GB5009.205-2013食品安全国家标准食品中二噁英及其类似物毒性当量的测定.pdf 55页

'中华人民共和国国家标准GB5009.205—2013食品安全国家标准食品中二噁英及其类似物毒性当量的测定2013-11-29发布2014-06-01实施 GB5009.205—2013前言本标准代替GB/T5009.205—2007《食品中二噁英及其类似物毒性当量的测定》。本标准与GB/T5009.205—2007相比，主要变化如下：——增加了加速溶剂萃取（ASE）方法；——增加了WHO于2005年修订后的多氯代二苯并二噁英及呋喃和二噁英样多氯联苯毒性当量因子。I GB5009.205—2013食品安全国家标准食品中二噁英及其类似物毒性当量的测定1范围本标准规定了食品中17种2,3,7,8-取代的多氯代二苯并二噁英（PCDDs）、多氯代二苯并呋喃（PCDFs）和12种二噁英样多氯联苯（DL-PCBs）含量及二噁英毒性当量（TEQ）的测定方法。本标准适用于附录A的表A.1中规定的食品中17种2,3,7,8-取代多氯代二苯并二噁英及多氯代二苯并呋喃（PCDD/Fs）和12种DL-PCBs含量及其TEQ的测定。2原理应用高分辨气相色谱－高分辨质谱联用技术，在质谱分辨率大于10000的条件下，通过精确质量测量监测目标化合物的两个离子，获得目标化合物的特异性响应。以目标化合物的同位素标记化合物为定量内标，采用稳定性同位素稀释法准确测定食品中2,3,7,8位氯取代的PCDD/Fs和DL-PCBs的含量；并以各目标化合物的毒性当量因子(TEF)与所测得的含量相乘后累加，得到样品中二噁英及其类似物的毒性当量（TEQ）。3试剂和材料3.1有机溶剂注：以下有机溶剂均为农残级，浓缩10000倍后不得检出二噁英及其类似物。3.1.1丙酮（C3H6O）。3.1.2正己烷（C6H14）。3.1.3甲苯（C7H8）。3.1.4环己烷（C6H12）。3.1.5二氯甲烷（CH2Cl2）。3.1.6乙醚（C4H10O）。3.1.7甲醇（CH3OH）。3.1.8正壬烷（C9H20）。3.1.9异辛烷（C8H18）。3.1.10乙酸乙酯（CH3COOCH2CH3）。3.1.11乙醇（CH3CH2OH）。3.2标准溶液3.2.1PCDD/Fs标准溶液注：本标准推荐使用EPA1613-1997规定的标准溶液，各实验室可根据具体情况选用相当的标准品。如果需要制备储备溶液，应该在通风橱中进行，并且戴上防毒面罩。1 GB5009.205—20133.2.1.1校正和时间窗口确定的标准溶液（CS3WT溶液）：用壬烷配制，为含有天然和同位素标记PCDD/Fs（定量内标、净化标准和回收率内标）的溶液，用于方法的校正和确证，并可以用于DB5MS毛细管柱(或等效柱)时间窗口确定和2,3,7,8-TCDD分离度的检查（见附录B的表B.1）。373.2.1.2净化标准溶液：用壬烷配制的Cl4-2,3,7,8-TCDD溶液（浓度为40μg/L±2μg/L）。133.2.1.3同位素标记定量内标的储备溶液：用壬烷配制的C12-PCDD/Fs溶液（见附录B的表B.2）。13133.2.1.4回收率内标标准溶液：用壬烷配制的C12-1,2,3,4-TCDD和C12-1,2,3,7,8,9-HxCDD溶液（见附录B的表B.3）。3.2.1.5精密度和回收率检查标准溶液（PAR）：用壬烷配制的含天然PCDD/Fs溶液（见附录B的表B.4），用于方法建立时的初始精密度和回收率试验（IPR）及过程精密度和回收率试验（OPR）。3.2.1.6保留时间窗口确定的标准溶液(TDTFWD)：用于确定规定毛细管柱中四氯至八氯取代化合物出峰顺序，同时用于检查在规定的色谱柱中2,3,7,8-TCDD和2,3,7,8-TCDF的分离度（见附录B的表B.6）。3.2.1.7校正标准溶液：为含有天然和同位素标记的PCDD/Fs系列校正溶液（见附录B的表B.7），其中CSL为浓度更低的天然PCDD/Fs校正溶液，用于质谱系统校正。测定校正标准溶液，可以获得天然与标记PCDD/Fs的相对响应因子（RRF）。此外，CS3用于已建立RRF的日常校正和校正曲线校验(VER)；CS1用于检查HRGC-HRMS必须具备的灵敏度。由于食品要求的灵敏度更低，可以使用CSL进行灵敏度检查。3.2.2DL-PCBs标准溶液注：本标准推荐使用EPA1668A规定的标准溶液，各实验室可根据具体情况选用相当的标准品。如果需要制备储备溶液，应该在通风橱中进行，并且戴上防毒面罩。3.2.2.1时间窗口确定和定量内标标准溶液：用壬烷配制的含同位素标记DL-PCBs的溶液（见附录B的表B.8）。13133.2.2.2同位素标记的净化内标标准溶液：用壬烷配制含C12-2,4,4"-TrPCB、C12-2,3,3",5,5"-PePCB和13C12-2,2",3,3",5,5",6-HPCB溶液（见附录B的表B.9）。133.2.2.3同位素标记的回收率内标标准溶液：用壬烷配制含C12-2,2",5,5"-TePCB、131313C12-2,2",4",5,5"-PePCB、C12-2,2",3",4,4",5"-HxPCB和C12-2,2",3,3",4,4",5,5"-OctaPCB溶液（见附录B的表B.10）。3.2.2.4精密度和回收率检查标准溶液(PAR)：用壬烷配制的含天然DL-PCBs溶液（见附录B的表B.11），用于方法建立时的初始精密度和回收率试验（IPR）及过程精密度和回收率试验（OPR）。3.2.2.5校正标准溶液：为含有天然（目标化合物）和同位素标记（定量内标、净化标准和回收率内标）的DL-PCBs系列校正溶液（见附录B的表B.12）。其中CS3用于已建立RRF的日常校正和校正曲线校验(VER)，CS1用于检查HRGC-HRMS必须具备的灵敏度。3.2.2.6高灵敏度检查的标准溶液：为天然DL-PCBs的溶液（浓度0.2μg/L，见附录B的表B.13）。3.2.2.7校正检查的标准溶液：浓度相当于CS3，不含同位素标记，仅为天然DL-PCBs的溶液（50μg/L，见附录B的表B.14）。3.3样品净化用吸附剂注：样品净化用吸附剂应在制备后尽快使用，如果经过一段较长时间的保存，应检验其活性。在装有氧化铝和硅胶等容器上应标识其制备日期或开封日期。如果标识不可辨认，应废弃吸附剂，重新制备。由于存在PCBs污染问题，有时适合于PCDD/Fs测定的试剂不一定适合DL-PCBs的测定，应该经过检查证实没有干扰后使用。3.3.1氧化铝注：如果内标化合物的回收率能达到要求，则可在酸性氧化铝或碱性氧化铝中选择一种用于样品提取液净化。但所有样品，包括初始精确度和回收率检查试验，均应使用同样类型的氧化铝。3.3.1.1酸性氧化铝：在130°C下至少加热活化12h。2 GB5009.205—20133.3.1.2碱性氧化铝：在600°C下至少加热活化24h。加热温度不能超过700℃，否则其吸附能力降低。活化后保存在130℃的密闭烧瓶中。应在烘烤后五天内使用。3.3.2硅胶3.3.2.1规格：75μm~250μm或相当等级的硅胶。3.3.2.2活性硅胶：使用前，取硅胶分别用甲醇、二氯甲烷清洗，在180℃下至少烘烤1h或150℃下至少烘烤4h（最多6h）。在干燥器中冷却，保存在带螺帽密封的玻璃瓶中。3.3.2.3酸化硅胶（44%，质量分数）：称取56g活性硅胶置于250mL具塞磨口旋转烧瓶中，在玻璃棒搅拌下加入44g硫酸，将烧瓶用旋转蒸发器旋转1h～2h，使之混和均匀无结块，置干燥器内，可保存3周。3.3.2.4碱化硅胶（33%，质量分数）：称取100g活性硅胶置于250mL具塞磨口旋转烧瓶中，在玻璃棒搅拌下逐滴加入49gNaOH溶液（1mol/L），将烧瓶用旋转蒸发器中旋转1h～2h，使之混和均匀无结块。将碱化硅胶置干燥器内保存。3.3.2.5硝酸银硅胶：称取10g硝酸银置于100mL烧杯中，加水40mL溶解。将该溶液转移至250mL旋转烧瓶中，慢慢加入90g活性硅胶，在旋转蒸发器中旋转1h～2h，使之干燥并混和均匀。取出后，在干燥器中冷却，置于褐色玻璃瓶内保存。3.3.3弗罗里土3.3.3.1规格：150μm~250μm。使用前，称取500g，装入索氏提取器中，用适量正己烷:二氯甲烷（1:1，体积比）提取24h。3.3.3.2含水1%（质量分数）的弗罗里土：称取弗罗里土99.0g，加水1.0mL，搅拌均匀，用带聚氟乙烯螺帽的玻璃瓶封装。3.3.4混合活性炭称取9.0gCarbopakC（推荐使用Supelco1-0258，或其他相当的类型）和41.0gCelite545（推荐使用Supelco2-0199，或其他相当的类型），充分混和，含活性炭为18%（质量分数)。在130℃中至少活化6h，在干燥器中保存。3.4其他材料3.4.1无水硫酸钠（Na2SO4）：优级纯。3.4.2硫酸（H2SO4）：优级纯。3.4.3氢氧化钠（NaOH）：优级纯。3.4.4硝酸银（AgNO3）：优级纯。3.4.5草酸纳（Na2C2O4）：优级纯。3.4.6玻璃棉：使用前以二氯甲烷及正己烷回流48h，用氮气吹干后，置于棕色瓶内备用。3.4.7凝胶色谱填料：Bio-BeadsS-X3，38μm~75μm。3.4.8硅藻土（选用）：加速溶剂萃取用。3.5参考基质玉米油或其他植物油。基质中未检出PCDD/Fs和DL-PCBs为最理想的情况。由于环境中PCBs的广泛存在，植物油中可能存在背景水平的PCBs，作为基质时要求其背景水平不得超过附录C表C.1中的检测限的值。4仪器和设备4.1高分辨气相色谱-高分辨质谱仪(HRGC-HRMS)。3 GB5009.205—20134.2气相色谱柱，不同的目标物应选用不同的气相色谱柱：a)用于PCDD/Fs检测：DB-5ms（5%二苯基-95%二甲基聚硅氧烷）柱，60m×0.25mm×0.25μm或等效色谱柱；RTX-2330（90%双氰丙基-10%苯基氰丙基聚硅氧烷）,60m×0.25mm×0.1μm或等效色谱柱；b)用于DL-PCBs检测：DB-5ms柱，60m×0.25mm×0.25μm或等效色谱柱。4.3组织匀浆器。4.4绞肉机。4.5冻干机。4.6旋转蒸发器。4.7氮气浓缩器。4.8超声波清洗器。4.9振荡器。4.10索氏提取器。4.11天平：感量为0.1mg。4.12恒温干燥箱：用于烘烤和贮存吸附剂，能够在105℃~250℃范围内保持恒温（±5℃）。4.13玻璃层析柱：带聚四氟乙烯柱塞，150mm×8mm，300mm×15mm。4.14全自动样品净化系统（选用）：配备酸碱复合硅胶柱、氧化铝和活性炭净化柱。4.15凝胶色谱系统（GPC）（选用，手动或自动系统）：玻璃柱（内径15mm～20mm），内装50gS-X3凝胶。4.16高效液相色谱仪（HPLC）（选用）：包括泵、自动进样器、六通转换阀、检测器和馏分收集器，配备Hypercarb（100mm×4.6mm，5μm）或相当色谱柱。4.17加速溶剂萃取仪（选用）。5试样制备与净化5.1样品采集与保存5.1.1现场采集的样品用避光材料如铝箔、棕色玻璃瓶等包装，置冷冻箱中运输到实验室，–10℃以下低温保存。5.1.2液体或固体样品，如鱼、肉、蛋、奶等经过匀浆使其匀质化后可使用冷冻干燥或无水硫酸钠干燥，混匀。油脂类样品可直接用正己烷溶解后进行净化分离。5.2试样制备5.2.1溶剂和提取液的旋转蒸发浓缩5.2.1.1连接旋转蒸发器，将水浴锅预热至45℃。在试验开始前，预先将100mL正己烷:二氯甲烷（1:1，体积比）作为提取溶剂浓缩，以清洗整个旋转蒸发仪系统。如有必要，对经浓缩后的溶剂以及收集瓶中的溶剂进行检验，以便对污染状况进行检查。在两个浓缩样品之间，分三次用2mL～3mL溶剂洗涤旋转蒸发仪接口，用烧杯收集废液。5.2.1.2将装有样品提取液的茄形瓶连接到旋转蒸发器上，缓慢抽真空。5.2.1.3将茄形瓶降至水浴锅中，调节转速和水浴的温度（或真空度），使浓缩在15min～20min内完成。在正确的浓缩速度下，流入废液收集瓶中的溶剂流量应保持稳定，溶剂不能有爆沸或可见的沸腾现象发生。注：如果浓缩过快，可能会使样品损失。5.2.1.4当茄形瓶中溶剂约为2mL时，将茄形瓶从水浴锅中移开，停止旋转。缓慢并小心地向旋转蒸发仪中放气，确保打开阀门时不要太快，以免样品冲出茄形瓶。用2mL溶剂洗涤接口，用烧杯收集废液。5.2.2索氏提取4 GB5009.205—20135.2.2.1提取前，在索氏提取器中装入一支空的纤维素或玻璃纤维提取套筒，以正己烷:二氯甲烷（1:1，体积比）为提取溶剂，预提取8h后取出晾干。5.2.2.2将下列处理好的样品装入提取套筒中（附录D图D.1），高度以不超过溢流管为限。在提取13套筒中加入适量C12标记的定量内标的储备溶液（3.2.1.3），用玻璃棉盖住样品，平衡30min后装入索氏提取器，以适量正己烷:二氯甲烷（1:1，体积比）为溶剂提取18h～24h，回流速度控制在3次/h～4次/h。鱼、肉、蛋、奶等样品：称取50g～200g样品（精确到0.001g），经过冷冻干燥后，准确称重，计算含水量。根据估计的污染水平，称取适量试样（精确到0.001g），加无水硫酸钠研磨，制成能自由流动的粉末。将粉末全部转移至处理好的提取套筒，置于索氏抽提器中进行提取。奶酪等固体乳制品样品：将奶酪直接研成细末后称量，其他固体乳制品直接称量。称取适量试样（通常为10g，精确到0.001g），置研钵中，加无水硫酸钠，研磨成干燥的、可以自由流动的粉末。无水硫酸钠与海砂混合物使用量取决于试样的取样量及含水量。将粉末全部移至处理好的提取套筒。用沾有正己烷的棉签将研钵、表面皿和研磨棒擦净。该棉签一同放入套筒中进行提取。注：当已知样品含量或估计其含量较高时，应适当减少用于分析的试样量。所有试样、空白试验、初始精密度及回收率试验（IPR）、过程精密度及回收率试验（OPR）应具有相同的分析过程，以便检查污染来源及损失情况。5.2.2.3提取后，将提取液转移到茄形瓶中，旋转蒸发浓缩至近干。5.2.2.4茄形瓶中的残留物用少量正已烷溶解以进行下面的净化。如需要考察净化过程的回收率则加入净化标准溶液（3.2.1.2），但日常的分析中该步骤可省略。5.2.2.5若结果报告需报告脂肪含量，则需要测定样品的脂肪含量。测定脂肪含量后，可以加少量正己烷溶解，以备进行净化处理。5.2.2.6脂肪含量的测定：浓缩前准确称重茄形瓶，将溶剂浓缩至干后准确称重茄形瓶，两次称重结果的差值为试样的脂肪量。按式（1）计算脂肪含量：m1X100%…………………………………………（1）1m2式中：X1——脂肪含量，%；m1——试样的脂肪量，单位为克（g）；m2——试样的质量，单位为克（g）。5.2.3液液萃取5.2.3.1依情况准确量取液体奶样样品200mL～300mL，转移至大小合适的分液漏斗中，加入适量13C12标记的定量内标的储备溶液（3.2.1.3）。5.2.3.2按20mg/g样品的比例称取草酸钠，加少量水溶解后，将该溶液加入样品，充分振摇。5.2.3.3加入与样品等体积的乙醇，再进行振摇。5.2.3.4在样品-乙醇溶液中加入与5.2.3.3等体积的乙醚:正己烷（2:3，体积比），振摇1min。静置分层后，转移出有机相。然后在水相中加入与样品原始体积相同的正己烷，振摇1min。静置分层后，转移出有机相。合并有机相，浓缩至小于75mL。5.2.3.5转移提取液至250mL分液漏斗中，加入30mL蒸馏水振摇，弃去水相。5.2.3.6转移上层有机相至250mL烧瓶中，加入适量无水硫酸钠，振摇。静置30min后，用一张经过甲苯淋洗过的滤纸过滤，滤液置于茄形瓶中。5.2.3.7将提取液转移到茄形瓶中，旋转蒸发浓缩至近干。如需测定脂肪含量，则按5.2.2.6步骤进行脂肪含量的测定。5 GB5009.205—20135.2.3.8茄形瓶中的残留物用少量正已烷溶解以进行下面的净化。如需要考察净化过程的回收率则加入净化标准溶液（3.2.1.2），但日常的分析中该步骤可省略。5.2.4加速溶剂萃取5.2.4.1提取前应将所用萃取池以正己烷:二氯甲烷（1:1，体积比）进行清洗。5.2.4.2将下列处理好的样品装入萃取池中。萃取池中应预先放入醋酸纤维素过滤膜。在萃取池中加13入适量C12标记的定量内标的储备溶液（3.2.1.3），密闭后，放于萃取仪上，以正己烷:二氯甲烷（1:1，体积比）为溶剂提取。