GB5009.168-2016食品安全国家标准食品中脂肪酸的测定.pdf 22页

'中华人民共和国国家标准GB5009.168—2016食品安全国家标准食品中脂肪酸的测定2016-12-23发布2017-06-23实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会发布国家食品药品监督管理总局 GB5009.168—2016前言本标准代替GB/T5009.168—2003《食品中二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸的测定》、GB/T22223—2008《食品中总脂肪、饱和脂肪(酸)、不饱和脂肪(酸)的测定水解提取-气相色谱法》、GB5413.27—2010《食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中脂肪酸的测定》、GB/T9695.2—2008《肉与肉制品脂肪酸测定》、GB/T17376—2008《动植物油脂脂肪酸甲酯制备》、GB/T17377—2008《动植物油脂脂肪酸甲酯的气相色谱分析》、SN/T2922—2011《出口食品中EPA和DHA的测定气相色谱法》、NY/T91—1988《油菜籽中油的芥酸的测定气相色谱法》。本标准与GB/T5009.168—2003相比,主要变化如下:———标准名称修改为“食品安全国家标准食品中脂肪酸的测定”;———增加了内标法和归一化法;———修改了原标准中的色谱柱,将玻璃柱改为毛细管色谱柱。Ⅰ GB5009.168—2016食品安全国家标准食品中脂肪酸的测定1范围本标准规定了食品中脂肪酸含量的测定方法。本标准适用于食品中总脂肪、饱和脂肪(酸)、不饱和脂肪(酸)的测定。本标准中水解-提取法适用于食品中脂肪酸含量的测定;酯交换法适用于游离脂肪酸含量不大于2%的油脂样品的脂肪酸含量测定;乙酰氯-甲醇法适用于含水量小于5%的乳粉和无水奶油样品的脂肪酸含量测定。第一法内标法2原理2.1水解-提取法:加入内标物的试样经水解-乙醚溶液提取其中的脂肪后,在碱性条件下皂化和甲酯化,生成脂肪酸甲酯,经毛细管柱气相色谱分析,内标法定量测定脂肪酸甲酯含量。依据各种脂肪酸甲酯含量和转换系数计算出总脂肪、饱和脂肪(酸)、单不饱和脂肪(酸)、多不饱和脂肪(酸)含量。动植物油脂试样不经脂肪提取,加入内标物后直接进行皂化和脂肪酸甲酯化。2.2酯交换法(适用于游离脂肪酸含量不大于2%的油脂):将油脂溶解在异辛烷中,加入内标物后,加入氢氧化钾甲醇溶液通过酯交换甲酯化,反应完全后,用硫酸氢钠中和剩余氢氧化钾,以避免甲酯皂化。3试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。3.1试剂3.1.1盐酸(HCl)。3.1.2氨水(NH3·H2O)。3.1.3焦性没食子酸(C6H6O3)。3.1.4乙醚(C4H10O)。3.1.5石油醚:沸程30℃~60℃。3.1.6乙醇(C2H6O)(95%)。3.1.7甲醇(CH3OH):色谱纯。3.1.8氢氧化钠(NaOH)。3.1.9正庚烷[CH3(CH2)5CH3]:色谱纯。3.1.10三氟化硼甲醇溶液,浓度为15%。3.1.11无水硫酸钠(Na2SO4)。3.1.12氯化钠(NaCl)。1 GB5009.168—20163.1.13异辛烷[(CH3)2CHCH2C(CH3)3]:色谱纯。3.1.14硫酸氢钠(NaHSO4)。3.1.15氢氧化钾(KOH)。3.2试剂配制3.2.1盐酸溶液(8.3mol/L):量取250mL盐酸,用110mL水稀释,混匀,室温下可放置2个月。3.2.2乙醚-石油醚混合液(1+1):取等体积的乙醚和石油醚,混匀备用。3.2.3氢氧化钠甲醇溶液(2%):取2g氢氧化钠溶解在100mL甲醇中,混匀。3.2.4饱和氯化钠溶液:称取360g氯化钠溶解于1.0L水中,搅拌溶解,澄清备用。