DB34T1369-2011鸡肉组织中氯羟吡啶的残留测定-气相色谱质谱法.pdf 8页

'ICS67.120B45DB34安徽省地方标准DB34/T1369—2011鸡肉组织中氯羟吡啶的残留测定-气相色谱质谱法Determinationclopidolresidueinchickentissue-Gaschromatographymassspectrometrymethod2011-03-16发布2011-04-16实施安徽省质量技术监督局发布 DB34/T1369—2011前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由安徽省畜牧兽医局提出。本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：安徽省兽药饲料监察所(安徽省畜产品质量安全检测中心)。本标准主要起草人：吴蕾、张莉、刘红云、明文庆、蔡一杰、丁作坤、陶小平、钱志平、吴昊。I DB34/T1369—2011鸡肉组织中氯羟吡啶的残留测定—气相色谱质谱法1范围本标准规定了用气相色谱—质谱法测定鸡肉组织中氯羟吡啶残留测定方法。本标准适用于鸡肉组织中氯羟吡啶的残留测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3试样制备取有代表性鸡肉样品切成小块，制成糜状后，装入洁净容器中、密封、并标明标记，于-18℃以下冷冻保存。4原理试样中残留的氯羟吡啶用乙腈提取，经碱性氧化铝柱层析柱净化分离，再用N,O-双三甲基硅基三氟乙酰胺（BSTFA）+1％三甲基氯硅烷（TMCS）衍生化，气相色谱-质谱分析进行定性和定量分析。5试剂和溶液5.1除非另有说明，本法所用试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682二级水的规定。5.2氯羟吡啶对照品：含氯羟吡啶≥98.0％。5.3标准储备液：精密称定氯羟吡啶对照品适量，用甲醇配制成100μg/mL标准储备液，4℃冰箱中保存，有效期6个月。5.4标准工作液：精密量取适量氯羟吡啶储备液，用甲醇稀释为10、20、50、100、200、500ng/mL的标准工作液，4℃冰箱中保存，备用，有效期7天。5.5乙腈：色谱纯。5.6甲醇：色谱纯。5.7甲苯。5.8异丙醇。5.9硫酸钠：使用前需在马弗炉内550℃条件下煅烧4h，于干燥器中冷却，过100目筛后备用。5.10碱性氧化铝：（碱性氧化铝层析柱的制备：采用具塞的玻璃柱(300mm×15mm)，下端带G3砂芯板；先于柱中加适量乙腈，再加入约1cm高的硫酸钠，中间填充4cm高的碱性氧化铝层，然后在柱上端填充1cm高的硫酸钠）。1 DB34/T1369—20115.11衍生化试剂：N,O一双三甲基硅基三氟乙酰胺-三甲基氯硅烷，体积比为99:1。6仪器设备6.1气相色谱质谱仪。6.2旋转蒸发仪。6.3氮吹仪。6.4冷冻离心机。6.5振荡器。6.6涡旋混合器。6.7分析天平：感量0.0001g，0.001g。6.8鸡心瓶：50mL。6.9离心管：50mL。6.10超纯水器。7测定步骤7.1试样提取称取搅碎的鸡肉糜5g(精确到0.001g)置于50mL聚丙烯离心管中，加入l0mL乙腈，均质lmin，振荡30min。在4℃条件下以6000r/min离心10min，倾出上清液，沉淀物用10mL乙腈再提取1次。合并上清液，加入5mL异丙醇，于旋转蒸发仪上50℃水浴蒸至近干，用5mL乙腈溶解。7.2试样净化用15mL乙腈活化碱性氧化铝层析柱后加入7.1项下样品液，待其自然流干后用10mL乙腈洗脱，收集洗脱液。7.3衍生化用氮气吹干7.2项下的洗脱液，加入100µL甲苯溶解残渣，再加入100µL衍生剂，密封后于80℃衍生60min。冷却后加800µL甲苯，混匀，上机分析。同时分别取5.3项下标准工作液系列各1ml用氮气吹干，加入甲苯和衍生剂各100µL，按试样同法操作。7.4气相条件色谱柱：DB-5MS柱，柱长30m，内径0.25mm，膜厚0.25μm或性能相当的色谱柱。进样口温度：220℃。升温程序：起始柱温100℃(保持1min)，以30℃/min的速率升至200℃，再以5℃/min的速率升至205℃(保持1min)，然后以25℃/min的速率升至280℃(保持3min)。载气：氦气纯度99.999％。流量：0.8mL／min。进样方式：不分流进样。进样体积：1.0μL。7.5质谱条件2 DB34/T1369—2011样品离子源：EI源。传输线温度：280℃。四极杆温度:170℃。离子源温度:230℃。选择离子收集模式，收集212，214，248和263m/z的4个碎片离子。8定性定量方法定性方法：样品待测物质与标准品衍生物保留时间的相对标准偏差不大于0.5％。特征离子基峰丰度与标准品相差不大于20％。定量方法：以212，214，248和263峰面积之和进行校正定量。9结果计算和表述A×Cs×V1×V3×1000X=................................(1)As×M×V2×1000式中：X——组织中氯羟吡啶的残留量（μg/kg）；A——样品溶液中氯羟吡啶的峰面积；As——标准工作液中氯羟吡啶的峰面积；Cs——标准工作液中氯羟吡啶的浓度(ng/mL)；V1——溶解残留物的乙腈体积(mL)；V2——过碱性氧化铝层析柱乙腈溶液体积(mL)；V3——溶解残留物的甲苯体积(mL)；M——组织样品质量(g)。测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留3位有效数字。10检测方法灵敏度、准确度、精密度10.1灵敏度本方法在鸡肉组织中的检出限为0.5μg/kg。10.2准确度本方法在添加浓度为1.0μg/kg时，回收率为70％～120％。10.3精密度本方法的批内变异系数CV≤15％，批间变异系数CV≤20％。3 DB34/T1369—2011AA附录A（资料性附录）氯羟吡啶标准品衍生物的选择性离子质谱图图A.1氯羟吡啶的气相质谱监测的离子图_________________________________4'