参考条件为：温度，150℃；压力，10.3MPa（1500psi）；循环，1次；静态时间，10min。鱼、肉、蛋等含水量较高样品：称取50g～200g样品（精确到0.001g），经过冷冻干燥后，准确称重，计算含水量。根据估计的污染水平，称取适量试样（精确到0.001g），置研钵中，研磨成粉状，加入硅藻土，混匀后，全部转移至处理好的萃取池。液体乳样品：准确称取80g～100g样品（精确到0.001g），经过冷冻干燥后，置研钵中，研磨成粉状，加入硅藻土，混匀后，全部转移至处理好的萃取池。干燥样品：研磨成粉后，根据估计的污染水平，称取适量试样（精确到0.001g），置研钵中，加入硅藻土，混匀后，全部转移至处理好的萃取池。每个样品所对应硅藻土用量取决于所应用的萃取池的体积和所称取的该样品研磨后的体积。5.2.4.3提取后，进一步处理按5.2.2.3～5.2.2.6步骤进行。5.2.5其他取适量黄油等油脂试样置烧杯中，加热至50℃~60℃，使油脂明显地分离出来。融化的油脂经干燥的滤纸或者一小段玻璃棉过滤到另一容器中，从中准确称取油脂样品适量（精确到0.001g），用正13己烷溶解后，加入适量C12标记的定量内标。5.3试样净化5.3.1酸化硅胶净化5.3.1.1在浓缩的样品提取液中加入100mL正己烷，并加入50g酸化硅胶，用旋转蒸发仪在70℃条件下旋转加热20min。5.3.1.2静置8min～10min后，将正己烷倒入茄形瓶中。5.3.1.3用50mL正己烷洗瓶中硅胶，收集正己烷于5.3.1.2的茄形瓶中，重复3次。用旋转蒸发仪浓缩至2mL～5mL。如果酸化硅胶的颜色较深，则应重复上述过程，直至酸化硅胶为浅黄色。5.3.2混合硅胶柱净化5.3.2.1层析柱的填充：取内径为15mm的玻璃柱，底部填以玻璃棉后，依次装入2g活性硅胶、5g碱性硅胶、2g活性硅胶、10g酸化硅胶、2g活性硅胶、5g硝酸银硅胶、2g活性硅胶和2g无水硫酸钠。干法装柱，轻敲层析柱，使其分布均匀（见附录D图D.3）。5.3.2.2用150mL正已烷预淋洗层析柱。当液面降至无水硫酸钠层上方约2mm时，关闭柱阀，弃去淋洗液，柱下放一茄形瓶。检查层析柱，如果出现沟流现象应重新装柱。5.3.2.3将已浓缩的提取液加入柱中，打开柱阀使液面下降，当液面降至无水硫酸钠层时，关闭柱阀。5.3.2.4用5mL的正己烷洗涤原茄形瓶（5.3.1.3）2次，将洗涤液一并加入柱中，打开柱阀，使液面降至无水硫酸钠层。5.3.2.5如果仅测定PCDD/Fs，则用350mL正己烷洗脱；如果同时测定PCDD/Fs和DL-PCBs，则用400mL正己烷洗脱，收集洗脱液。6 GB5009.205—20135.3.2.6将收集在茄形瓶中的洗脱液用旋转蒸发仪浓缩至3mL～5mL，供下一步净化用。5.3.3氧化铝柱净化注：本标准中使用的两种氧化铝柱仅是吸附剂用量不同。氧化铝柱1为25g碱性氧化铝，氧化铝柱2为2.5g碱性氧化铝（见附录D图D.4）。5.3.3.1氧化铝柱15.3.3.1.1层析柱填充：取内径为15mm的玻璃柱，底部填以玻璃棉后，依次装入25g氧化铝、10g无水硫酸钠。干法装柱，轻敲层析柱，使吸附剂分布均匀。5.3.3.1.2用150mL正已烷预淋洗层析柱，当液面流至氧化铝上方约2mm时，关闭柱阀。弃去淋洗液，检查层析柱，如果出现沟流现象应重新填柱。5.3.3.1.3加入经过混合硅胶柱净化的提取液，并用5mL正己烷分两次洗涤原茄形瓶（5.3.2.6），将洗涤液合并后上柱，重复洗涤一次。5.3.3.1.4用60mL正己烷清洗烧瓶后淋洗氧化铝柱，弃去淋洗液。5.3.3.1.5仅测定PCDD/Fs时：用200mL正已烷:二氯甲烷（98:2，体积比）淋洗干扰组分，弃去淋洗液。柱下放一茄形瓶，用200mL正已烷:二氯甲烷（1:1，体积比）洗脱，收集洗脱液，加入3mL的辛烷或壬烷，供PCDD/Fs分析用。5.3.3.1.6同时测定PCDD/Fs和DL-PCBs时：柱下放一茄形瓶，用90mL甲苯洗脱,收集洗脱液，加入3mL的辛烷或壬烷，供DL-PCBs分析用。柱下放置另一茄形瓶，再用200mL正已烷:二氯甲烷（1:1，体积比）洗脱，收集洗脱液，加入3mL的辛烷或壬烷，供PCDD/Fs分析用。5.3.3.1.7将收集在茄形瓶中的各洗脱液分别用旋转蒸发仪浓缩至3mL～5mL，供下一步净化用。5.3.3.2氧化铝柱2层析柱填充：a）取内径为6mm～7mm的玻璃柱，底部填以玻璃棉后，依次装入2.5g氧化铝和2g无水硫酸钠。干法装柱，轻敲层析柱，使吸附剂分布均匀；b）用20mL正已烷预淋洗层析柱，弃去淋洗液。检查层析柱是否有沟流，如果出现沟流应重新填柱；c）加入经氧化铝柱1净化的提取液（PCDD/Fs部分），使其完全渗入柱内；d）用4mL正己烷:二氯甲烷（98:2，体积比）冲洗原茄形瓶（5.3.3.1），将冲洗下来的溶液，倒入柱内，让其完全渗入柱内；重复一次；e）用40mL的正己烷:二氯甲烷（98:2，体积比）（包括烧瓶清洗）淋洗，弃去淋洗液，柱下放一茄形瓶；f）用30mL正已烷:二氯甲烷（1:1，体积比）淋洗液洗脱PCDD/Fs，收集洗脱液，加入3mL的辛烷或壬烷；g）用30mL正已烷:二氯甲烷（99:1，体积比）预淋洗层析柱，弃去淋洗液，柱下放一茄形瓶。检查层析柱是否有沟流现象，如果出现沟流应重新装柱；k）加入浓缩后的经氧化铝柱1净化的提取液（DL-PCBs部分），让其完全渗入柱内；l）用5mL正己烷:二氯甲烷（1:1，体积比）洗涤原茄形瓶（5.3.3.1）两次。当样品已完全渗入柱内，将冲洗下来的溶液，倒入柱内，使其完全渗入柱内；m）用15mL正已烷:二氯甲烷（1:1，体积比）洗脱，收集洗脱液，加入3mL的辛烷或壬烷；n）将收集在茄形瓶中的各洗脱液分别用旋转蒸发仪浓缩至3mL～5mL左右，供进一步测定或净化用。5.3.4凝胶渗透柱净化7 GB5009.205—2013注：用于去除样品提取液中类脂的备选净化方法，必要时选择。5.3.4.1在层析柱底部填上玻璃棉，装入50gBio-BeadsS-X3凝胶，用甲苯冲洗后，保存在环己烷:乙酸乙酯（1:1，体积比）中。注：凝胶柱放置时，溶剂不得流空。5.3.4.2在样品提取液（通常浓缩至3mL～5mL）中加少量正己烷，注入层析柱，使样品提取液完全渗入柱内。5.3.4.3用10mL环己烷:乙酸乙酯（1:1，体积比）分两次洗涤原茄形瓶，转入柱内。5.3.4.4用100mL环己烷:乙酸乙酯（1:1，体积比）淋洗，弃去淋洗液，柱下放一茄形瓶。5.3.4.5用90mL环己烷:乙酸乙酯（1:1，体积比）洗脱，得到的洗脱液中含PCDD/Fs和DL-PCBs。5.3.5活性炭柱净化注：PCDD/Fs和非邻位氯取代的DL-PCBs备选的净化方法，必要时选择。5.3.5.1活性炭柱制备：取5mL一次性玻璃移液管，切除上端约3.8cm处并挫磨锐缘处，取适量玻璃棉置入并以两只1mL玻璃移液管于刻度“0”处塞紧，依次填入0.5mL活性硅胶、0.7mLCarbon/Celite545、0.5mL活性硅胶，取适量玻璃棉置入并塞紧。使用前用下列溶剂依次淋洗：4mL甲苯、2mL二氯甲烷:甲醇:甲苯（75:20:5，体积比）和4mL环己烷:二氯甲烷（1:1，体积比）。5.3.5.2净化：先以2.5mL甲醇及2.5mL二氯甲烷：正己烷（1:1，体积比）溶液依次将活性炭柱（切口端向上）淋洗两次，弃去淋洗液，倒置柱管（切口端向下），将浓缩到约1mL的提取液（已进行除脂处理）小心移入活性炭柱，然后用1mL二氯甲烷：正己烷（1:1，体积比）溶液洗涤原瓶两次，并移入活性炭柱内，待液面流至玻璃棉时，用吸球吹出柱内溶剂。再次倒置管柱（切口端向上），用25mL甲苯洗脱柱子，用50mL茄形瓶收集洗脱液。5.3.5.3收集的洗脱液加入3mL的辛烷或壬烷。将收集的洗脱液分别用旋转蒸发仪浓缩至3mL～5mL。5.3.6弗罗里土柱净化注：PCDD/Fs备选的净化方法，必要时选择。5.3.6.1层析柱填充：取直径为15mm的玻璃柱，底部填上玻璃棉后，依次装入2g无水硫酸钠、15g弗罗里土、2g无水硫酸钠。以正己烷湿法装柱，轻敲层析柱，使吸附剂分布均匀。5.3.6.2用200mL正己烷淋洗已被活化的弗罗里土柱，当液面至距无水硫酸钠层约2mm时，关闭柱阀，弃去淋洗液。5.3.6.3加入浓缩后的提取液（已进行除脂处理），打开柱阀。5.3.6.4用正已烷洗涤原茄形瓶2次，合并至弗罗里土柱中。5.3.6.5用200mL正已烷淋洗干扰组分，弃去淋洗液，柱下放一茄形瓶。5.3.6.6用300mL二氯甲烷洗脱，收集洗脱液。5.3.6.7将3mL辛烷或壬烷加入收集的洗脱液中，将收集的洗脱液用旋转蒸发仪浓缩至3mL～5mL。5.3.7全自动样品净化系统自动净化分离注：全自动样品净化系统的自动净化分离原理与传统的柱色谱方法相同，该系统使用三根一次性商业化净化柱，依次为多层硅胶柱、碱性氧化铝柱和活性炭柱。整个净化过程通过计算机按设定程序控制往复泵和阀门进行。5.3.7.1由于全自动样品净化系统提供的净化柱存在容量问题，在处理高脂肪含量时需要预先使用酸化硅胶去除样品中的大部分脂肪。这可以通过在全自动样品净化系统中增加一个大容量酸化硅胶柱解决；也可以合并采用任选步骤5.3.1、5.3.2或5.3.4或组合方法手动去除样品中的大部分脂肪，予以解决。注：当样品回收率出现异常时，应对全自动样品净化系统流速进行校正。5.3.7.2按仪器使用说明要求，连接净化层析柱。5.3.7.3将各净化柱按顺序连接在全自动样品净化系统上，按程序配好各洗脱溶液并连接好管路，设定计算机洗脱程序（参见附录D图D.5）。8 GB5009.205—20135.3.7.4将经酸化硅胶或者凝胶渗透色谱处理的浓缩提取液转移到全自动样品净化系统的进样管。5.3.7.5按照洗脱流程图顺序洗脱（参见附录D图D.5），对样品进行净化、分离，分别收集PCDDs/Fs和DL-PCBs组分。5.3.7.6将收集的各洗脱液分别用旋转蒸发仪浓缩至3mL～5mL。5.3.8其他为了将PCDD/Fs和DL-PCBs从基质材料中充分地分离出来，可根据基质材料或干扰组分的具体情况选用不同的吸附剂进行净化。制备酸化硅胶以除去组织样品中的脂肪。凝胶渗透色谱可用来除去那些能导致气相色谱柱柱效降低的大分子干扰物（如蜂蜡等酸碱不能破坏的大分子），必要时可用手动层析柱对提取液进行初步净化。酸性、中性和碱性硅胶、氧化铝和弗罗里土可用于消除非极性和极性的干扰物质。活性炭柱能将PCDD/Fs以及非邻位氯取代的PCB77、PCB126和PCB169与其他同类物质和干扰物质分离，可在必要时使用。除了非邻位氯取代的PCB77、PCB126和PCB169外，其他DL-PCBs一般不需要活性炭柱净化。HPLC可以特异性地分离某些类似物和同系物。通常在用酸化硅胶或凝胶渗透色谱除去组织样品中的类脂后，使用3根层析柱净化，即一根混合型硅胶柱和两根不同的氧化铝柱，PCDD/Fs和DL-PCBs净化流程图见附录D图D.2。也可以采取其他备选净化方法，组合使用。无论采用何种组合，在进行净化前，实验室应证实其选择的净化过程能满足方法的要求。5.4微量浓缩与溶剂交换5.4.1提取物的溶剂交换5.4.1.1将浓缩的提取液转移到带聚四氟乙烯硅胶垫的棕色螺口瓶中，置于氮气浓缩器下吹氮浓缩（可在45℃的控温条件下进行）。注：气流过大会引起样品损失，氮气流速调节到能够使溶剂表面轻微振动。5.4.1.2如果需要称重，有必要将提取物用氮气吹至恒重。5.4.1.3如果属于提取液净化溶剂更换，按以下步骤操作：a)如果采用凝胶色谱系统(GPC)净化，需在凝胶色谱系统(GPC)进样前用二氯甲烷将提取液体积调至5.0mL。如果用HPLC净化，则需在HPLC进样前将提取液浓缩至1.0mL。b)如果用层析柱（硅胶、活性炭或弗罗里土）进行净化，则需将提取物溶剂转换成正已烷，并定容至1.0mL。5.4.2净化后的微量浓缩与溶剂交换如果提取液浓缩后用于HRGC/HRMS分析，则将净化分离后得到的各流分分别用旋转蒸发仪浓缩至3mL～5mL，再在氮气下浓缩至1mL～2mL，然后在氮气流下定量转移至装有0.2mL的锥形衬管的进样瓶中，并用正已烷洗涤浓缩蒸馏瓶，一并转入锥形衬管中。待浓缩至约100μL，分别加入适量PCDDs/Fs和DL-PCBs回收率内标溶液，壬烷（可用辛烷代替）定容。继续在细小的氮气流下浓缩至溶剂只含壬烷或辛烷。样品溶液的最终体积可根据情况调整，大约为20μL。将进样瓶密封，并标记样品编号。室温下暗处保存，供HRGC/HRMS分析用。如果样品当日不进行HRGC/HRMS分析，则于＜-10℃下保存。PCDD/Fs和DL-PCBs的分析流程图可参见附录D的图D.2。6PCDD/Fs色质分析6.1HRGC/HRMS条件6.1.1GC的色谱条件推荐筛选色谱柱为DB-5ms柱或等效柱，柱长60m、内径0.25mm、液膜厚度0.25μm；对于9 GB5009.205—20132,3,7,8-TCDF的确证推荐使用DB-235ms柱或等效柱，柱长30m、内径0.25mm、液膜厚度0.25μm；也可以使用RTX-2330或等效柱，柱长50m～60m、内径0.25mm、液膜厚度0.20μm。注：为了得到最佳的分离度和灵敏度，需要优化GC色谱条件，且优化后，标准溶液、空白、IPR及OPR检查和样品检测都应采用相同的GC条件。采用DB-5ms色谱柱或等效柱的推荐条件：a）进样口温度：280℃；b）传输线温度：310℃；c）柱温：120℃（保持1min）；以43℃/min升温速率升至220℃（保持15min）；以2.3℃/min升温速率升至250℃，以0.9℃/min升温速率升至260℃,以20℃/min升温速率升至310℃（保持9min）；d）载气：恒流，0.8mL/min。采用RTX-2330色谱柱或等效柱的推荐条件（供选择使用）：a）进样口温度：280℃；b）传输线温度：260℃；c）柱温：90℃（保持1.5min）；以25℃/min升温速率升至180℃；再以2℃/min升温速率升至260℃（保持30min）；d）载气：恒流，1mL/min。6.1.2质谱参数6.1.2.1分辨率：在分辨率≥10000的条件下，进样PCDD/Fs单标或目标化合物与相邻组分没有干扰的混标溶液，监测附录C的表C.3规定的各化合物两个精确质量数的离子，得到其选择离子流图。6.1.2.2质量校正：PCDD/Fs分析的运行时间可能超过质谱仪的质量稳定期。这是由于质谱仪在高分辨模式下运行时，百万分之几的质量数偏移（如百万分之五质量数）可能对仪器的性能产生严重影响，为此，需要对偏移的质量进行校正。可以采用参考气（全氟煤油，PFK；或全氟三丁胺，FC43）的质量数锁定进行质量偏移校正。锁定的质量数取决于附录C的表C.3各窗口中监测的精确质量数。分析过程中调节进入HRMS中参考气的量，要求监测的锁定质量数信号强度不得超过检测器满量程的10%。注：过量的参考气可能引起噪声且增加对离子源的污染，导致清洗离子源的频率增加。6.1.2.3选择一个参考气离子碎片，如接近m/z304（TCDF）的m/z304.9824（PFK）信号，调整质谱以满足最小所需的10000分辨率（10%峰谷分离）。分辨率应大于或等于10000，精确的m/z与附录C的表C.3中的理论m/z之间的偏差应小于百万分之五。6.1.2.4在给定的GC条件下，进样1μL或2μLCS1校正溶液（附录B的表B.7），考察离子丰度比、最小水平、信噪比及绝对保留时间：a）测定各目标化合物峰面积，计算附录C的表C.3中规定的精确质量数离子的丰度比，并与附录C的表C.4中理论值比较，并符合质量控制的要求；否则需要调谐质谱仪，重新测定，使其符合规定，并对质谱仪的分辨率进行确认；b）各窗口有必要进行连续监测，确保在GC运行中能够监测全部PCDD/Fs。各窗口中监测的精确质量数离子参见附录C的表C.3。如果仅测定2,3,7,8,-TCDD和2,3,7,8-TCDF，则将窗口修改为包括四氯和五氯异构体、二苯醚和锁定质量数；c）HRGC/HRMS应满足附录C的表C.1最低检测限要求，进样CS1时PCDD/Fs和标记化合物的信噪比应大于10:1；13d）C12-1,2,3,4-TCDD在DB-5柱上的绝对保留时间应大于25.0min。