3.2.5氢氧化钾甲醇溶液(2mol/L):将13.1g氢氧化钾溶于100mL无水甲醇中,可轻微加热,加入无水硫酸钠干燥,过滤,即得澄清溶液。3.3标准品3.3.1十一碳酸甘油三酯(C36H68O6,CAS号:13552-80-2)。3.3.2混合脂肪酸甲酯标准品。3.3.3单个脂肪酸甲酯标准品:见附录A。3.4标准溶液配制3.4.1十一碳酸甘油三酯内标溶液(5.00mg/mL):准确称取2.5g(精确至0.1mg)十一碳酸甘油三酯至烧杯中,加入甲醇溶解,移入500mL容量瓶后用甲醇定容,在冰箱中冷藏可保存1个月。3.4.2混合脂肪酸甲酯标准溶液:取出适量脂肪酸甲酯混合标准移至到10mL容量瓶中,用正庚烷稀释定容,贮存于-10℃以下冰箱,有效期3个月。3.4.3单个脂肪酸甲酯标准溶液:将单个脂肪酸甲酯分别从安瓿瓶中取出转移到10mL容量瓶中,用正庚烷冲洗安瓿瓶,再用正庚烷定容,分别得到不同脂肪酸甲酯的单标溶液,贮存于-10℃以下冰箱,有效期3个月。4仪器设备4.1匀浆机或实验室用组织粉碎机或研磨机。4.2气相色谱仪:具有氢火焰离子检测器(FID)。4.3毛细管色谱柱:聚二氰丙基硅氧烷强极性固定相,柱长100m,内径0.25mm,膜厚0.2μm。4.4恒温水浴:控温范围40℃~100℃,控温±1℃。4.5分析天平:感量0.1mg。4.6旋转蒸发仪。5分析步骤5.1试样的制备在采样和制备过程中,应避免试样污染。固体或半固体试样使用组织粉碎机或研磨机粉碎,液体试样用匀浆机打成匀浆于-18℃以下冷冻保存,分析用时将其解冻后使用。2 GB5009.168—20165.2试样前处理5.2.1水解-提取法5.2.1.1试样的称取称取均匀试样0.1g~10g(精确至0.1mg,约含脂肪100mg~200mg)移入到250mL平底烧瓶中,准确加入2.0mL十一碳酸甘油三酯内标溶液。加入约100mg焦性没食子酸,加入几粒沸石,再加入2mL95%乙醇和4mL水,混匀。根据试样的类别选取相应的水解方法,乳制品采用碱水解法;乳酪采用酸碱水解法;动植物油脂直接进行步骤5.2.1.4;其余食品采用酸水解法。注:根据实际工作需要选择内标,对于组分不确定的试样,第一次检测时不应加内标物。观察在内标物峰位置处是否有干扰峰出现,如果存在,可依次选择十三碳酸甘油三酯或十九碳酸甘油三酯或二十三碳酸甘油三酯作为内标。5.2.1.2试样的水解酸水解法:食品(除乳制品和乳酪):加入盐酸溶液10mL,混匀。将烧瓶放入70℃~80℃水浴中水解40min。每隔10min振荡一下烧瓶,使黏附在烧瓶壁上的颗粒物混入溶液中。水解完成后,取出烧瓶冷却至室温。碱水解法:乳制品(乳粉及液态乳等试样):加入氨水5mL,混匀。将烧瓶放入70℃~80℃水浴中水解20min。每5min振荡一下烧瓶,使黏附在烧瓶壁上的颗粒物混入溶液中。水解完成后,取出烧瓶冷却至室温。酸碱水解法:乳酪:加入氨水5mL,混匀。将烧瓶放入70℃~80℃水浴中水解20min。每隔10min振荡一下烧瓶,使黏附在烧瓶壁上的颗粒物混入溶液中。接着加入盐酸10mL,继续水解20min,每10min振荡一下烧瓶,使黏附在烧瓶壁上的颗粒物混入溶液中。水解完成后,取出烧瓶冷却至室温。5.2.1.3脂肪提取水解后的试样,加入10mL95%乙醇,混匀。将烧瓶中的水解液转移到分液漏斗中,用50mL乙醚石油醚混合液冲洗烧瓶和塞子,冲洗液并入分液漏斗中,加盖。振摇5min,静置10min。将醚层提取液收集到250mL烧瓶中。按照以上步骤重复提取水解液3次,最后用乙醚石油醚混合液冲洗分液漏斗,并收集到250mL烧瓶中。旋转蒸发仪浓缩至干,残留物为脂肪提取物。5.2.1.4脂肪的皂化和脂肪酸的甲酯化在脂肪提取物中加入2%氢氧化钠甲醇溶液8mL,连接回流冷凝器,80℃±1℃水浴上回流,直至油滴消失。从回流冷凝器上端加入7mL15%三氟化硼甲醇溶液,在80℃±1℃水浴中继续回流2min。用少量水冲洗回流冷凝器。停止加热,从水浴上取下烧瓶,迅速冷却至室温。