GBT26352-2010蜚蠊抗药性检测方法德国小蠊生物测定法.pdf 6页

'ICs11。020CO5中华人民共和国国家标准GB/T26352-2010蜚蠊抗药性检测方法德国小蠊生物测定法TestrnethodsoFccDckroachresistancetoiⅡsecticidesˉˉThebioassaymethodsforBlatte11agermanica2011-O⒈10发布⒛11-05-01实施串刀蹴鏊发布 GB"T26352-2010前言本标准按照GB/T1.1一⒛Og给出的规则起草。本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。本标准起草单位:北京市疾病预防拄制中心、中国农业大学、中国人民解放军军事医学科学院傲生物流行病研究所。本标准主要起草人:曾晓亢、马彦、高希武、钱坤、薛素琴、佟颖、童盲德。标准分享网www.bzfxw.com免费下载 GB/T26352-2010蜚蠊抗药性检测方法德国小蠊生物测定法1范围本标准规定了德国小蠊(gσ〃臼历c色)对有机磷类(甲酸酯类、拟除虫菊酯类等杀虫药剂抗药性的诊断剂量法和敏本标准适用于德国术语和定义下列术语和2.:诊断剂Ⅱ由敏感品量值。2.2F1代F1从现场捕www.bzfxw.com试虫现场采集德试剂丙酮或其他有机乙醚,杀虫剂原药5仪器养虫缸,500mL的锥形瓶,微量6测试条件温度:25℃±1℃,相对湿度:50%~BO%。7敏感基线法7.1原理依据杀虫剂应用剂量和死亡机率值关系建立毒力回归方程,以敏感品系得到的杀虫剂毒力回归线1 GB/T26352-2010作为敏感基线。以待测昆虫种群得到的杀虫剂毒力回归线与敏感基线对比,来确定待测种群的抗性水平。具体是比较两条毒力回归线的3值变化以及由毒力回归线计算得到的半数致死量的变化。7.2操作步骤7.2.1药膜法用丙酮或其他的有机溶剂将供试杀虫药剂配成一定浓度的母液。用丙酮或其他易挥发的有机溶剂将杀虫药剂母液稀释至一个系列浓度,通过预实验确定药剂的浓度系列范围,最低浓度时死亡率小于zO%,最高浓度时大于sO%。取不同浓度药剂溶液2.5mL加于500mL锥形瓶中,不断转动锥形瓶,10头,用纱网或使药液均匀分布于瓶内壁,置于通风橱中过夜,使有机溶剂全部挥发。然后每瓶放试虫纱布封口。每个浓度试验重复3次,以相应溶剂处理为对照组。24h后记录死亡数。7.2.2点滴法用丙酮或其他的有机溶剂将供试杀虫药剂配成一定浓度的母液。用丙酮或其他易挥发的有机溶剂将杀虫药剂母液稀释至一个系列浓度,通过预实验确定药剂的浓度系列范围,最低浓度时死亡率小于zO%,最高浓度时大于80%。试虫用二氧化碳或乙醚麻醉,用微量点滴器将1uL杀虫剂药液点滴于雄性成虫第2、3对足基节间的胸部腹板上,以点滴相应溶剂为对照组。每个浓度试验重复3次。将处理后的试虫转人清洁容器内,供给水和食物。24h后记录死亡数。7.3死亡判断试虫不能正常www.bzfxw.com爬行或完全不动视为死亡。7.4结果表述结果用抗性倍数表述,抗性倍数=待测种群LC50(LD50)值/敏感种群LC5。(LD5°)值。7.5判别标准敏感品系和测定样本95%置信限不重叠,且抗性倍数大于等于5倍为抗性种群。8诊断剂Ⅰ法8.1原理依据药剂对敏感品系的毒力回归线,确定一个能够区分敏感个体和抗性个体或抗性杂合子的剂量。一般用2倍敏感品系的LD99(LCθ9)值作为诊断剂量。根据待检测德国小蠊种群在诊断剂量下的死亡率做为抗性判定标准。8.2操作步骤8.2.1药膜法用丙酮或其他的有机溶剂将供试杀虫药剂配成一定浓度的母液。用丙酮或其他易挥发的有机溶剂将杀虫药剂母液稀释到一定的浓度,取2.5mL溶液加于500mL锥形瓶中(锥形瓶内表面药膜的最终剂量达到诊断剂量,常见杀虫药剂对敏感德国小蠊品系的诊断剂量参见表A。D,不断转动锥形瓶,使药液均匀分布于瓶内壁,置于通风橱中过夜,使有机溶剂全部挥发。然后每瓶放试虫10头,用纱网或纱布封口。试验重复10次,以相应溶剂处理为对照组。24h后记录死亡数。2标准分享网www.bzfxw.com免费下载 GB/T26352-20108.2.2点滴法用丙酮或其他的有机溶剂将供试杀虫药剂配成一定浓度的母液。用丙酮或其他易挥发的有机溶剂将杀虫药剂母液稀释到诊断剂量需要的浓度(常见杀虫药剂对敏感德国小掭品系的诊断剂量参见表A.l)。试虫用二氧化碳或乙醚麻醉,用微量点滴器将1uL杀虫剂药液点滴于雄性成虫第2、3对足基节间的胸部腹板上,以点滴相应溶剂为对照组。每次测定至少处理100头试虫。将处理后的试虫转人清洁容器内,供给水和食物。24h后记录死亡数。8.3死亡判断试虫不能正常爬行或完全不动视为死亡。8.4结果表述结果用死亡率表述,计算见公式(1)。M=十×100%⋯⋯⋯¨⋯⋯¨⋯⋯⋯⋯⋯(1)式中:M——死亡率;Nm——死亡虫数;N——试虫总数。对照死亡率小于5%无需校正;对照死亡率在5%~20%之间,用Abbott公式进行校正;对照死亡率大于20%为无效测定。依据Abbott公www.bzfxw.com式校正死亡率,计算见公式(2)。瓯=2纡×100%⋯¨⋯¨⋯¨⋯¨⋯¨⋯¨(2)社式中:Mm——校正死亡率;——⒕处理组死亡率;Mc——对照组死亡率。8.5判别标准校正死亡率小于80%为抗性种群。 O冖0ΝGB/T26352-2010ˉlΝ⒄∞附录A0Ν(资料性附录)〓`臼常见杀虫药剂对敏盛德国小味品系的诊断剂Ⅰ0表A。1给出了常用杀虫药剂对敏感德国小竦品系的诊断剂量。表A。1常见杀虫药剂对敏盛德国小蠊品系的诊断剂Ⅱ诊断剂量(点滴法)诊断剂量(药膜法)杀虫药剂LCg。LC90ug/头mg/L1.1×4刃咤另息虏昆(pr°poxur)1.o10ˉ氨菊酯(permethHn)1.5溴氤菊酯(deltamethrin)o。1氯氰菊酯(cypermethrin)o。53.5×4敌敌畏(DDVP)1.o10ˉ注:敏感品系来自北京市疾病预防控制中心医学昆虫饲养室,测定时间为⒛04年10月。www.bzfxw.com版权专有侵权必究书号:155066·⒈42183GB/T26352-2010定价:J0.00元标准分享网www.bzfxw.com免费下载'