6.1.3保留时间窗口确定采用优化的升温程序，进样时间窗口确定的标准溶液。附录B的表B.5给出了时间窗口确定的标准溶液流出顺序（最先出峰、最后出峰）。如果仅检测2,3,7,8-TCDD和2,3,7,8-TCDF，则无须进行时间10 GB5009.205—2013窗口确定试验。6.1.4异构体确认6.1.4.1采用分析程序及优化的分析条件，进样专属性检查的标准溶液（附录B的表B.8），进行异构体确认。6.1.4.2在相应的色谱柱的四氯窗口色谱图上分别计算距2,3,7,8-TCDD（如附录D的图D.6）和TCDF最近的异构体GC色谱峰重叠百分比。6.1.4.3在相应的色谱柱的四氯窗口色谱图上，确认相距最近的异构体与2,3,7,8位取代化合物色谱峰的底部重叠（如附录D的图D.6）应小于25%如果重叠超过25%，应调整分析条件并重新测试或更换GC柱，重新进行校正。按式（2）计算峰谷高比。xHV×100%…………………………………………（2）y式中：HV——峰谷高比；x——2,3,7,8-TCDD与1,2,3,7/1,2,3,8-TCDD的峰谷高度，单位为毫米（mm）；y——2,3,7,8-TCDD的峰高，单位为毫米（mm）。6.1.5同位素稀释的校正注：在样品提取前，将附录B的表B.2中含有15个2,3,7,8位取代的同位素标记PCDD/Fs定量内标溶液加到样品中（见5.2.2.2、5.2.3.1、5.2.4.1、5.2.5）。6.1.5.1由校正标准溶液的分析结果，绘制天然化合物与标记化合物的RRF对浓度的校正曲线或采用线性回归方程计算。由5个校正标准溶液测定各化合物的相对响应因子(RRF)。6.1.5.2根据附录C的表C.3中第一和第二个精确质量数离子的的响应峰面积，按式（3）计算各化合物相对于其标记化合物的RRF。(AA)cRRF1n2n1………………………………………（3）(AA)c1121n式中：A——PCDD/Fs的第一个质量数离子的的峰面积；1nA——PCDD/Fs的第二个质量数离子的的峰面积；2nc——校正标准中目标化合物的浓度，单位为微克每升（μg/L）；1A——标记化合物的第一个质量数离子的峰面积；11A——标记化合物的第二个质量数离子的峰面积；21c——校正标准中定量内标化合物的浓度，单位为微克每升(μg/L)。n6.1.5.3在给定的条件下，分别进样CS1～CS5校正标准溶液（3.2.1.7），计算各标准溶液中目标化合物的RRF。6.1.5.4线性试验：在测试的5个标准溶液的浓度范围内，如果各化合物的RRF结果稳定（变异系数小于20％），则可以采用RRF的均值进行计算；否则，采用5个浓度校正标准溶液的校正曲线。6.1.6内标校正13注：适合于没有直接对应C标记的稳定性同位素化合物的OCDF的测定以及定量内标与净化标准回收率的测定。11 GB5009.205—20136.1.6.1响应因子(RF)：a）OCDF的RF按式（4）计算：(AA)cRF1s2sis……………………………………（4）(AA)c1is2iss式中：A——OCDF的第一个质量数离子的峰面积；1sA——OCDF的第二个质量数离子的峰面积；2s13cis——校正标准中C12-OCDD的浓度，单位为微克每升（μg/L）；13A1——C12-OCDD的第一个质量数离子的峰面积；is13A2——C12-OCDD的第二个质量数离子的峰面积；isc——校正标准中OCDF的浓度，单位为微克每升（μg/L）。sb）定量内标和净化标准的RF按式（5）计算：(AA)CRF1s2sis……………………………………（5）(AA)C1is2iss式中：A——定量内标的第一个质量数离子的峰面积；1sA——定量内标的第二个质量数离子的峰面积；2sc——校正标准中回收率内标的浓度，单位为微克每升（μg/L）；isA——回收率内标的第一个质量数离子的峰面积；1isA——回收率内标的第二个质量数离子的峰面积；2isc——校正标准中定量内标的浓度，单位为微克每升（μg/L）。s37注：Cl4-2,3,7,8-TCDD只有一个m/z，见附录B的表B.7。6.1.6.2在给定的条件下，进样CS1～CS5校正标准溶液各1.0μL（或2.0μL），采用内标法校正分析系统，计算各目标化合物的RF。6.1.6.3线性试验：在测试的5个校正标准的浓度范围内，如果各化合物的RF保持恒定（相对标准偏差RSD小于35%），则可采用5个浓度点的RF均值，否则需要采用5个浓度的校正曲线。6.1.7联合校正进样含PCDD/Fs、标记化合物及内标的校正溶液，由同位素稀释和内标方法获得校正曲线，并分析曲线的变化。如果不能满足需要，则需要重新校正。6.1.8数据存储记录并存储MS采集的数据。6.2仪器校正和运行检查6.2.1性能检查12 GB5009.205—2013在分析过程中，每隔12h校验一次GC/MS性能。注入CS3校正标准溶液，检查分析系统的各项性能指标。只有在符合规定的情况下，才能进行空白、IPR、OPR和样品的检测。6.2.2MS分辨率分析前，应确认MS静态分辨率应至少为10000，并每隔12h检查一次。一旦分辩率达不到要求，则应采取相应的校正措施。6.2.3校正标准的验证6.2.3.1检查附录C的表C.4中各目标化合物离子的丰度比是否符合规定，如果不符合，需要调谐质谱仪，重新校正，使监测离子的丰度比符合规定。6.2.3.2校正标准中PCDD/Fs及其同位素标记化合物的色谱峰信噪比（S/N）应大于10，否则需要调谐质谱仪，重复进行校正。6.2.3.3采用同位素稀释技术，根据相应的定量内标计算PCDD/Fs含量；采用内标法，计算定量内标的回收率，应符合附录C的表C.2的要求。6.2.4保留时间及GC分辨率6.2.4.1保留时间13136.2.4.1.1对保留时间：在校正试验中，回收内标C12-1,2,3,4-TCDD及C12-1,2,3,7,8,9-HxCDD的绝对保留时间偏差应在±15s范围内。6.2.4.1.2相对保留时间：在校正试验中，PCDD/Fs及标记化合物的相对保留时间应在附录C的表C.1规定的限度范围内。6.2.4.2GC分辨率6.2.4.2.1在相应的色谱柱上进样校正标准溶液，检查分离度，要求在m/z＝319.8965时，2,3,7,8-TCCD与其他四氯代二苯并二噁英异构体峰谷高度(附录D的图D.6)不应超过25%。6.2.4.2.2如果任何目标化合物的绝对保留时间和2,3,7,8-氯取代异构体的分离度未达到要求，应调试GC或更换GC柱，并重新校正。6.2.5分析过程中的精密度及回收率试验（OPR）6.2.5.1在同一批样品分析之前，应首先进行分析过程的精密度及回收率（OPR）试验。在空白参考基质（3.5）中加入PCDD/Fs的精密度和回收率检查标准溶液（3.2.1.5）使其最终提取液（20μL）中PCDD/Fs的浓度达到附录C的表C.2中的测试浓度。对制备好的OPR样品进行分析，分析步骤应与实际样品完全一致，提取液最终定容至20μL。6.2.5.2采用同位素稀释法，根据定量内标，计算PCDD/Fs含量。用内标法计算1,2,3,7,8,9-HxCDD和OCDF含量（计算OPR测定值时定量公式中的样品量为0.02mL，计算结果单位相应改为μg/L)同时计算各同位素标记化合物的回收率，并与附录C的表C.2规定进行比较，测定值均在规定的范围内后方可进行实际样品的分析。6.2.6空白对照检查OPR试验后，应进行样品的空白对照检查，以确定分析系统未受到污染及没有OPR分析的残留，然后才能进行样品的检测。6.3定性分析6.3.1对净化后的试样提取液进行仪器分析，监测附录C的表C.3中两个精确的m/z信号，信号应在13 GB5009.205—20132s内达到最大值。6.3.2在样品提取液中，监测各PCDD/Fs离子的精确质量数，阳性样品中目标PCDD/Fs的GC峰S/N不应小于2.5，而校正标准中PCDD/Fs的GC峰S/N不应小于10。6.3.3附录C的表C.3监测的两个质量数离子的峰面积比值应符合附录C的表C.4要求，或在校正标准CS3中相应两个质量数离子的峰面积比值的±10%范围内。6.3.4各目标化合物的相对保留时间应符合附录C的表C.1的规定。6.3.5确认分析：由于2,3,7,8-TCDF异构体在DB-5ms柱上未能得到良好分离，因此，如果在DB-5ms柱或等效检出2,3,7,8-TCDF的样品，应在RTX－2330或等效的色谱柱上进行确认分析。四氯窗口m/z＝303.9016色谱图中2,3,7,8-TCDF与其他四氯代呋喃异构体之间峰谷高度均不应超过25%。6.3.6当上述定性指标（6.3.1～6.3.5）未达到要求时，应进一步净化样品，除去干扰物质后重新分析。6.4定量测定6.4.1同位素稀释定量13在样品提取前，定量添加C12标记的定量内标，以校正PCDD/Fs的回收率。根据测定的相对响应13和样品取样量与C12标记定量内标加入量，按式（6）计算样品中目标化合物的浓度：(AA)mc1n2n1……………………………………（6）ex(AA)RRFm11212式中：c——样品中PCDD/Fs的浓度，单位为微克每千克（μg/kg）；exA——PCDD/Fs的第一个质量数离子的峰面积；1nA——PCDD/Fs的第二个质量数离子的峰面积；2n13m1——样品提取前加入的C12标记定量内标量，单位为纳克（ng）；13A1——C12标记定量内标的第一个质量数离子的峰面积；113A2——C12标记定量内标的第二个质量数离子的峰面积；1RRF——相对响应因子；m——试样量，单位为克（g）。213由于存在潜在的干扰，在样品中没有添加OCDF的同位素标记物，而OCDF是用OCDD的C12标记定量内标进行定量。当然，在样品的提取、浓缩和净化过程中，由于OCDD和OCDF化学行为不同，采用这种计算方式，可能导致OCDF定量的准确度降低。但是，由于相对于其他二噁英及呋喃类化合物而言，OCDF毒性较低，故准确度降低不会产生显著的影响。13由于使用C12–1,2,3,7,8,9-HxCDD作为回收率内标，因此1,2,3,7,8,9-HxDD的定量也不能采用严格13的同位素稀释法，而采用1,2,3,4,7,8-HxCDD和1,2,3,6,7,8-HxCDD的C12标记定量内标平均响应进行定量计算。6.4.2内标定量及标记化合物回收率136.4.2.1样品中1,2,3,7,8,9-HxCDD的浓度分别采用1,2,3,4,7,8-HxCDD和1,2,3,6,7,8-HxCDD的C1213标记定量内标平均响应，OCDF以OCDD的C12标记定量内标为内标，按式（7）计算：14 GB5009.205—2013(AA)mc1s2sis……………………………………（7）ex(AA)RFm1is2is3式中：c——样品中1,2,3,7,8,9-HxCDD和OCDF的浓度，单位为微克每千克（μg/kg）；exA——PCDD/Fs的第一个质量数离子的峰面积；1sA——PCDD/Fs的第二个质量数离子的峰面积；2s13mis——C12标记定量内标的量，单位为纳克（ng）；13A1——C12标记定量内标的第一个质量数离子的峰面积；is13A2——C12标记定量内标的第二个质量数离子的峰面积；isRF——响应因子；m——试样量，单位为克（g）。31337样品提取液中C标记定量内标及Cl-净化标准的浓度采用测定的响应因子，按式（8）计算：(AA)cc1s2sis……………………………………（8）ex(AA)RF1is2is式中：1337cex——提取液中C12标记定量内标及Cl-净化标准的浓度，单位为微克每升（μg/L）；1337A1——C12标记定量内标及Cl-净化标准的第一个质量数离子的峰面积；s1337A2——C12标记定量内标及Cl-净化标准的第二个质量数离子的峰面积；sc——回收率内标的浓度，单位为微克每升（μg/L）；isA——回收率内标的第一个质量数离子的峰面积；1isA——回收率内标的第二个质量数离子的峰面积；2isRF——响应因子。37注：Cl-净化内标只有1个m/z。13376.4.2.2由上述测定的浓度，按式（9）计算C12定量内标和Cl-净化标准的回收率（％）：c1X100%…………………………………………………（9）2c2式中：X——回收率，%；2c——测得浓度，单位为微克每升（μg/L）；1c——加入浓度，单位微克每升（μg/L）。26.4.3定量的其他要求如果化合物的定量离子峰面积超过校正标准范围，则应减少样品的取样量。6.4.4结果报告15 GB5009.205—20136.4.4.1标准、空白和样品中PCDD/Fs和标记化合物浓度结果应保留三位有效数字。6.4.4.2在定量限或以上的结果，以实际检测结果报告。低于检测限的结果可以报告“未检出”或按管理机构的要求报告。6.4.4.3空白对照应报告1/3定量限以上的测定结果。6.4.4.4根据需要，可以报告总PCDDs、总PCDFs和总PCDD/Fs的测定结果。7DL-PCBs的色质分析7.1HRGC-HRMS条件7.1.1推荐的色谱条件色谱柱：DB-5ms柱或等效柱，柱长60m、内径0.25mm、液膜厚度0.25μm。进样口温度：290℃。接口温度：290℃。柱温：80℃（保持2min）；以15℃/min升温速率升至150℃；再以2.5℃/min升温速率升至270℃（保持3min）,以15℃/min升温速率升至330℃（保持1min）。载气：恒流，1.2mL/min。为了得到最佳的分离度和灵敏度，需要对GC条件进行优化。条件优化后，标准溶液、空白、IPR及OPR和样品测定应执行相同的GC条件。7.1.2质谱（MS）参数7.1.2.1分辨率7.1.2.1.1采用参考气（PFK或FC43）对质谱仪进行调谐，在m/z300～350质量范围内，监测m/z330.9792或PFK其他碎片离子，使质谱仪的分辨率达到10000（10%峰谷）。分析过程中调节进入HRMS中参考气的量，要求所选择的锁定质量数信号强度不得超过检测器满量程的10%。7.1.2.1.2在分辨率≥10000条件下，监测附录C的表C.3中规定的各目标化合物的两个精确质量数离子，得到相应的选择离子流图（SICP）。由于监测离子的质量范围宽，在整个质量范围内，可能难以保持10000分辨率。为此，分辨率≥8000也是适用的，但是，需要保持中间质量数离子的分辨率≥10000。7.1.2.2质量校正采用PFK（或其他参考气）锁定质量数对质谱仪的质量偏移进行校正。每组中锁定的质量数离子见附录C的表C.3（以PFK为例）。7.1.2.3离子丰度比、最小水平和信噪比7.1.2.3.1在给定的GC条件下，进样1μL或2μLCS1校正标准溶液（参见附录B的表B.12）。测定各目标化合物峰面积，计算附录C表的C.3中规定的精确质量数离子的丰度比，并与附录C的表C.4中的理论值比较。CS1标准溶液中所有的PCBs和标记化合物的离子丰度比应符合附录C的表C.4质量控制（QC）要求；否则需要调谐质谱仪，重新测定，使其符合规定，并对质谱仪的分辨率进行确认。7.1.2.3.2各窗口中监测的精确质量数离子参见附录C的表C.3。各窗口有必要进行连续监测，确保在GC运行中能够监测全部DL-PCBs。7.1.2.3.3HRGC/HRMS应满足附录C的表C.1最低检测限要求，进样CS1，DL-PCBs和标记化合物的信噪比应大于10:1。7.1.3同位素稀释校正13注：在样品提取前，将附录定量内标（C12标记化合物）溶液加到样品中（见5.2.2.2、5.2.3.1、5.2.4.1、5.2.5）。16 GB5009.205—2013137.1.3.1由校正溶液的分析结果，绘制天然化合物与C12标记化合物的RRF对浓度的校正曲线或采用线性回归方程计算。采用下列方法，由5个校正标准溶液测定各化合物的相对响应。7.1.3.2根据附录C的表C.3中第一个和第二个精确质量数离子的的响应峰面积，按式（10）计算各13化合物相对于其C12标记化合物的RRF。(AA)cRRF1n2n1……………………………………（10）(AA)c1121n式中：A——DL-PCBs的第一个m/z的面积；1nA——DL-PCBs的第二个m/z的面积；2n13c1——校正标准中C12标记化合物的浓度，单位为微克每升（μg/L）；13A1——C12标记化合物的第一个m/z的面积；113A2——C12标记化合物的第二个m/z的面积；1c——校正标准中天然化合物的浓度，单位为微克每升（μg/L）。