准确加入10mL~30mL正庚烷,振摇2min,再加入饱和氯化钠水溶液,静置分层。吸取上层正庚烷提取溶液大约5mL,至25mL试管中,加入大约3g~5g无水硫酸钠,振摇1min,静置5min,吸取上层溶液到进样瓶中待测定。5.2.2酯交换法适用于游离脂肪酸含量不大于2%的油脂样品。5.2.2.1试样称取称取试样60.0mg至具塞试管中,精确至0.1mg,准确加入2.0mL内标溶液。3 GB5009.168—20165.2.2.2甲酯制备加入4mL异辛烷溶解试样,必要时可以微热使试样溶解后加入200μL氢氧化钾甲醇溶液,盖上玻璃塞猛烈振摇30s后静置至澄清。加入约1g硫酸氢钠,猛烈振摇,中和氢氧化钾。待盐沉淀后,将上层溶液移至上机瓶中,待测。5.3测定5.3.1色谱参考条件取单个脂肪酸甲酯标准溶液和脂肪酸甲酯混合标准溶液分别注入气相色谱仪,对色谱峰进行定性。脂肪酸甲酯混合标准溶液气相色谱图,见附录B。a)毛细管色谱柱:聚二氰丙基硅氧烷强极性固定相,柱长100m,内径0.25mm,膜厚0.2μm。b)进样器温度:270℃。c)检测器温度:280℃。d)程序升温:初始温度100℃,持续13min;100℃~180℃,升温速率10℃/min,保持6min;180℃~200℃,升温速率1℃/min,保持20min;200℃~230℃,升温速率4℃/min,保持10.5min。e)载气:氮气。f)分流比:100∶1。g)进样体积:1.0μL。h)检测条件应满足理论塔板数(n)至少2000/m,分离度(R)至少1.25。5.3.2试样测定5.3.2.1试样溶液的测定在上述色谱条件下将脂肪酸标准测定液及试样测定液分别注入气相色谱仪,以色谱峰峰面积定量。6分析结果的表述6.1试样中单个脂肪酸甲酯含量试样中单个脂肪酸甲酯含量按式(1)计算:AiρC11×VC11×1.0067Xi=Fi×××100………………………(1)AC11m式中:Xi———试样中脂肪酸甲酯i含量,单位为克每百克(g/100g);Fi———脂肪酸甲酯i的响应因子;Ai———试样中脂肪酸甲酯i的峰面积;AC11———试样中加入的内标物十一碳酸甲酯峰面积;———十一碳酸甘油三酯浓度,单位为毫克每毫升(mg/mL);ρC11VC11———试样中加入十一碳酸甘油三酯体积,单位为毫升(mL);1.0067———十一碳酸甘油三酯转化成十一碳酸甲酯的转换系数;m———试样的质量,单位为毫克(mg);100———将含量转换为每100g试样中含量的系数。4 GB5009.168—2016脂肪酸甲酯i的响应因子Fi按式(2)计算:ρSi×A11Fi=…………………………(2)ASi×ρ11式中:Fi———脂肪酸甲酯i的响应因子;———混标中各脂肪酸甲酯i的浓度,单位为毫克每毫升(mg/mL);ρSiA11———十一碳酸甲酯峰面积;ASi———脂肪酸甲酯i的峰面积;———混标中十一碳酸甲酯浓度,单位为毫克每毫升(mg/mL)。ρ116.2试样中饱和脂肪(酸)含量试样中饱和脂肪(酸)含量按式(3)计算,试样中单饱和脂肪酸含量按式(4)计算:XSaturatedFat=∑XSFAi…………………………(3)XSFAi=XFAMEi×FFAMEi-FAi…………………………(4)式中:XSaturatedFat———饱和脂肪(酸)含量,单位为克每百克(g/100g);XSFAi———单饱和脂肪酸含量,单位为克每百克(g/100g);XFAMEi———单饱和脂肪酸甲酯含量,单位为克每百克(g/100g);FFAMEi-FAi———脂肪酸甲酯转化成脂肪酸的系数。脂肪酸甲酯转换为脂肪酸的转换系数FFAMEi-FAi参见附录D。脂肪酸甲酯i转化成为脂肪酸的系数按照式(5)计算:MFAiFFAMEi-FAi=…………………………(5)MFAMEi式中:FFAMEi-FAi———脂肪酸甲酯转化成脂肪酸的转换系数;MFAi———脂肪酸i的分子质量;MFAMEi———脂肪酸甲酯i的分子质量。