计B.3试样的制备取花粉样品磨碎粉末1.0g～3.0g，精密称定（精确至0.0001g），加70%乙醇40ml，加热回流2小时，冷却，滤过，置50ml量瓶中，以70%乙醇洗涤残渣，洗液并入量瓶中，用70%乙醇定容至刻度，摇匀。精密吸取2ml置10ml量瓶中，用70%乙醇稀释至刻度，摇匀。B.4分析步骤B.4.1标准曲线的制备精密量取对照品使用溶液（B.1.6.2）0、1、2、3、4、5、6ml，分别置25ml量瓶中，各加水至6.0ml，加5%亚硝酸钠溶液和10%硝酸铝溶液各1ml，摇匀，放置6分钟，加氢氧化钠试液10ml，加水至刻度，摇匀，放置15分钟。照分光光度法测定，在510nm波长处测定吸光度，以吸收度为纵坐标，浓度为橫坐标，绘制标准曲线。B.4.2样品的测定精密吸取B.3项下制备好的样品溶液2ml，置25ml量瓶中，加水至6.0ml，加5%亚硝酸钠溶液和10%硝酸铝溶液各1ml，摇匀，放置6分钟，加氢氧化钠试液10ml，加水至刻度，摇匀，放置15分钟。照分光光度法测定，在510nm波长处测定吸光度，将吸光值带入回归方程，计算，即得。B.5计算B.5.1黄酮含量按下式（4）计算14 GB/T30359—2013mX100%（4）wd1000式中：X—黄酮含量，%；m—由标准曲线上计算得到的样品比色液中芦丁质量，单位为毫克（mg）；w—样品的质量，单位为克（g）；d—稀释比例B.5.2计算结果精确或保留到小数点后两位。B.6允许差同一操作者两次平行测定结果允许的相对误差应不大于3%。C15 GB/T30359—2013DC附录C（资料性附录）电子显微镜下蜂花粉的形态特征C.1电子显微镜下蜂花粉的形态特征C.1.1油菜花粉细胞电镜下的形态a)油菜花粉赤道面观形态（×4000）b)油菜花粉极面观形态（×6000）图C.1油菜花粉细胞电镜图C.1.2芝麻花粉细胞电镜下的形态a)芝麻花粉赤道面观形态（×2000）b)芝麻花粉极面观形态（×2500）图C.2芝麻花粉细胞电镜下的形态C.1.3荞麦花粉细胞电镜下的形态16 GB/T30359—2013a)荞麦花粉赤道面观形态（×2500）b)荞麦花粉极面观形态（×3000）图C.3荞麦花粉细胞电镜下的形态C.1.4向日葵花粉细胞电镜下的形态a)向日葵花粉赤道面观形态（×3000）b)向日葵花粉极面观形态（×3000）图C.4向日葵花粉细胞电镜下的形态C.1.5玉米花粉细胞电镜下的形态17 GB/T30359—2013a)玉米花粉粒形态（×2000）b)玉米花粉外壁雕纹与萌发孔形态（×2000）图C.5玉米花粉细胞电镜下的形态C.1.6紫云英花粉细胞电镜下的形态a)紫云英花粉赤道面观（视2孔沟）形态（×7000）b)紫云英花粉极面观形态（×6000）图C.6紫云英花粉细胞电镜下的形态C.1.7蚕豆花粉细胞电镜下的形态a)蚕豆花粉赤道面观（视2孔沟）形态（×3000）b)蚕豆花粉极面观形态（×4000）图C.7蚕豆花粉细胞电镜下的形态C.1.8西瓜花粉细胞电镜下的形态18 GB/T30359—2013a)西瓜花粉赤道面观形态（×3000）b)西瓜花粉极面观形态（×3000）图C.8西瓜花粉细胞电镜下的形态C.1.9南瓜花粉细胞电镜下的形态a)南瓜花粉表面雕纹形态（×1000）b)南瓜花粉粒形态（×1000）图C.9南瓜花粉细胞电镜下的形态C.1.10柑桔花粉细胞电镜下的形态19 GB/T30359—2013a)柑桔花粉赤道面观形态（视2孔沟（×7000）b)柑桔花粉极面观形态（×7000）图C.10柑桔花粉细胞电镜下的形态C.1.11党参花粉细胞电镜下的形态a)党参花粉赤道面观形态（×4000）b)党参花粉极面观形态（×4000）图C.11党参花粉细胞电镜下的形态C.1.12蒲公英花粉细胞电镜下的形态a)蒲公英花粉赤道面观形态（×7000）b)蒲公英花粉极道面观形态（×7000）图C.12蒲公英花粉细胞电镜下的形态20 GB/T30359—2013C.1.13荷花花粉细胞电镜下的形态a)荷花花粉赤道面观形态（×2000）b)荷花花粉远极面观形态（×2500）图C.13荷花花粉细胞电镜下的形态C.1.14茶花花粉细胞电镜下的形态a)茶花花粉赤道面观形态（×3000）b)茶花花粉极面观形态（×4000）图C.14茶花花粉细胞电镜下的形态图C.1.15玫瑰花粉细胞电镜下的形态21 GB/T30359—2013a)玫瑰花粉赤道面及表面雕纹形态（×8000）b)玫瑰花粉极面观形态（×7000）图C.15玫瑰花粉细胞电镜下的形态注：电子显微镜照片由浙江大学电镜室制作C.2蜂花粉品种的鉴别—电子显微镜镜析法C.2.1仪器扫描电镜：TM-1000型（日本日立公司），放大倍数：20～10000倍；离子溅射仪：IB-5型（日本日立公司）。C.2.2步骤C.2.2.1样品称取和净化：用四分法均匀选取花粉样品，在万分之一电子天平上称取0.1克放入2ml指型管中，加入纯净水（25℃）1.5ml，置于超声波清洗器中超声10分钟，静止3分钟后弃去上层清洗液，重复二次。同法再用丙酮（分析纯）和无水乙醇（分析纯）进行漂洗,然后将样品平摊在中性滤纸上自然风干。C.2.2.2样品贴台和镀膜：在粘有双面碳导电胶带的扫描电镜样品台上，用取样杆将样品均匀撒落在样品台上并轻轻展开，放入离子溅射仪（IB-5型，日本日立公司）中，在真空度优于0.1Torr，电源开关在HV，电压旋钮为5，电流表读数在4～6mA时，进行溅射5分钟，取出后待电镜观察。C.2.2.3扫描电镜观察：将待观察的样品台放入扫描电镜（TM-1000型，日本日立公司）内、在放大倍数：20～10000倍、加速电压：15kV、室内温度：15℃～25℃、相对湿度：≤70%、电源：110VA、频率50／60Hz的条件下，调到最佳的清晰度、亮度、对比度和放大倍数，进行图像扫描拍摄。_________________________________22'