n7.1.3.3在给定的条件下，分别进样CS1～CS5校正溶液，计算各标准溶液中目标化合物的RRF。对于高灵敏度监测，应包括CS0.2浓度点。计算各目标化合物的RRF及5个浓度点的RRF均值和相对标准差。7.1.3.4RRF的线性：在测试的5个标准溶液的浓度范围内，如果各化合物的RRF结果稳定（相对标准偏差RSD<20％），则可以采用RRF的均值进行计算；否则，需要采用5个浓度的校正曲线。7.1.4内标校正13内标法适合于测定C12标记定量内标及净化标准的回收率的测定。根据附录C的表C.3中第一个和第二个精确质量数离子的的响应峰面积，按式（11）计算响应因子RF：(AA)cRF1s2sis……………………………………（11）(AA)c1is2iss式中：13A1——C12定量内标及净化标准的第一个质量数离子的峰面积；s13A2——C12定量内标及净化标准的第二个质量数离子的峰面积；sc——校正标准中回收率内标的浓度，单位为微克每升（μg/L）；isA——回收率内标的第一个质量数离子的峰面积；1isA——回收率内标的第二个质量数离子的峰面积；2isc——校正标准中定量内标及净化标准的浓度，单位为微克每升（μg/L）。s7.2HRGC/HRMS分析137.2.1进样前，在样品提取液中加入适量C12标记回收率内标（5.4.2）。137.2.2进样1.0μL含C12标记回收率内标的样品提取液。17 GB5009.205—20137.2.3在保留时间窗口下，监测精确质量数离子，且监测高氯取代化合物时应确保其碎片离子对低氯取代化合物不产生影响。7.3校正和运行检查7.3.1校正检查要求与PCDD/Fs要求相同。7.3.2保留时间：要求对绝对保留时间和相对保留时间进行考察：13a)绝对保留时间：验证试验中，C12标记DL-PCBs/窗口定义标准同类物的绝对保留时间在其校正标准相应保留时间的±15s范围内。如果采用了替代的柱或柱系统，在该柱上进行的校正标准相应保留时间的±15s范围内；b)相对保留时间：验证试验中，天然PCB和标记化合物的相对保留时间在其相应的限值内。如果采用了替代的柱或柱系统，在该柱相应的RRT限值内；c)如果任一化合物的绝对和相对保留时间不在规定的限值内，GC便不能有效地工作。这种情况下，应调整GC并重复验证试验或重做校正，或替换GC柱并进行校正验证或重做校正。7.3.3GC分辨率要求与PCDD/F要求相同（见6.2.4.2）。7.4过程精密度及回收率7.4.1在同一批样品分析之前，应首先进行分析过程的精密度及回收率（OPR）试验。在空白参考基质（3.5）中加入DL-PCBs的精密度和回收率检查标准溶液（3.2.2.4）使其最终提取液（20μL）中DL-PCBs的浓度达到附录C的表C.2中的测试浓度。对制备好的OPR样品进行分析，分析步骤应与实际样品完全一致，提取液最终定容至20μL。7.4.2用同位素稀释法计算最终提取液中DL-PCBs的浓度（计算OPR测定值时定量公式中的样品量为0.02mL，计算结果单位相应改为μg/L)。用内标法计算标记物的百分回收率。7.4.3将测定浓度和回收率与附录C的表C.3中规定的范围进行比较，若所有化合物均在可接受范围内，则系统的效能可以接受，并可以进行空白及样品分析。但如果有任何一个化合物浓度在给定的范围之外，则重新准备、提取、净化同一批样品，并重复OPR试验。7.4.4空白对照：在OPR试样分析以后立刻进行每批样品中空白样的分析，以证明系统没有受到污染及OPR分析时没有过载残留。空白的分析结果应达到要求才能开始样品分析。7.5定性分析7.5.1进样样品提取液，附录C的表C.3中两个精确m/z离子的信号应存在并且在两个扫描内达到最大化。7.5.2对于样品提取液中每个PCB，其每个精确m/z的GC峰的S/N应大于或等于2.5，对于校正标准中的DL-PCBs，其S/N不应低于10。7.5.3所监测的两个准确m/z的积分面积比应在附录C的表C.4所规定的限值内，或在最新测试获得的CS-3或VER中测得比例的±15%范围内。7.5.4任何一种PCB峰的相对保留时间应在附录C的表C.1规定的RRT的QC限值内；如果采用了替代的柱或柱系统，则要在该系统相应的RRT的QC限值内。7.5.5由于同类物峰的重迭和干扰物质的影响，有可能使所有的定性标准全部都无法满足。高氯取代同类物也有可能发生1个或更多个的氯丢失，从而使同一保留时间流出的低氯取代同类物的浓度出现放大的错误。如果这些干扰影响了定性，那就应另取一份样品进行提取，进一步净化并分析。7.6定量测定7.6.1同位素稀释定量137.6.1.1通过提取前在各份样品中添加已知量的C12标记定量内标，可修正DL-PCBs的回收率，因18 GB5009.205—201313为天然PCBs与其标记物在提取、浓缩、GC色谱行为上会具有相似的效应。只要C12标记物的添加量恒定，与校正数据相关的RRF可直接确定最终提取物中相应化合物的浓度。7.6.1.2用来自校正数据的RRF和式（12）可计算出提取物中DL-PCBs的浓度：(AA)cc1n2ni……………………………………（12）ex(AA)RRFm1i2i4式中：c——样品中DL-PCBs的浓度，单位为微克每千克（μg/kg）；exA——目标DL-PCBs的第一个质量数离子的峰面积；1nA——目标DL-PCBs的第二个质量数离子的峰面积；2n13ci——加入C12标记定量内标的量，单位为纳克（ng）；13A1——C12标记定量内标的第一个质量数离子的峰面积；i13A2——C12标记定量内标的第二个质量数离子的峰面积；iRRF——相对响应因子；m——试样量，单位为克（g）。4137.6.2C12标记物回收率13137.6.2.1提取物中C标记净化标准和C标记定量内标的浓度是利用从校正数据确定的响应因子，用式（13）计算：(AA)cc1s2sis………………………………………………（13）ex(AA)RF1is2is式中：1313cex——提取液中C12标记净化标准和C12标记定量内标的浓度，单位为微克每升（μg/L）；1313A1——C12标记净化标准或C12标记定量内标的第一个质量数离子的峰面积；s1313A2——C12标记净化标准或C12标记定量内标的第二个质量数离子的峰面积；sc——回收率内标的浓度，单位为微克每升（μg/L）；isA——回收率内标的第一个质量数离子的峰面积；1isA——回收率内标的第二个质量数离子的峰面积；2isRF——响应因子。13137.6.2.2用7.6.2.1所测定的提取液中的浓度来计算C12标记定量内标和C12标记净化标准的百分回收率，式（14）如下：c3X100…………………………………………………（14）3c4式中：X3——回收率，%；c3——测得浓度，单位为微克每升（μg/L）；19 GB5009.205—2013c4——加入浓度，单位为微克每升（μg/L）。7.6.3定量的其他要求如果任何化合物两个定量m/z离子之一的峰面积超过系统的校正范围，则以一定的稀释比稀释，使浓度降至校正范围内。如果能用同位素稀释法可靠定量，则可以将含水样品稀释或取一小份土壤、组织或混合相样品进行分析。7.6.4结果报告标准、空白和样品中的PCB和标记化合物浓度结果都应报告三位有效数字。空白、标准和样品分析报告最低定量水平以上的结果。附录C的表C.1所列的估计检测限（EML）是基于实验室的一般污染水平，实验室可为每个DL-PCB建立低于此EML的检测限（ML）。除分别单独报告样品和空白的结果外，还可以报告空白修正的结果，即从样品浓度中扣除空白值以进行空白修正。8分析结果的表述8.1毒性当量的计算按照WHO规定的二噁英及其类似物的毒性当量因子（见附录A的表A.1）和式(15)~式(20)计算样品中的二噁英类化合物的毒性当量(TEQ)。TEQTEFc…………………………………………………………（15）iiiTEQPCDDsTEFiPCDDsciPCDDs……………………………………（16）TEQPCDFsTEFiPCDDFsciPCDFs……………………………………（17）TEQPCDD/FsTEQPCDDsTEQPCDFs…………………………………（18）TEQDLPCBsTEFiDLPCBsciDLPCBs………………………………（19）TEQTEQTEQ……………………（20）(PCDD/FsDLPCBs)PCDD/FsDLPCBs式中：TEQ——食品中PCDD/Fs或DL-PCBs中同系物的二噁英毒性当量(以TEQ计)，单位为微克每i千克（μg/kg)；TEF——PCDD/Fs或DL-PCBs中同系物的毒性当量因子；ic——食品中PCDD/Fs或DL-PCBs中同系物的浓度，单位为微克每千克（μg/kg）；i其余下标为特定PCDD/Fs或DL-PCBs的组合。8.2最终结果的报告8.2.1样品中的PCDD/Fs和DL-PCBs结果需要报告测定的17种PCDD/Fs和12种DL-PCBs的浓度、检测限和各自的TEQ数值，以及TEQPCDDs、TEQPCDFs、TEQPCDD/Fs、TEQDL-PCBs和TEQPCDD/Fs+DL-PCBs，所有数据都应报告三位有效数字。8.2.2一般以组织的湿重含量报告结果（μg/kg），而不是依据组织的脂肪含量。同时报告脂类的百分含量，以便于用户可根据他们的意愿计算以脂类计的浓度。8.2.3在定量限或以上的结果以实际结果报告；低于检测限的结果可以报告―未检出‖或按管理机构的要求报告。8.2.4出具结果报告时应注明所采用TEF的来源。20 GB5009.205—20139质量保证/质量控制9.1分析质量保证的最基本的要求包括：实验室分析能力的初步证明，添加标记化合物样品的分析数据评价和数据质量控制规范，以及标样和空白的操作分析能力。实验室操作应与已建立的操作标准的实验室对比，并且分析数据应符合本方法要求的质量保证参数。9.2初始精密度和回收率（IPR）检查试验：在实验室开始使用本方法进行实际样品的分析前需要对实验室的分析能力进行检查。平行称取4份适量参考基质（3.5），每份均加入PCDD/Fs的精密度和回收率检查标准溶液（3.2.1.5）及DL-PCBs的精密度和回收率检查标准溶液（3.2.2.4）使其最终提取液（20μL）中PCDD/Fs和DL-PCBs的浓度达到附录C的表C.2中的测试浓度。对制备好的IPR样品进行分析，分析步骤应与实际样品完全一致。计算4个IPR样品中PCDD/Fs和DL-PCBs的实际测定值(计算IPR测定值时6.4.1和7.6.1定量公式中的样品量为0.02mL,计算结果单位相应改为μg/L)及定量内标的回收率的均值（X）和标准偏差（S）并与附录C的表C.2中的规定范围比较，当所有化合物的结果都在其规定范围内时表明实验室具备了分析能力，才可以开展实际样品的分析。9.3应有方法空白来证明系统未被污染。9.4所有分析样品应添加标记化合物。9.5每个标记化合物的回收率都应符合附录C的表C.2所列的范围内。如果任何一个化合物的回收率不能满足要求，那么本方法对于该样品中该化合物的方法效能是不能接受的。应增加额外的净化过程来将回收率恢复到正常范围内。所采用了所有的净化过程但回收率仍不在正常范围，那么就需要将样品稀释，或减少基质样品的取样量。9.6实验室应经常考察校正结果、精确度和回收率，以确认分析系统处于正常状态。9.7实验室应该对各种样品基质添加标记化合物溶液进行验证实验，用来评估方法的运行情况。9.8样品中标记化合物的回收率需要按期评价并做好记录。定期对各种基质样品进行平行样分析（至少5个），计算出标记化合物的平均回收率和相对标准偏差。9.9质量控制考察样品：定期分析质量控制考察样品以确认校正标准的准确性和分析过程的可靠性。9.10为了满足超痕量分析要求，所用计量器具需要经常校正。9.11实验室应按时核查校正曲线、精确度和回收率，以确认分析系统的质量处于良好控制状态。9.12如果任何一个PCB在空白中高于附录C的表C.1所列的MDL或限量标准的1/3（取更大者），或在各PCB的最低水平上检出了干扰物，则应终止样品分析，直到对该批样品重新提取和分析并确定同批空白中没有明显污染。在报告结果或呈报给有关机构之前，所有样品应有未污染的空白结果。10其他10.1方法的检测限2,3,7,8-四氯代二苯并二噁英（2,3,7,8-TCDD）和2,3,7,8-四氯代二苯并呋喃（2,3,7,8-TCDF）为0.04ng/kg、八氯代二苯并二噁英（OCDD）和八氯代二苯并呋喃（OCDF）为0.40ng/kg、其余PCDD/Fs为0.20ng/kg、DL-PCB为1.00ng/kg。10.2分析过程中的干扰及消除10.2.1溶剂、试剂、玻璃器皿和其他样品处理用的物品若被污染或干扰过高都会引起背景增加，以致得到错误的结果。因此，本方法需要使用高纯度的溶剂或采用全玻璃系统重蒸的溶剂。如有必要，柱填21 GB5009.205—2013料应通过溶剂提取或洗脱纯化。10.2.2将玻璃器皿和工具隔离，隔离工作区应有标记。玻璃器皿应正确清洗，防止通过玻璃器皿表面吸附，造成目标化合物损失和污染样品。玻璃器皿清洗步骤如下：a）玻璃器皿在使用后应立即用溶剂淋洗并用洗涤剂洗净。玻璃器皿在洗涤剂中超声波清洗约30s即可。玻璃器皿上可拆卸的部分，如分液漏斗上的聚四氟活塞，在用洗涤剂清洗之前应将其拆开，单独清洗；b）在用洗涤剂清洗之后，玻璃器皿应立即用溶剂淋洗。甲醇淋洗后，用热水洗净，再依次用甲醇、丙酮和二氯甲烷淋洗；c）切勿使用常规的方法烘烤可反复使用的玻璃器皿，以致使玻璃表面产生活性位点而不可逆地吸附PCDD/Fs；d）索氏提取装置在使用前应先用甲苯预提取3h。分液漏斗应用二氯甲烷/甲苯（80：20，体积比）振荡2min，沥干，再用纯二氯甲烷振荡2min。10.2.3分析用的所有材料应确保不含有任何干扰物，分析20个样品后需要考察参考物和空白对照的结果：a）参考物基质应与分析样品尽量接近。事实上，参考物不应该含有可检测水平PCDD/Fs，但应含有与被分析样品相似浓度水平的基质干扰物；b）样品中提取出的干扰物依据采样的地点和样品来源的不同而不同。干扰物的浓度可能要比PCDD/Fs高几个数量级。最常见的几种干扰物质是多氯联苯、甲氯基联苯、羟基二苯醚、苄基苯醚、多环芳烃和农药。由于食品中PCDD/Fs为超痕量低水平，因此，有效地净化步骤十分重要。10.2.4对于可重复使用的玻璃器皿应根据处理样品的特殊性进行标记，这样有助于在实验室内跟踪造成样品污染的来源，识别与高浓度样品有关的一些玻璃器皿是否需要进一步清洗或不得使用。10.2.5组织中类脂含量影响样品PCDD/Fs的分析。不同物种和不同部位组织中的类脂含量变化很大，且类脂在各种有机溶剂的溶解变度化大，当类脂含量高时，阻塞净化步骤中的柱色谱。类脂可以用酸解步骤去除，然后再用氧化铝、或弗罗里土，和活性炭以及其他净化步骤去除干扰组分。10.3污染防护和废弃物的管理10.3.1谨慎处理本方法中所使用的溶剂和化学品，减少对环境的污染。10.3.2妥善保管本方法所使用的标准溶液，避免不必要的接触和暴露。10.3.3实验室应遵守国家和地方的废弃物管理法规，特别是有毒物质的鉴别和排放条例，控制和减小通风橱和工作台面的污染源。10.3.4防护设备：实验室应备有塑料手套、实验服、安全眼镜或口罩以及通风橱。专门用于化学品安全操作的防毒面具。在可能产生烟雾或尘埃的分析操作中，操作人员应戴上装有活性炭过滤的呼吸器。在操作暴露样品或标准样品时应当佩戴眼晴等保护设备。在处理高浓度PCDD/Fs和DL-PCBs样品时，应当在乳胶套内再加一双耐溶剂手套。通风橱顶端安放塑料吸附纸便于监测污染状况。从色－质联用仪中排出的废气应用装有活性炭的柱子吸附，或通入油脂或高沸点的醇中吸收处理。10.3.5表面污染检查：用一片滤纸在工具和工作台的表面擦试。然后经抽提后浓缩，并用GC-ECD分析。如果每次擦试检测低于0.1μg,则可认为是清洁的。如果检测中超过10μg，则表明应对设备和工作间进行清洗，并提示在此之前所作的工作和实验结果不可靠。10.3.6污染去除要尽可能的彻底，具体可按以下要求进行操作：a)人员污染的去除：用大量肥皂水或洗涤剂进行清洗；b)玻璃器皿、工具和表面：分别用溶剂、洗涤剂和超纯水清洗；c)实验服清洗：已被污染的实验服应该收集到塑料袋中。