6.3试样中单不饱和脂肪(酸)含量试样中单不饱和脂肪(酸)含量(XMono-UnsaturatedFat)按式(6)计算,试样中每种单不饱和脂肪酸甲酯含量按式(7)计算:XMono-UnsaturatedFat=∑XMUFAi…………………………(6)XMUFAi=XFAMEi×FFAMEi-FAi…………………………(7)式中:XMono-UnsaturatedFat———试样中单不饱和脂肪(酸)含量,单位为克每百克(g/100g);XMUFAi———试样中每种单不饱和脂肪酸含量,单位为克每百克(g/100g);XFAMEi———每种单不饱和脂肪酸甲酯含量,单位为克每百克(g/100g);FFAMEi-FAi———脂肪酸甲酯i转化成脂肪酸的系数。脂肪酸甲酯转化成脂肪酸的系数FFAMEi-FAi参见附录D。6.4试样中多不饱和脂肪(酸)含量试样中多不饱和脂肪(酸)含量(XPoly-UnsaturatedFat)按式(8)计算,单个多不饱和脂肪酸含量按式(9)计算:5 GB5009.168—2016XPoly-UnsaturatedFat=∑XPUFAi…………………………(8)XPUFAi=XFAMEi×FFAMEi-FAi…………………………(9)式中:XPoly-UnsaturatedFat———试样中多不饱和脂肪(酸)含量,单位为克每百克(g/100g);XPUFAi———试样中单个多不饱和脂肪酸含量,单位为克每百克(g/100g);XFAMEi———单个多不饱和脂肪酸甲酯含量,单位为克每百克(g/100g);FFAMEi-FAi———脂肪酸甲酯转化成脂肪酸的系数。脂肪酸甲酯转化成脂肪酸的系数FFAMEi-FAi参见附录D。6.5试样中总脂肪含量试样中总脂肪含量按式(10)计算:XTotalFat=∑Xi×FFAMEi-TGi…………………………(10)式中:XTotalFat———试样中总脂肪含量,单位为克每百克(g/100g);Xi———试样中单个脂肪酸甲酯i含量,单位为克每百克(g/100g);FFAMEi-TGi———脂肪酸甲酯i转化成甘油三酯的系数。各种脂肪酸甲酯转化成甘油三酯的系数参见附录D。脂肪酸甲酯i转化成为脂肪酸甘油三酯的系数按式(11)计算:1MTGi×3FFAMEi-TGi=…………………………(11)MFAMEi式中:FFAMEi-TGi———脂肪酸甲酯i转化成为脂肪酸甘油三酯的系数;MTGi———脂肪酸甘油三酯i的分子质量;MFAMEi———脂肪酸甲酯i的分子质量。结果保留3位有效数字。第二法外标法7原理7.1水解-提取法:试样经水解-乙醚溶液提取其中的脂肪后,在碱性条件下皂化和甲酯化,生成脂肪酸甲酯,经毛细管柱气相色谱分析,外标法定量测定脂肪酸的含量。动植物纯油脂试样不经脂肪提取,直接进行皂化和脂肪酸甲酯化。7.2乙酰氯-甲醇法(适用于含水量小于5%的乳粉和无水奶油试样):乙酰氯与甲醇反应得到的盐酸-甲醇使其中的脂肪和游离脂肪酸甲酯化,用甲苯提取后,经气相色谱仪分离检测,外标法定量。7.3酯交换法(适用于游离脂肪酸含量不大于2%的油脂):将油脂溶解在异辛烷中,加入氢氧化钾甲醇溶液通过酯交换甲酯化,反应完全后,用硫酸氢钠中和剩余氢氧化钾,外标法定量测定脂肪酸的含量。8试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。6 GB5009.168—20168.1试剂8.1.1盐酸(HCl)。8.1.2氨水(NH3·H2O)。8.1.3焦性没食子酸(C6H6O3)。8.1.4乙醚(C4H10O)。8.1.5石油醚:沸程30℃~60℃。8.1.6乙醇(C2H6O)(95%)。8.1.7甲醇(CH3OH):色谱纯。8.1.8氢氧化钠(NaOH)。8.1.9正庚烷[CH3(CH2)5CH3]:色谱纯。8.1.10三氟化硼甲醇溶液:浓度为15%。8.1.11无水硫酸钠(Na2SO4)。8.1.12氯化钠(NaCl)。8.1.13无水碳酸钠(Na2CO3)。8.1.14甲苯(C7H8):色谱纯。