GB7649-1987谷物籽粒氨基酸测定的前处理方法.pdf 3页

'中华人民共和国国家标准UDC633.1:543-05谷物籽粒氨基酸测定的前处理方法GB7649-87Pretreatmentmethodfordetermination吐aminoacidsincerealgrains1适用范围本标准适用于氨基酸分析仪测定谷物籽粒中氨基酸含量的样品前处理。2方法原理谷物籽粒中的氨基酸.系按一定顺序结合成不同类型的肤和蛋白质，因而在测定前要用一定浓度的酸使蛋白质中肤键断裂，水解成多种氨基酸后，用氨基酸分析仪测定.由于色氮酸在酸性溶液中水解时易被破坏，须用碱水解。3仪器设备3.1分析天平:感量0.00018,3.2实验室用粉碎机。3-5喷灯。3.4真空泵。3.5真空规。3.6恒温干燥箱。3.7水解管:用九五料玻瑞制的球形管或圆底试管。体积15^-20ml,3.8聚四氟乙烯管;"loxl00mm,3.9玻璃试管:015X180mm,3.10浓缩器(可控温，减压)或真空干燥器。3.11容量瓶:25ml,4试荆除注明者外均为分析纯。配制试剂均用去离子水，电导率大于1m。一‘。4.16mol/L盐酸:盐酸(GB622-77)，优级纯，与水按1，1混合。4mol/L氢氧化铿:用水溶解168.8g氢氧化理(Q/HG12-325-83),稀释至1000m1;4.2pH2.2缓冲液:19.6g柠橄酸三钠(HG3-1298-80)用水溶解后，加入16.5m1盐酸(GB6224.3优级纯),5ml25写硫代双乙醉,lg苯阶(HG3-1165-78),最后定容至1000m1,一77,pH4.3缓冲液:14.718柠椒酸三钠(HG3一1298一80)和2.92g氛化钠(GB1266一77)，4.410.508柠檬酸(HG3-1108-81),溶解在500ml水中，再加入5ml25硫代双乙醇，0.1ml辛酸，最后定容至l000mla4.5冷冻剂:液氮或干冰加丙酮(或加乙醇)。中华人民共和国农牧渔业部1987-03一26批准1987一11一15实施 GB7649一875试样制备5.1取有代表性的样品，用四分法分取25g左右，拣去杂质，带壳籽粒进行脱壳。5.2将样品放在6065℃恒温干燥箱中。干燥8h左右冷却后在粉碎机中碾碎，全部通过孔径为0.25mm的筛子，充分混匀后装入磨口瓶中备用。6处理方法6.1酸水解步驻6.1.1称样称取样品30士5mg，准确至0.lmg,置于水解管中，同时另称样品按GB3523-83((谷类、油料作物种子水分测定法》，测定水分含量。6.1.2水解6.1.2.1在水解管内加人6mol/L盐酸lOml,在距管口2cm左右处，用喷灯灼烧并拉一细颈。再将管子放入冷冻剂中，冷却至溶液呈固体后取出，接在真空泵的抽气管上，使减压至7Pa蕊5X10-mmHg)后封口。6.1.2.2将封好口的水解管放在110士1℃的恒温干燥箱内，水解22-24h后，取出冷却。6.1.2.3打开水解管，将水解液定量转移到25m1容量瓶内，定容过滤，吸取滤液Iml，用旋转浓缩器(4550"C)或置于真空干燥器内真空干燥，残留物用1--2m1去离子水溶解蒸干，如此反复进行1-2次，最后一次蒸干后，加pH2.2缓冲液溶解，供仪器测定.6.2砚水解步钾B-2.1称样称取样品60f5mg准确至0.1mg,置于聚四氟乙烯管内，同时按GB3523-83测定水分。6·2，2水解6.2.2.1在聚四氟乙烯管内加入4mol/L氢氧化锉lml，使样品均匀湿润，然后把管子放人玻璃试管中，在玻璃管上端，离聚四氟乙烯管4-5cm处.用喷灯灼烧并拉一细颈，再放到冷冻剂中，冷却至溶液呈固体后取出，接在真空泵的抽气管上，减压至7Pa(<5X10-mmHg)后封口。6,2.2.2把管子放在110士1℃的恒温干操箱内水解20h，取出冷却，将水解液定量转移到25ml容量瓶内，用6mol/L盐酸中和后，再用pH4.3的缓冲液定容，过滤后供测定色氨酸用。标准分享网www.bzfxw.com免费下载 GB7649一87附录A氮墓酸分析仪测定的结果计算(补充件)A。1计算公式某种氨基酸，%(T基，一In(]粤H}X10-"X25X100式中A测得的某种氮基酸在每毫升水解液中的含量，mg;。—样品的质量，mg;H—样品的水分百分率;25-稀释倍数。A.2结果衰示两个平行样品的测定结果用算术平均值表示，保留小数点后有效数字两位。A.弓结果的允许差两个平行测定值相对差不得大于8%.www.bzfxw.com附加说明:本标准由上海农科院测试中心负贵起草。本标准主要起草人顾金炎。'