搬运废物袋和洗涤衣服的人应接受适当22 GB5009.205—2013的操作训练。如果洗衣工知道其危害，他们便可在将实验服放入洗衣机中时避免接触它们。在洗其他衣物之前，洗衣机应空载运行一次。10.3.7废物的处理：首先应尽量减少污染废物。其次，废物缸中须放入衬垫的塑料袋。勤杂工和其他人员应经过废物的处理安全操作培训。液体或可溶废物应先溶于甲酸或乙醇中，然后在波长小于290nm的紫外灯下照射数天直到不再检出PCDD/Fs为止。PCDD/Fs在800°C以上就可分解。低浓度的废弃物，例如吸附纸、组织、动物尸体和塑料手套可以在合适的焚烧炉中焚烧处理。较大的量（毫克水平）应当安全地包装并通过能处理剧毒废物的商业或政府渠道进行处理。23 GB5009.205—2013附录A多氯代二苯并二噁英及呋喃和二噁英样多氯联苯毒性当量因子多氯代二苯并二噁英及呋喃和二噁英样多氯联苯毒性当量因子见表A.1。表A.1WHO规定的具有二噁英毒性当量因子(TEF)的多氯代二苯并二噁英及呋喃和二噁英样多氯联苯化合物WHO1998TEFWHO2005TEF编号2,3,7,8-TCDD1.01.01746-01-62,3,7,8-TCDF0.10.151207-31-91,2,3,7,8-PeCDD1.01.040321-76-41,2,3,7,8-PeCDF0.050.0357117-41-62,3,4,7,8-PeCDF0.50.357117-31-41,2,3,4,7,8-HxCDD0.10.139227-28-61,2,3,6,7,8-HxCDD0.10.157653-85-71,2,3,7,8,9-HxCDD0.10.119408-74-31,2,3,4,7,8-HxCDF0.10.170648-26-91,2,3,6,7,8-HxCDF0.10.157117-44-91,2,3,7,8,9-HxCDF0.10.172918-21-92,3,4,6,7,8-HxCDF0.10.160851-34-51,2,3,4,6,7,8-HpCDD0.010.0135822-46-91,2,3,4,6,7,8-HpCDF0.010.0167562-39-41,2,3,4,7,8,9-HpCDF0.010.0155673-89-7OCDD0.00010.00033268-87-9aPCDD/FsOCDF0.00010.000339001-02-013C12-2,3,7,8-TCDD——76523-40-513C12-2,3,7,8-TCDF——89059-46-113C12-1,2,3,7,8-PeCDD——109719-79-113C12-1,2,3,7,8-PeCDF——109719-77-913C12-2,3,4,7,8-PeCDF——116843-02-813C12-1,2,3,4,7,8-HxCDD——109719-80-413C12-1,2,3,6,7,8-HxCDD——109719-81-513同位素标记的C12-1,2,3,7,8,9-HxCDD——109719-82-613PCDD/FsC12-1,2,3,4,7,8-HxCDF——114423-98-213C12-1,2,3,6,7,8-HxCDF——116843-03-913C12-1,2,3,7,8,9-HxCDF——116843-04-013C12-2,3,4,6,7,8-HxCDF——116843-05-113C12-1,2,3,4,6,7,8-HpCDD——109719-83-713C12-1,2,3,4,6,7,8-HpCDF——109719-84-813C12-1,2,3,4,7,8,9-HpCDF——109719-94-013C12-OCDD——114423-97-124 GB5009.205—2013表A.1（续）化合物WHO1998TEFWHO2005TEF编号3,3",4,4"-TePCB0.00010.0001773,4,4",5-TePCB0.00010.0003812,3,3",4,4"-PePCB0.00010.000031052,3,4,4",5-PePCB0.00050.000031142,3",4,4",5-PePCB0.00010.000031182",3,4,4",5-PePCB0.00010.000031233,3",4,4",5-PePCB0.10.11262,3,3",4,4",5-HxPCB0.00050.000031562,3,3",4,4",5"-HxPCB0.00050.000031572,3",4,4",5,5"-HxPCB0.000010.000031673,3",4,4",5,5"-HxPCB0.010.03169b2,3,3",4,4",5,5"-HPCB0.00010.00003189PCBs13C12-3,3",4,4"-TePCB——77L13C12-3,4,4",5-TePCB——81L13C12-2,3,3",4,4"-PePCB——105L13C12-2,3,4,4",5-PePCB——114L13C12-2,3",4,4",5-PePCB——118L13同位素标记的C12-2",3,4,4",5-PePCB——123L13PCBsC12-3,3",4,4",5-PePCB——126L13C12-2,3,3",4,4",5-HxPCB——156L13C12-2,3,3",4,4",5"-HxPCB——157L13C12-2,3",4,4",5,5"-HxPCB——167L13C12-3,3",4,4",5,5"-HxPCB——169L13C12-2,3,3",4,4",5,5"-HPCB——189L注：TCDD：四氯代二苯并二噁英；TCDF：四氯代二苯并呋喃；PeCDD：五氯代二苯并二噁英；PeCDF：五氯代二苯并呋喃；HxCDD：六氯代二苯并二噁英；HxCDF：六氯代二苯并呋喃；HpCDD：七氯代二苯并二噁英；HxCDF：七氯代二苯并呋喃；OCDD：八氯代二苯并二噁英；OCDF；八氯代二苯并呋喃；TePCB：四氯联苯；PePCB：五氯联苯；HxPCB：六氯联苯；HPCB：七氯联苯。a编号采用CAS登录号。b编号采用国际纯粹应用化学联合会（IUPAC）代码。25 GB5009.205—2013附录B标准溶液实验所需标准溶液见表B.1～表B.14。表B.1PCDD/Fs校正和时间窗口确定标准溶液浓度浓度化合物化合物μg/Lμg/L132,3,7,8-TCDD10C-2,3,7,8-TCDD100132,3,7,8-TCDF10C-2,3,7,8-TCDF100131,2,3,7,8-PeCDD50C-1,2,3,7,8-PeCDD100131,2,3,7,8-PeCDF50C-1,2,3,7,8-PeCDF100132,3,4,7,8-PeCDF50C-2,3,4,7,8-PeCDF100131,2,3,4,7,8-HxCDD50C-1,2,3,4,7,8-HxCDD100131,2,3,6,7,8-HxCDD50C-1,2,3,6,7,8-HxCDD100天然的1,2,3,7,8,9-HxCDD50标记的——13PCDDs/1,2,3,4,7,8-HxCDF50PCDDs/C-1,2,3,4,7,8-HxCDF10013PCDFs1,2,3,6,7,8-HxCDF50PCDFsC-1,2,3,6,7,8-HxCDF100131,2,3,7,8,9-HxCDF50C-1,2,3,7,8,9-HxCDF100132,3,4,6,7,8-HxCDF50C-2,3,4,6,7,8-HxCDF100131,2,3,4,6,7,8-HpCDD(WD)50C-1,2,3,4,6,7,8-HpCDD100131,2,3,4,6,7,8-HpCDF(WD)50C-1,2,3,4,6,7,8-HpCDF100131,2,3,4,7,8,9-HpCDF(WD)50C-1,2,3,4,7,8,9-HpCDF10013OCDD100C-OCDD200OCDF100——371,2,6,8-TCDD10净化标准Cl-2,3,7,8-TCDD10131,2,8,9-TCDD10C-1,2,3,4-TCDD100定量内标131,3,6,8-TCDF10C-1,2,3,7,8,9-HxCDD1001,2,8,9-TCDF102,3,7,8-1,2,3,4-TCDD5时间窗1,2,4,7,9-PeCDD50TCDD分1,2,3,7/1,2,3,8-TCDD5口确定1,2,3,8,9-PeCDD50离度检查1,2,3,9-TCDD10标准1,3,4,6,8-PeCDF50———1,2,3,8,9-PeCDF50———1,2,4,6,7,9-HxCDD50———1,2,3,4,6,8-HxCDF50———1,2,3,4,6,7,9-HpCDD50———表B.2PCDD/Fs的同位素标记定量内标的储备溶液浓度浓度同位素标记的化合物同位素标记的化合物μg/Lμg/L1313C-2,3,7,8-TCDD100C-2,3,7,8-TCDF1001313C-1,2,3,7,8-PeCDD100C-1,2,3,7,8-PeCDF1001313C-1,2,3,4,7,8-HxCDD100C-2,3,4,7,8-PeCDF1001313C-1,2,3,6,7,8-HxCDD100C-1,2,3,4,7,8-HxCDF1001313PCDDsC-1,2,3,4,6,7,8-HpCDD100PCDFsC-1,2,3,6,7,8-HxCDF1001313C-OCDD200C-1,2,3,7,8,9-HxCDF10013——C-2,3,4,6,7,8-HxCDF10013——C-1,2,3,4,6,7,8-HpCDF10013——C-1,2,3,4,7,8,9-HpCDF100表B.3PCDD/Fs回收率内标标准溶液浓度同位素标记的回收率内标μg/L13C-1,2,3,4-TCDD200±1013C-1,2,3,7,8,9-HxCDD200±1026 GB5009.205—2013表B.4PCDD/Fs精密度和回收率检查标准溶液浓度浓度天然的化合物天然的化合物μg/Lμg/L2,3,7,8-TCDD402,3,7,8-TCDF401,2,3,7,8-PeCDD2001,2,3,7,8-PeCDF2001,2,3,4,7,8-HxCDD2002,3,4,7,8-PeCDF2001,2,3,6,7,8-HxCDD2001,2,3,4,7,8-HxCDF2001,2,3,7,8,9-HxCDD2001,2,3,6,7,8-HxCDF200PCDDsPCDFs1,2,3,4,6,7,8-HpCDD2001,2,3,7,8,9-HxCDF200OCDD4002,3,4,6,7,8-HxCDF200——1,2,3,4,6,7,8-HpCDF200——1,2,3,4,7,8,9-HpCDF200——OCDF400表B.5PCDD/Fs保留时间窗口确定的标准溶液abc色谱柱Ⅰ色谱柱Ⅱ或者色谱柱Ⅲ最先出峰（μg/L）最后出峰（μg/L）最先出峰（μg/L）最后出峰（μg/L）1,3,6,8-TCDD(65)1,2,8,9-TCDD(60)1,3,6,8-TCDD(65)1,2,8,9-TCDD(60)1,3,6,8-TCDF(100)1,2,8,9-TCDF(100)1,3,6,8-TCDF(100)1,2,8,9-TCDF(100)1,2,4,7,9-PeCDD(50)1,2,3,8,9-PeCDD(60)1,2,4,7,9-PeCDD(50)1,2,3,8,9-PeCDD(60)1,2,4,6,8–PeCDF(50)1,2,3,8,9-PeCDF(50)1,2,4,6,8–PeCDF(50)2,3,4,6,7-PeCDF(50)1,2,4,6,7,9-HxCDD(50)1,2,3,4,6,7-HxCDD(50)1,2,4,6,7,9-HxCDD(50)1,2,3,4,6,7-HxCDD(50)1,2,3,4,6,8–HxCDF(50)1,2,3,4,8,9-HxCDF(50)1,2,3,4,6,8–HxCDF(50)2,3,4,6,7,8-HxCDF(50)1,2,3,4,6,7,9-HpCDD(50)1,2,3,4,6,7,8-HpCDD(50)1,2,3,4,6,7,9-HpCDD(50)1,2,3,4,6,7,8-HpCDD(50)1,2,3,4,6,7,8–HpCDF(50)1,2,3,4,7,8,9-HpCDF(50)1,2,3,4,6,7,8–HpCDF(50)1,2,3,4,7,8,9-HpCDF(50)OCDD(50)OCDD(50)OCDF(50)OCDF(50)a适用于DB-5、BP-5、HP-2、Rtx-5、SPB-5或等效柱。b适用于SP-2331、Rtx-2330或等效柱。c适用于DB-225、BP-225、HP-225、Rtx-225、SPB-225或等效柱。表B.6PCDD/Fs分离度检查的混合溶液abc化合物色谱柱Ⅰ色谱柱Ⅱ色谱柱Ⅲ1,2,3,4-TCDD(25μg/L)1,4,7,8-TCDD(25μg/L)1,2,3,7和1,2,3,8-TCDD(25μg/L)2,3,7,8-TCDD(50μg/L)2,3,7,8-TCDD与2331相同2,3,7,8-TCDD(50μg/L)1,2,3,7-TCDD和1,2,3,8-TCDD(25μg/L)1,2,3,9-TCDD(50μg/L)1,2,3,4-TCDD(25μg/L)1,2,3,9-TCDF(50μg/L)2,3,4,7-TCDF(50μg/L)2,3,7,8-TCDFN/A2,3,7,8-TCDF(100μg/L)2,3,7,8-TCDF(100μg/L)2,3,4,8-TCDF(50μg/L)1,2,3,9-TCDF(65μg/L)注：N/A表示不适用。a适用于DB-5、BP-5、HP-2、Rtx-5、SPB-5和等效柱。b适用于SP-2331、Rtx-2330和等效柱。c适用于DB-225、BP-225、HP-225、Rtx-225、SPB-225和等效柱。