8.1.15乙酰氯(C2H3ClO)。8.1.16异辛烷[(CH3)2CHCH2C(CH3)3]:色谱纯。8.1.17硫酸氢钠(NaHSO4)。8.1.18氢氧化钾(KOH)。8.2试剂配制8.2.1盐酸溶液(8.3mol/L):同3.2.1。8.2.2乙醚-石油醚混合液(1+1):同3.2.2。8.2.3氢氧化钠甲醇溶液(2%):同3.2.3。8.2.4饱和氯化钠溶液:同3.2.4。8.2.5乙酰氯甲醇溶液(体积分数为10%):量取40mL甲醇于100mL干燥的烧杯中,准确吸取5.0mL乙酰氯逐滴缓慢加入,不断搅拌,冷却至室温后转移并定容至50mL干燥的容量瓶中。临用前配制。注:乙酰氯为刺激性试剂,配制乙酰氯甲醇溶液时应不断搅拌防止喷溅,注意防护。8.2.6碳酸钠溶液(6%):称取6g无水碳酸钠于100mL烧杯中,加水溶解,转移并用水定容至100mL容量瓶中。8.2.7氢氧化钾甲醇溶液(2mol/L):同3.2.5。8.3标准品8.3.1混合脂肪酸甲酯标准:同3.3.2。8.3.2单个脂肪酸甲酯标准:同3.3.3。8.3.3脂肪酸甘油三酯标准品:纯度≥99%。8.4标准溶液配制8.4.1单个脂肪酸甲酯标准溶液:同3.4.3。8.4.2脂肪酸甘油三酯标准工作液:根据试样中所要分析脂肪酸的种类选择相应甘油三酯标准品,用甲苯配制适当浓度的标准工作液,于-10℃以下的冰箱中保存,有效期3个月。7 GB5009.168—20169仪器设备9.1匀浆机或实验室用组织粉碎机或研磨机。9.2气相色谱仪:具有氢火焰离子检测器(FID)。9.3毛细管色谱柱:聚二氰丙基硅氧烷强极性固定相,柱长100m,内径0.25mm,膜厚0.2μm。9.4恒温水浴:控温范围40℃~100℃,控温±1℃。9.5分析天平:感量0.1mg。9.6离心机:转速≥5000r/min。9.7旋转蒸发仪。9.8螺口玻璃管(带有聚四氟乙烯做内垫的螺口盖):15mL。9.9离心管:50mL。10分析步骤10.1试样的制备操作步骤同5.1。10.2试样前处理10.2.1水解-提取法10.2.1.1试样的称取称取均匀试样0.1g~10g(精确至0.1mg,约含脂肪100mg~200mg)移入到250mL平底烧瓶中,加入约100mg焦性没食子酸,加入几粒沸石,再加入2mL95%乙醇,混匀。根据试样的类别选取不同的水解方法。10.2.1.2试样的水解操作步骤同5.2.1.2。10.2.1.3脂肪提取操作步骤同5.2.1.3。10.2.1.4脂肪的皂化和脂肪酸的甲酯化操作步骤同5.2.1.4。动植物油脂试样不经脂肪提取,直接进行皂化和脂肪酸甲酯化(同5.2.1.4)。10.2.2乙酰氯-甲醇法10.2.2.1试样称取准确称取乳粉试样0.5g或无水奶油试样0.2g(均精确到0.1mg)于15mL干燥螺口玻璃管中,加入5.0mL甲苯。8 GB5009.168—201610.2.2.2试样测定液的制备向试样中加入10%乙酰氯甲醇溶液6mL,充氮气后,旋紧螺旋盖。振荡混合后于80℃±1℃水浴中放置2h,期间每隔20min取出振摇1次,水浴后取出冷却至室温。将反应后的样液转移至50mL离心管中,分别用3mL碳酸钠溶液清洗玻璃管3次,合并碳酸钠溶液于50mL离心管中,混匀。5000r/min离心5min。取上清液作为试液,气相色谱仪测定。10.2.3酯交换法10.2.3.1试样称取称取试样60.0mg至具塞试管中,精确至0.1mg。10.2.3.2甲酯制备同5.2.2.2。10.3标准测定液的制备准确吸取脂肪酸甘油三酯标准工作液0.5mL,按5.2.2.2相应步骤进行相同的前处理。10.4色谱测定色谱参考条件同5.3.1。11分析结果的表述11.1试样中各脂肪酸的含量以色谱峰峰面积定量。