表B.7PCDD/Fs校正标准溶液浓度化合物μg/LCS1CS2CS3CS4CS5CSL2,3,7,8-TCDD0.5210402000.12,3,7,8-TCDF0.5210402000.11,2,3,7,8-PeCDD2.5105020010000.51,2,3,7,8-PeCDF2.5105020010000.52,3,4,7,8-PeCDF2.5105020010000.51,2,3,4,7,8-HxCDD2.5105020010000.5天然1,2,3,6,7,8-HxCDD2.5105020010000.5PCDD/Fs1,2,3,7,8,9-HxCDD2.5105020010000.51,2,3,4,7,8-HxCDF2.5105020010000.51,2,3,6,7,8-HxCDF2.5105020010000.51,2,3,7,8,9-HxCDF2.5105020010000.52,3,4,6,7,8-HxCDF2.5105020010000.51,2,3,4,6,7,8-HpCDD2.5105020010000.527 GB5009.205—2013表B.7（续）浓度化合物μg/LCS1CS2CS3CS4CS5CSL1,2,3,4,6,7,8-HpCDF2.5105020010000.5天然1,2,3,4,7,8,9-HpCDF2.5105020010000.5PCDD/FsOCDD5.02010040020001.0OCDF5.02010040020001.013C12-2,3,7,8-TCDD10010010010010010013C12-2,3,7,8-TCDF10010010010010010013C12-1,2,3,7,8-PeCDD10010010010010010013C12–PeCDF10010010010010010013C12-2,3,4,7,8-PeCDF10010010010010010013C12-1,2,3,4,7,8-HxCDD10010010010010010013同位素C12-1,2,3,6,7,8-HxCDD10010010010010010013PCDD/FsC12-1,2,3,4,7,8-HxCDF10010010010010010013C12-1,2,3,6,7,8-HxCDF10010010010010010013C12-1,2,3,7,8,9-HxCDF10010010010010010013C12-1,2,3,4,6,7,8-HpCDD10010010010010010013C12-1,2,3,4,6,7,8-HpCDF10010010010010010013C12-1,2,3,4,7,8,9-HpCDF10010010010010010013C12–OCDD20020020020020020037Cl-2,3,7,8-TCDD0.5210402000.1净化内标413C12-1,2,3,4-TCDD100100100100100100定量内标13C12-1,2,3,7,8,9-HxCDD100100100100100100表B.8PCBs的时间窗口确定和定量内标标准溶液浓度标记物IUPAC代码mg/L13C12-2-MoCB1L1.013C12-4-MoCB3L1.013C12-2,2"-DiCB4L1.013C12-4,4"-DiCB15L1.013C12-2,2",6-TrCB19L1.013C12-3,4,4"-TrCB37L1.013C12-2,2",6,6"-TeCB54L1.013C12-3,3",4,4"-TeCB77L1.013C12-3,4,4",5-TeCB81L1.013C12-2,2",4,6,6"-PeCB104L1.013C12-2,3,3",4,4"-PeCB105L1.013C12-2,3,4,4",5-PeCB114L1.013C12-2,3",4,4",5-PeCB118L1.013C12-2",3,4,4",5-PeCB123L1.013C12-3,3",4,4",5-PeCB126L1.013C12-2,2",4,4",6,6"-HxCB155L1.013C12-2,3,3",4,4",5-HxCB156L1.013C12-2,3,3",4,4",5"-HxCB157L1.013C12-2,3",4,4",5,5"-HxCB167L1.013C12-3,3",4,4",5,5"-HxCB169L1.013C12-2,2",3,4",5,6,6"-HpCB188L1.013C12-2,3,3",4,4",5,5"-HpCB189L1.013C12-2,2",3,3",5,5",6,6"-OcCB202L1.013C12-2,3,3",4,4",5,5",6-OcCB205L1.013C12-2,2",3,3",4,4",5,5",6-NoCB206L1.013C12-2,2",3,3",4,5,5",6,6"-NoCB208L1.013C12-DeCB209L1.0表B.9PCBs同位素标记的净化内标标准溶液浓度标记的PCBIUPAC代码mg/L13C12-2,4,4"-TrPCB28L1.013C12-2,3,3",5,5"-PePCB111L1.013C12-2,2",3,3",5,5",6-HPCB178L1.028 GB5009.205—2013表B.10PCBs同位素标记的回收率内标标准溶液浓度标记的PCBIUPAC代码mg/L13C12-2,2",5,5"-TePCB52L5.013C12-2,2",4",5,5"-PePCB101L5.013C12-2,2",3",4,4",5"-HxPCB138L5.013C12-2,2",3,3",4,4",5,5"-OctaPCB194L5.0表B.11精密度和回收率检查标准溶液浓度标记物IUPAC代码mg/L2-MoCB12.04-MoCB32.02,2"-DiCB42.04,4"-DiCB152.02,2",6-TrCB192.03,4,4"-TrCB372.02,2",6,6"-TeCB542.03,3",4,4"-TeCB772.03,4,4",5-TeCB812.02,2",4,6,6"-PeCB1042.02,3,3",4,4"-PeCB1052.02,3,4,4",5-PeCB1142.02,3",4,4",5-PeCB1182.02",3,4,4",5-PeCB1232.03,3",4,4",5-PeCB1262.02,2",4,4",6,6"-HxCB1552.02,3,3",4,4",5-HxCB1562.02,3,3",4,4",5"-HxCB1572.02,3",4,4",5,5"-HxCB1672.03,3",4,4",5,5"-HxCB1692.02,2",3,4",5,6,6"-HpCB1882.02,3,3",4,4",5,5"-HpCB1892.02,2",3,3",5,5",6,6"-OcCB2022.02,3,3",4,4",5,5",6-OcCB2052.02,2",3,3",4,4",5,5",6-NoCB2062.02,2",3,3",4,5,5",6,6"-NoCB2082.0DeCB2092.029 GB5009.205—2013表B.12PCBs校正标准溶液溶液浓度化合物IUPAC代码μg/LCS-1CS-2CS-3CS-4CS-52-MoPCB11.05.05040020004-MoPCB31.05.05040020002,2"-DiPCB41.05.05040020004,4"-DiPCB151.05.05040020002,2",6"-TrPCB191.05.05040020003,4,4"-TrPCB371.05.05040020002,2",6,6"-TePCB541.05.05040020003,3",4,4"-TePCB771.05.05040020003,4,4",5-TePCB811.05.05040020002,3,3",4,4"-PePCB1051.05.05040020002,3,4,4",5-PePCB1141.05.05040020002,3",4,4",5-PePCB1181.05.0504002000天然的PCBs2",3,4,4",5-PePCB1231.05.05040020003,3",4,4",5-PePCB1261.05.05040020002,2",4,4",6,6"-HxPCB1561.05.05040020002,3,3",4,4",5"-HxPCB1571.05.05040020002,3",4,4",5,5"-HxPCB1671.05.05040020003,3",4,4",5,5"-HxPCB1691.05.05040020002,2",3,4",5,6,6"-HPCB1891.05.05040020002,2",3,3",5,5",6,6"-OcCB2021.05.05040020002,3,3",4,4",5,5",6-OcCB2051.05.05040020002,2",3,3",4,4",5,5",6-NoCB2061.05.05040020002,2",3,3",4,5,5",6,6"-NoCB2081.05.0504002000DeCB2091.05.050400200013C12-3,3",4,4"-TePCB77L10010010010010013C12-3,4,4",5-TePCB81L10010010010010013C12-2,3,3",4,4"-PePCB105L10010010010010013C12-2,3,4,4",5-PePCB114L10010010010010013C12-2,3",4,4",5-PePCB118L10010010010010013C12-2",3,4,4",5-PePCB123L10010010010010013C12-3,3",4,4",5-PePCB126L10010010010010013C12-2,2",4,4",6,6"-HxPCB156L10010010010010013标记的PCBsC12-2,3,3",4,4",5"-HxPCB157L10010010010010013C12-2,3",4,4",5,5"-HxPCB167L10010010010010013C12-3,3",4,4",5,5"-HxPCB169L10010010010010013C12-2,2",3,4",5,6,6"-HPCB189L10010010010010013C12-2,2",3,3",5,5",6,6"-OcCB202L1.05.050400200013C12-2,3,3",4,4",5,5",6-OcCB205L1.05.050400200013C12-2,2",3,3",4,4",5,5",6-NoCB206L1.05.050400200013C12-2,2",3,3",4,5,5",6,6"-NoCB208L1.05.050400200013C12-DeCB209L1.05.050400200013C12-2,4,4"-TrPCB28L10010010010010013标记的净化标准C12-2,3,3",5,5"-PePCB111L10010010010010013C12-2,2",3,3",5,5",6-HPCB178L10010010010010013C12-2,2",5,5"-TePCB52L10010010010010013C12-2,2",4",5,5"-PePCB101L100100100100100标记的回收率内标13C12-2,2",3",4,4",5"-HxPCB138L10010010010010013C12-2,2",3,3",4,4"3,5"-DecaCB194L10010010010010030 GB5009.205—2013表B.13PCBs高灵敏度检查的标准溶液CS0.2化合物IUPAC代码μg/L2-MoPCB10.24-MoPCB30.22,2"-DiPCB40.24,4"-DiPCB150.22,2",6"-TrPCB190.23,4,4"-TrPCB370.22,2",6,6"-TePCB540.23,3",4,4"-TePCB770.23,4,4",5-TePCB810.22,3,3",4,4"-PePCB1050.22,3,4,4",5-PePCB1140.22,3",4,4",5-PePCB1180.22",3,4,4",5-PePCB1230.23,3",4,4",5-PePCB1260.22,2",4,4",6,6"-HxPCB1560.22,3,3",4,4",5"-HxPCB1570.22,3",4,4",5,5"-HxPCB1670.23,3",4,4",5,5"-HxPCB1690.22,2",3,4",5,6,6"-HPCB1890.22,2",3,3",5,5",6,6"-OcCB2020.22,3,3",4,4",5,5",6-OcCB2050.22,2",3,3",4,4",5,5",6-NoCB2060.22,2",3,3",4,5,5",6,6"-NoCB2080.2DeCB2090.2表B.14PCBs校正检查的溶液（为不含同位素标记的CS3溶液）化合物IUPAC代码浓度μg/L2-MoPCB1504-MoPCB3502,2"-DiPCB4504,4"-DiPCB15502,2",6"-TrPCB19503,4,4"-TrPCB37502,2",6,6"-TePCB54503,3",4,4"-TePCB77503,4,4",5-TePCB81502,3,3",4,4"-PePCB105502,3,4,4",5-PePCB114502,3",4,4",5-PePCB118502",3,4,4",5-PePCB123503,3",4,4",5-PePCB126502,2",4,4",6,6"-HxPCB156502,3,3",4,4",5"-HxPCB157502,3",4,4",5,5"-HxPCB167503,3",4,4",5,5"-HxPCB169502,2",3,4",5,6,6"-HPCB189502,2",3,3",5,5",6,6"-OcCB202502,3,3",4,4",5,5",6-OcCB205502,2",3,3",4,4",5,5",6-NoCB206502,2",3,3",4,5,5",6,6"-NoCB20850DeCB2095031 GB5009.205—2013附录C测定方法的技术要求测定方法的技术要求见表C.1～表C.4。表C.1二噁英及其类似物的相对保留时间和检测限a检测限化合物保留时间和定量参考物相对保留时间ng/kg132,3,7,8-TCDFC12-2,3,7,8-TCDF0.999~1.0030.04132,3,7,8-TCDDC12-2,3,7,8-TCDD0.999~1.0020.04131,2,3,7,8-PeCDFC12-1,2,3,7,8-PeCDF0.999~1.0020.20132,3,4,7,8-PeCDFC12-2,3,4,7,8-PeCDF0.999~1.0020.2013以1,2,3,7,8-PeCDDC12-1,2,3,7,8-PeCDD0.999~1.0020.20131313C12-1,2,3,4-TCDDC12-2,3,7,8-TCDFC12-1,2,3,4-TCDD0.923~1.103—1313作为回收率内标C12-2,3,7,8-TCDDC12-1,2,3,4-TCDD0.976~1.043—1313C12-2,3,7,8-TCDDC12-1,2,3,4-TCDD0.989~1.052—1313C12-1,2,3,7,8-PeCDFC12-1,2,3,4-TCDD1.000~1.425—1313C12-2,3,4,7,8-PeCDFC12-1,2,3,4-TCDD1.001~1.526—1313C12-1,2,3,7,8-PeCDFC12-1,2,3,4-TCDD1.000~1.567—131,2,3,4,7,8-HxCDFC12-1,2,3,4,7,8-HxCDF0.999~1.0010.20131,2,3,6,7,8-HxCDFC12-1,2,3,6,7,8-HxCDF0.997~1.0050.20131,2,3,7,8,9-HxCDFC12-1,2,3,7,8,9-HxCDF0.999~1.0010.20132,3,4,6,7,8-HxCDFC12-2,3,4,6,7,8-HxCDF0.999~1.0010.2013PCDD/1,2,3,4,7,8-HxCDDC12-1,2,3,4,7,8-HxCDD0.999~1.0010.2013Fs1,2,3,6,7,8-HxCDDC12-1,2,3,6,7,8-HxCDD0.998~1.0040.20b1,2,3,7,8,9-HxCDD—1.000~1.0190.20131,2,3,4,6,7,8-HpCDFC12-1,2,3,4,6,7,8-HpCDF0.999~1.0010.20131,2,3,4,7,8,9-HpCDFC12-1,2,3,4,7,8,9-HpCDF0.999~1.0010.2013以1,2,3,4,6,7,8-HpCDDC12-1,2,3,4,6,7,8-HpCDD0.999~1.0010.201313C12-1,2,3,7,8,9-HxCDDOCDFC12-OCDF0.999~1.0010.4013作为回收率内标OCDDC12-OCDD0.999~1.0010.401313C12-1,2,3,4,6,7,8-HxCDFC12-1,2,3,7,8,9-HxCDD0.949~0.975—1313C12-1,2,3,7,8,9-HxCDFC12-1,2,3,7,8,9-HxCDD0.977~1.047—1313C12-2,3,4,6,7,8-HxCDFC12-1,2,3,7,8,9-HxCDD0.959~1.021—1313C12-1,2,3,4,7,8-HxCDFC12-1,2,3,7,8,9-HxCDD0.977~1.000—1313C12-1,2,3,6,7,8-HxCDFC12-1,2,3,7,8,9-HxCDD0.981~1.003—1313C12-1,2,3,4,6,7,8-HxCDFC12-1,2,3,7,8,9-HxCDD1.043~1.085—1313C12-1,2,3,4,7,8,9-HxCDFC12-1,2,3,7,8,9-HxCDD1.057~1.151—1313C12-1,2,3,4,6,7,8-HxCDFC12-1,2,3,7,8,9-HxCDD1.086~1.110—1313C12-OCDDC12-1,2,3,7,8,9-HxCDD1.032~1.311—32 GB5009.205—2013表C.1（续）a检测限化合物保留时间和定量参考物相对保留时间ng/kg8181L0.999~1.0021以52L137777L0.999~1.0021(C12-2,2",5,5"-TeCB)81L52L1.324~1.336—为回收率内标77L52L1.347~1.358—123123L0.999~1.0021118118L0.999~1.0021114114L0.999~1.0021105105L0.998~1.0011以101L126126L0.999~1.0021(13C12-2,2",4,5,5"-PeCB)123L101L1.133~1.142—为回收率内标118L101L1.142~1.152—114L101L1.159~1.168—105L101L1.181~1.190—PCBs126L101L1.270~1.279—156——1157156L/157L0.998~1.0001156/157——1以138L167167L0.999~1.001113(C12-2,2",3,4,4",5"-HxCB)169169L0.994~0.9961为回收率内标167L138L1.066~1.074—156L138L1.097~1.100—157L138L1.096~1.103—169L138L1.174~1.176—以189189L0.999~1.00120194L(13C12-2,2",3,3",4,4",5,5"-OcCB)为回收189L194L0.959~0.965—率内标a各目标化合物检测限(ML)是指当取样量为50g时，采用本标准检测，获得可识别信号和可接受的浓度水平。各实验室可根据其条件，调整取样量、体积和净化步骤，并确定相应的检测限和定量限。b13131,2,3,7,8,9-HxCDD的保留时间参考物是C12-1,2,3,6,7,8-HxCDD;1,2,3,7,8,9-HxCDD由C12-1,2,3,4,7,8-HxCDD和13C12-1,2,3,6,7,8-HxCDD的平均响应定量。33 GB5009.205—2013表C.2二噁英及其类似物检测的可接受标准IPR样品中同IUPACa测试浓度bcOPRVER位素内标化合物SX代码μg/Lμg/Lμg/L回收率μg/Lμg/L%2,3,7,8-TCDD—102.88.3~12.96.7~15.87.8~12.9—2,3,7,8-TCDF—102.08.7~13.77.5~15.88.4~12.0—1,2,3,7,8-PeCDD—507.538~6635~7139~65—1,2,3,7,8-PeCDF—507.543~6240~6741~60—2,3,4,7,8-PeCDF—508.636~7534~8041~61—1,2,3,4,7,8-HxCDD—509.439~7635~8239~64—1,2,3,6,7,8-HxCDD—507.742~6238~6739~64—1,2,3,7,8,9-HxCDD—5011.137~7132~8141~61—1,2,3,4,7,8-HxCDF—508.741~5936~6745~56—1,2,3,6,7,8-HxCDF—506.746~6042~6544~57—1,2,3,7,8,9-HxCDF—506.442~6139~6545~56—2,3,4,7,8,9-HxCDF—507.437~7435~7844~57—1,2,3,4,6,7,8-HpCDD—507.738~6535~7043~58—1,2,3,4,6,7,8-HpCDF—506.345~5641~6145~55—1,2,3,4,7,8,9-HpCDF—508.143~6339~6943~58—OCDD—1001989~12778~14479~126—PCDD/FsOCDF—1002774~14663~17063~159—13C12-2,3,7,8-TCDD——————25~16413C12-2,3,7,8-TCDF——————24~16913C12-1,2,3,7,8-PeCDD——————25~18113C12-1,2,3,7,8-PeCDF——————24~18513C12-2,3,4,7,8-PeCDF——————21~17813C12-1,2,3,4,7,8-HxCDD——————32~14113C12-1,2,3,6,7,8-HxCDD——————28~13013C12-1,2,3,4,7,8-HxCDF——————26~15213C12-1,2,3,6,7,8-HxCDF——————26~12313C12-1,2,3,7,8,9-HxCDF——————29~14713C12-2,3,4,7,8,9-HxCDF——————28~13613C12-1,2,3,4,6,7,8-HpCDD——————23~14013C12-1,2,3,4,6,7,8-HpCDF——————28~14313C12-1,2,3,4,7,8,9-HpCDF——————26~13813C12-OCDD——————17~15737Cl4-2,3,7,8-TCDD——————35~19734 GB5009.205—2013表C.2（续）IPR样品中同aOPRIUPAC测试浓度bcVER位素内标化合物SXμg/L代码μg/Lμg/L的回收率μg/Lμg/L%3,3",4,4"-TePCB77502030~7025~7535~65—3,4,4",5-TePCB81502030~7025~7535~65—2,3,3",4,4"-PePCB105502030~7025~7535~65—2,3,4,4",5-PePCB114502030~7025~7535~65—2,3",4,4",5-PePCB118502030~7025~7535~65—2",3,4,4",5-PePCB123502030~7025~7535~65—3,3",4,4",5-PePCB126502030~7025~7535~65—2,2",4,4",6,6"-HxPCB156502030~7025~7535~65—52,3,3",4,4",5"-HxPCB157502030~7025~7535~65—2,3",4,4",5,5"-HxPCB167502030~7025~7535~65—3,3",4,4",5,5"-HxPCB169502030~7025~7535~65—2,2",3,4",5,6,6"-HPCB189502030~7025~7535~65—13C12-3,3",4,4"-TPCB77L—————25~15013PCBsC12-3,4,4",5-TePCB81L—————25~15013C12-2,3,3",4,4"-PePCB105L—————25~15013C12-2,3,4,4",5-PePCB114L—————25~15013C12-2,3",4,4",5-PePCB118L—————25~15013C12-2",3,4,4",5-PePCB123L—————25~15013C12-3,3",4,4",5-PePCB126L—————25~15013C12-2,2",4,4",6,6"-HxPCB156L—————25~150135C12-2,3,3",4,4",5"-HxPCB157L—————25~15013C12-2,3",4,4",5,5"-HxPCB167L—————25~15013C12-3,3",4,4",5,5"-HxPCB169L—————25~15013C12-2,2",3,4",5,6,6"-HPCB189L—————25~15013C12-2,4,4"-TrPCB28L—————30~13513C12-2,3,3",5,5"-PePCB111L—————30~13513C12-2,2",3,3",5,5",6-HPCB178L—————30~135a假设体积为20μL时，最终提取液中的浓度。bS＝浓度的标准偏差。cX＝平均浓度。35 GB5009.205—2013表C.3二噁英及其类似物的时间窗口、m/z精确质量数、m/z类型和元素组成时间窗口及氯取代数m/z精确质量数m/z类型元素组成化合物292.9825锁定kC7F11PFK35303.9016MC12H4Cl4OTCDF3537305.8987M+2C12H4Cl4ClOTCDF1335a315.9419MC12H4Cl4OTCDF133537b317.9389M+2C12H4Cl4ClOTCDFFn-135319.8965MC12H4Cl4O2TCDDCl-43537321.8936M+2C12H4Cl3ClO2TCDD37b327.8846MC12H4Cl4O2TCDD330.9792QCC7F13PFK1335a331.9368MC12H4Cl4O2TCDD133537a333.9339M+2C12H4Cl4ClO2TCDD3537375.8364M+2C12H4Cl5ClOHxCDPE3537339.8597M+2C12H3Cl4ClOPeCDF3537341.8567M+4C12H3Cl3Cl2OPeCDF133537351.9000M+2C12H3Cl4ClOPeCDF133537a353.8970M+4C12H3Cl3Cl2OPeCDFFn-2354.9792锁定kC9F13PFKCl-53537355.8546M+2C12H3Cl4ClO2PeCDD3537357.8516M+4C12H3Cl3Cl2O2PeCDD133537a367.8949M+2C12H3Cl4ClO2PeCDD133537a369.8919M+4C12H3Cl3Cl2O2PeCDD3537409.7974M+2C12H3Cl6ClOHpCDPE3537373.8208M+2C12H2Cl5ClO2HxCDF3537375.8178M+4C12H2Cl4Cl2OHxCDF1335a383.8639MC12H2Cl6OHxCDF133537aPCDD/Fs385.8610M+2C12H2Cl5ClOHxCDF3537389.8157M+2C12H2Cl5ClO2HxCDDFn-33537391.8127M+4C12H3Cl4Cl2O2HxCDDCl-6392.9760锁定kC9F15PFK133537a401.8559M+2C12H2Cl5ClOHxCDD133537a403.8520M+4C12H2Cl4Cl2O2HxCDD430.9729QCC9F17PFK3537445.7555M+4C12H2Cl6Cl2OOCDPE3537407.7848M+2C12HCl6ClOHpCDF3537409.7789M+4C12HCl5Cl2OHpCDF1335a417.8253MC12HCl7OHpCDF133537a419.8220M+2C12HCl6ClOHpCDF3537Fn-4423.7766M+2C12HCl6ClO2HpCDD3537Cl-7425.7737M+4C12HCl5Cl2O2HpCDD430.9729锁定kC8F17PFK133537a435.8169M+2C12HCl6ClO2HpCDD133537a437.8140M+4C12HCl5Cl2O2HpCDD3537479.7165M+4C12HCl7Cl2ONCDPE3537441.7428M+2C12HCl7ClOOCDF442.9728锁定kC10F17PFK3537443.7399M+4C12Cl6Cl2OOCDFFn-53537457.7377M+2C12Cl7ClO2OCDDCl-83537459.7348M+4C12Cl6Cl2O2OCDD133537a469.7779M+2C12Cl7ClO2OCDD133537a471.7750M+4C12Cl6Cl2O2OCDD3537513.6775M+4C12Cl8Cl2ODCDPE36 GB5009.205—2013表C.3（续）时间窗口及氯取代数m/z精确质量数m/z类型元素组成化合物35255.9613MC12H7Cl3Cl-3PCB3537257.9584M+2C12H7Cl2ClCl-3PCB3537259.9554M+4C12H7ClCl2Cl-3PCB133513268.0016MC12H7Cl3C12Cl-3PCB13353713269.9986M+2C12H7Cl2ClC12Cl-3PCBFn-1280.9825锁定kC6H11PFKCl-3,4,535289.9224MC12H6Cl4Cl-4PCB3537291.9194M+2C12H6Cl3ClCl-4PCB3537293.9165M+4C12H6Cl2Cl2Cl-4PCB133513301.9626MC12H6Cl4C12Cl-4PCB13353713303.9597M+2C12H6Cl3ClC12Cl-4PCB35289.9224MC12H6Cl4Cl-4PCB3537291.9194M+2C12H6Cl3ClCl-4PCB3537293.9165M+4C12H6Cl2Cl2Cl-4PCB133513301.9626MC12H6Cl4C12Cl-4PCB13353713303.9597M+2C12H6Cl3ClC12Cl-4PCB35323.8834MC12H5Cl5Cl-5PCB3537325.8804M+2C12H5Cl4ClCl-5PCB3537Fn-2327.8775M+4C12H5Cl3Cl2Cl-5PCBCl-4,5,6330.9792锁定kC7H15PFK13353713337.9207M+2C12H5Cl4ClC12Cl-5PCB13353713339.9178M+4C12H5Cl3Cl2C12Cl-5PCB133537359.8415M+2C12H4Cl5ClCl-6PCB133537361.8385M+4C12H4Cl4Cl2Cl-6PCB133537363.8356M+6C12H4Cl3Cl3Cl-6PCB13353713371.8817M+2C12H4Cl5ClC12Cl-6PCBPCBs13353713373.8788M+4C12H4Cl4Cl2C12Cl-6PCB35323.8834MC12H5Cl5Cl-5PCB3537325.8804M+2C12H5Cl4ClCl-5PCB3537327.8775M+4C12H5Cl3Cl2Cl-5PCB13353713337.9207M+2C12H5Cl4ClC12Cl-5PCB13353713339.9178M+4C12H5Cl3Cl2C12Cl-5PCB354.9792锁定kC9H13PFK133537359.8415M+2C12H4Cl5ClCl-6PCB133537361.8385M+4C12H4Cl4Cl2Cl-6PCBFn-3133537Cl-5,6,7363.8356M+6C12H4Cl3Cl2Cl-6PCB13353713371.8817M+2C12H4Cl5ClC12Cl-6PCB13353713373.8788M+4C12H4Cl4Cl2C12Cl-6PCB3537393.8025M+2C12H3Cl6ClCl-7PCB3537395.7995M+4C12H3Cl5Cl2Cl-7PCB3537397.7966M+6C12H3Cl4Cl3Cl-7PCB13353713405.8428M+2C12H3Cl6ClC12Cl-7PCB13353713407.8398M+4C12H3Cl5Cl2C12Cl-7PCB454.9728QCC11F17PFK3537393.8025M+2C12H3Cl6ClCl-7PCB3537395.7995M+4C12H3Cl5Cl2Cl-7PCB3537397.7966M+6C12H3Cl4Cl3Cl-7PCB13353713Fn-4405.8428M+2C12H3Cl6ClC12Cl-7PCB13353713Cl-7,8,9,10407.8398M+4C12H3Cl5Cl2C12Cl-7PCB3537427.7635M+2C12H2Cl7ClCl-8PCB3537429.7606M+4C12H2Cl6Cl2Cl-8PCB3537431.7576M+6C12H2Cl5Cl3Cl-8PCB37 GB5009.205—2013表C.3（续）时间窗口及氯取代数m/z精确质量数m/z类型元素组成化合物13353713439.8038M+2C12H2Cl7ClC12Cl-8PCB13353713441.8008M+4C12H2Cl6Cl2C12Cl-8PCB442.9728QCC10F13PFK454.9728锁定kC11F13PFK3537461.7246M+2C12H1Cl8ClCl-9PCB3537463.7216M+4C12H1Cl7Cl2Cl-9PCB3537465.7187M+6C12H1Cl6Cl3Cl-9PCBPCBsFn-41335371313Cl-7,8,9,10473.7648M+2C12H1Cl8ClCCl-9PCB1335371313475.7619M+4C12H1Cl7Cl2CCl-9PCB133537495.6856M+2C12Cl9ClCl-10PCB3537499.6797M+4C12Cl7Cl3Cl-10PCB3537501.6767M+6C12Cl6Cl4Cl-10PCB13353713507.7258M+2C12Cl9ClC12Cl-10PCB13353713509.7229M+4C12Cl8Cl2C12Cl-10PCB13353713511.7199M+6C12Cl7Cl3C12Cl-10PCB351337注1：原子核质量：H＝1.007825、O＝15.994915、C＝12.00000、Cl＝34.968853、C＝13.003355、Cl＝36.995903、F＝18.9984。注2：HxCDPE表示六氯代苯并醚；HpCDPE表示七氯代二苯并醚；DCDPE表示八氯代苯并醚；NCDPE表示九氯代苯并醚；OCDPE表示十氯代苯并醚；PFK表示全氟煤油；TrCB表示三氯联苯；TePCB表示四氯联苯；PePCB表示五氯联苯；HxPCB表示六氯联苯；HPCB表示七氯联苯；OcCB表示八氯联苯；NoCB表示九氯联苯；DeCB表示十氯联。a同位素标记化合物。b37内标Cl4－2,3,7,8－TCDD只有一个m/z。表C.4二噁英及其类似物的理论离子丰度比和QC限值aQC限值氯原子数m/z构成比理论比值低高b4M/(M+2)0.770.650.895(M+2)/(M+4)1.551.321.786(M+2)/(M+4)1.241.051.43cPCDD/Fs6M/(M+2)0.510.430.597(M+2)/(M+4)1.050.881.20d7M/(M+2)0.440.370.518(M+2)/(M+4)0.890.761.021M/(M+2)3.132.663.602M/(M+2)1.561.331.793M/(M+2)1.040.881.204M/(M+2)0.770.650.895(M+2)/(M+4)1.551.321.78PCBs6(M+2)/(M+4)1.241.051.437(M+2)/(M+4)1.050.891.218(M+2)/(M+4)0.890.761.029(M+2)/(M+4)0.770.650.8910(M+2)/(M+4)0.690.590.79aQC限为理论离子丰度±15％。b37Cl4-2,3,7,8-TCDD(净化标准)不适用。c13只用于C12-HxCDF。d13只用于C12-HpCDF。38 GB5009.205—2013附录D索氏提取装置及分析流程图图D.1～图D.5介绍了索氏提取装置，规定了食品中PCDD/Fs和DL-PCBs的分析流程。表D.1规定了全自动样品净化系统洗脱程序。图D.6～图D.19为各化合物的色谱图。图D.1索氏提取装置39 GB5009.205—2013试样准备油脂抽提（索氏提取）浓缩脂肪称重可以不加净化内标称完后溶于100mL己烷中13加入C标记净化内标（20µL）色谱法净化酸化硅胶可多次使用例如:酸化硅胶去脂，复合硅胶柱，氧化铝柱1，氧化铝柱2浓缩旋转蒸发器浓缩转移氮气流下，转移至尖底瓶中加入少量壬烷浓缩在70°C下，通入氮气，浓缩至适量加入标记的回收内标加标加入适量回收率内标HRGC/HRMS-分析图D.2食品中PCDD/Fs和DL-PCBs的分析流程40 GB5009.205—20132gNa2SO42g硅胶5g硝酸银硅胶2g硅胶10g酸化硅胶2g硅胶5g碱化硅胶2g硅胶玻璃棉淋洗150mL正己烷转移将提取物转移出去，并充分浓缩。使用5mL正己烷冲洗烧瓶2次洗脱洗脱PCDD/Fs:用350mL正己烷洗PCDD/Fs和PCBs:用400mL脱，并冲洗烧瓶正己烷洗脱，并冲洗烧瓶加入5μL正辛烷，在旋转蒸发器浓缩。图D.3混合硅胶柱净化流程图41 GB5009.205—2013图D.4氧化铝柱净化流程图42 样品GB5009.205—2013S1多层硅胶柱S2S3氧化铝柱F1F2S4S5F6活性炭柱F3F4F5S6S——洗脱溶剂；S1——正己烷；S2——二氯甲烷:正己烷(2:98)；S3——二氯甲烷:正己烷(50:50)；S4——50%乙酸乙酯:甲苯；S5——正己烷；S6——甲苯；F——洗脱液；F1——弃去；F2~F5——组份DL-PCBs；F6——组份PCDD/Fs。图D.5全自动样品净化系统洗脱过程和净化分离程序43 GB5009.205—2013表D.1全自动样品净化系统洗脱程序表体积流速步骤洗脱液阀门位置目的目标化合物mLmL/min1正己烷201001122006润湿多层硅胶柱—2正己烷101001222006冲洗旁路—3正己烷121001212006润湿氧化铝柱—4正己烷201001221226润湿活性炭柱—5正己烷1001001122006活化多层硅胶柱—6甲苯121005222006更换溶剂为甲苯—7甲苯401005221226活化活性炭柱—8乙酸乙酯:甲苯121004222006更换溶剂为乙酸乙酯:甲苯—（50：50）（50：50）9乙酸乙酯:甲苯101004221226活化活性炭柱—（50：50）10二氯甲烷/正己烷121003222006更换溶剂为二氯甲烷:正己烷—（50：50）（50：50）11二氯甲烷:正己烷201003221226活化活性炭柱—（50：50）12正己烷121001222006更换溶剂为正己烷—13正己烷301001221226活化活性炭柱—14—14506112006加入样品提取液—15正己烷901001112006淋洗多层硅胶柱—16二氯甲烷:正己烷121202222006更换溶剂为二氯甲烷:正己烷—（2：98）（2：98）17二氯甲烷:正己烷601002212002淋洗氧化铝柱收集PCB（2：98）18二氯甲烷:正己烷121003222002更换溶剂为二氯甲烷:正己烷收集PCB（50：50）（50：50）19二氯甲烷:正己烷120703211222淋洗氧化铝柱收集PCB（50：50）20乙酸乙酯:甲苯121004222002更换溶剂为乙酸乙酯:甲苯收集PCB（50：50）（50：50）21乙酸乙酯:甲苯161004221222淋洗活性炭柱收集PCB（50：50）22正己烷121001222002更换溶剂为正己烷收集PCB23正己烷101001221222淋洗活性炭柱收集PCB24甲苯121005222002更换溶剂为甲苯收集PCB25甲苯90505221111反向淋洗活性炭柱收集PCDD/Fs44 GB5009.205—2013图D.62,3,7,8-TCDD分离度检查色谱图图D.7PCDD/Fs时间窗口划分的总离子流图45 GB5009.205—2013图D.8四氯取代PCDD/Fs化合物（TCDD/Fs）色谱图图D.9五氯取代PCDD/Fs化合物色谱图（PeCDD/Fs）46 GB5009.205—2013图D.10六氯取代PCDD/Fs化合物色谱图（HxCDD/Fs）图D.11七氯取代PCDD/Fs化合物色谱图（HxCDD/Fs）47 GB5009.205—2013图D.12八氯取代PCDD/Fs化合物（OCDD/OCDF）的总离子流图图D.13DL-PCBs化合物时间窗口划分的总离子流图48 GB5009.205—2013图D.14三氯取代的DL-PCBs化合物色谱图图D.15四氯取代的DL-PCBs化合物色谱图49 GB5009.205—2013图D.16五氯取代的DL-PCBs化合物色谱图图D.17六氯取代的DL-PCBs化合物色谱图50 GB5009.205—2013图D.18七氯取代的DL-PCBs化合物色谱图图D.19八氯取代的DL-PCBs化合物色谱图51 GB5009.205—2013附录E精密度本附录精密度数据是按照GB/T6379的规定获得重复性和再现性的数值。表E.1EDF2526鱼样品中PCDD/Fs室间重现性和再现性均值重复性限r再现性限R化合物重现性Sr再现性SRng/gng/gng/g2,3,7,8-TeCDD0.020540.000480.000670.0013460.0018811,2,3,7,8-PeCDD0.040010.001310.001010.0036790.0028191,2,3,4,7,8-HxCDD0.055930.001740.002920.0048820.0081621,2,3,6,7,8-HxCDD0.056340.002210.002360.0061880.0065991,2,3,7,8,9-HxCDD0.057270.002200.004760.0061610.0133271,2,3,4,6,7,8-HpCDD0.06840.005330.006800.014920.01905OCDD0.18480.009560.0090.026780.024392,3,7,8-TeCDF0.021190.002140.002470.005990.006911,2,3,7,8-PeCDF0.044010.003570.002840.01000.007962,3,4,7,8-PeCDF0.040850.001130.001020.00320.002861,2,3,4,7,8-HxCDF0.08570.001630.002340.00460.006551,2,3,6,7,8-HxCDF0.06400.002600.003600.007280.010091,2,3,7,8,9-HxCDF0.05640.002680.00370.007510.010252,3,4,6,7,8-HxCDF0.05970.005020.00400.014060.011211,2,3,4,6,7,8-HpCDF0.09080.004470.00600.012500.01691,2,3,4,7,8,9-HpCDF0.08060.004090.004940.01150.01382OCDF0.19550.019660.02260.05510.06331PCDD/Fs毒性当量浓度0.13130.002670.00230.01770.00652表E.2标准参考物（CARP样品）PCDD/Fs室间重现性和再现性结果均值重复性限r再现性限R化合物重现性Sr再现性SRng/gng/gng/g2,3,7,8-TeCDD0.006810.001680.001410.0047100.0039611,2,3,7,8-PeCDD0.003950.000720.000920.0020280.0025721,2,3,4,7,8-HxCDD0.001750.000410.000360.0011440.0010121,2,3,6,7,8-HxCDD0.005190.000850.001510.0023760.0042381,2,3,7,8,9-HxCDD0.000550.000170.000330.0004760.0009381,2,3,4,6,7,8-HpCDD0.006290.001210.001610.003390.00451OCDD0.007330.001920.001890.005390.005282,3,7,8-TeCDF0.013300.002150.004580.006010.012831,2,3,7,8-PeCDF0.005320.000810.001790.002260.005022,3,4,7,8-PeCDF0.015110.004650.004930.013010.013811,2,3,4,7,8-HxCDF0.003160.000700.000660.00200.001841,2,3,6,7,8-HxCDF0.002340.000440.000600.001240.001681,2,3,7,8,9-HxCDF0.000810.000730.001050.002060.002942,3,4,6,7,8-HxCDF0.001130.000280.000720.000770.002011,2,3,4,6,7,8-HpCDF0.004450.001150.001060.003220.002971,2,3,4,7,8,9-HpCDF0.000250.000240.000460.000680.00128OCDF0.000590.000570.00100.001600.00280PCDD/Fs毒性当量浓度0.021500.000350.00350.000990.0098552 GB5009.205—2013表E.3EDF2526鱼样品中DL-PCBs化合物的室间重现性和再现性均值重复性限r再现性限R化合物重现性Sr再现性SRng/gng/gng/gPCB770.54440.014970.010850.041910.03037PCB1260.50520.006230.010700.017440.02996PCB1690.54300.011960.034690.033480.09713PCB810.00780.000640.003710.001790.01040PCB1050.14110.004250.004620.011900.01293PCB1140.01600.001220.001210.003410.00337PCB1180.42830.008680.027350.024300.07659PCB1230.054620.003470.009810.009710.02748PCB1560.035610.001190.003750.00330.01050PCB1570.008150.000950.000750.00270.00209PCB1670.02010.001480.003900.00420.01092PCB1890.00500.000270.001140.000760.00319TEQ0.05610.000740.00130.002060.00352表E.4EDF2524鱼样品中DL-PCBs化合物的室间重现性和再现性均值重复性限r再现性限R化合物重现性Sr再现性SRng/gng/gng/gPCB770.009340.000990.002780.0027770.007780PCB1260.001980.000430.000750.0011950.002106PCB1690.000570.000090.000140.0002620.000392PCB810.000620.000090.000480.0002500.001358PCB1050.304040.012380.011500.0346700.032209PCB1140.02090.002080.002240.005820.006266PCB1180.74530.030810.033920.086270.09499PCB1230.120980.015540.015490.043520.04337PCB1560.073670.006870.007720.01920.02163PCB1570.019950.001440.001980.00400.00556PCB1670.03070.003290.009370.00920.02625PCB1890.00690.001040.001240.002900.00348TEQ0.00040.000050.00010.000140.0001853'