试样中各脂肪酸的含量按式(12)计算:Ai×mSi×FTGi-FAiXi=×100…………………………(12)ASi×m式中:Xi———试样中各脂肪酸的含量,单位为克每百克(g/100g);Ai———试样测定液中各脂肪酸甲酯的峰面积;mSi———在标准测定液的制备中吸取的脂肪酸甘油三酯标准工作液中所含有的标准品的质量,单位为毫克(mg);FTGi-FAi———各脂肪酸甘油三酯转化为脂肪酸的换算系数,参见附录D;ASi———标准测定液中各脂肪酸的峰面积;m———试样的称样质量,单位为毫克(mg);100———将含量转换为每100g试样中含量的系数。11.2试样中总脂肪酸的含量试样中总脂肪酸的含量按式(13)计算:XTotalFA=∑Xi…………………………(13)式中:XTotalFA———试样中总脂肪酸的含量,单位为克每百克(g/100g);Xi———试样中各脂肪酸的含量,单位为克每百克(g/100g)。结果保留3位有效数字。9 GB5009.168—2016第三法归一化法12原理12.1水解-提取法:试样经水解-乙醚溶液提取其中的脂肪后,在碱性条件下皂化和甲酯化,生成脂肪酸甲酯,经毛细管柱气相色谱分析,面积归一化法定量测定脂肪酸百分含量。动植物油脂试样不经脂肪提取,直接进行皂化和脂肪酸甲酯化。12.2酯交换法(适用于游离脂肪酸含量不大于2%的油脂):将油脂试样溶解在异辛烷中,加入氢氧化钾甲醇溶液通过酯交换甲酯化,反应完全后,用硫酸氢钠中和剩余氢氧化钾,面积归一化法定量测定脂肪酸百分含量。13试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。13.1试剂同3.1。13.2试剂配制同3.2。13.3标准品13.3.1混合脂肪酸甲酯标准溶液:同3.3.2。13.3.2单个脂肪酸甲酯标准:同3.3.3。13.4标准溶液配制单个脂肪酸甲酯标准溶液:同3.4.3。14仪器设备仪器设备同第4章。15分析步骤15.1试样的制备操作步骤同5.1。15.2水解-提取法15.2.1试样的称取称取均匀试样0.1g~10g(精确至0.1mg,约含脂肪100mg~200mg)移入到250mL平底烧瓶中,加入约100mg焦性没食子酸,加入几粒沸石,再加入2mL95%乙醇,混匀。根据试样的类别选取10 GB5009.168—2016不同的水解方法。15.2.2试样的水解操作步骤同5.2.1.2。15.2.3脂肪提取操作步骤同5.2.1.3。15.2.4脂肪的皂化和脂肪酸的甲酯化操作步骤同5.2.1.4。15.2.5色谱测定色谱参考条件同5.3.1。15.3酯交换法15.3.1试样称取称取试样60.0mg至具塞试管中,精确至0.1mg。15.3.2甲酯制备同5.2.2.2。16分析结果的表述试样中某个脂肪酸占总脂肪酸的百分比Yi按式(14)计算,通过测定相应峰面积对所有成分峰面积总和的百分数来计算给定组分i的含量:ASi×FFAMEi-FAiYi=…………………………(14)∑ASi×FFAMEi-FAi式中:Yi———试样中某个脂肪酸占总脂肪酸的百分比,%;ASi———试样测定液中各脂肪酸甲酯的峰面积;FFAMEi-FAi———脂肪酸甲酯i转化成脂肪酸的系数,参见附录D;∑ASi———试样测定液中各脂肪酸甲酯的峰面积之和。结果保留3位有效数字。17精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。18定量限参见附录E。11 GB5009.168—2016附录A单个脂肪酸甲酯标准品的分子式及CAS号单个脂肪酸甲酯标准品的分子式及CAS号见表A.1。表A.1单个脂肪酸甲酯标准品的分子式及CAS号序号脂肪酸甲酯脂肪酸简称分子式CAS号1丁酸甲酯C4:0C5H10O2623-42-72己酸甲酯C6:0C7H14O2106-70-73辛酸甲酯C8:0C9H18O2111-11-54葵酸甲酯C10:0C11H22O2110-42-95十一碳酸甲酯C11:0C12H24O21731-86-86十二碳酸甲酯C12:0C13H26O2111-82-07十三碳酸甲酯C13:0C14H28O21731-88-08十四碳酸甲酯C14:0C15H30O2124-10-79顺-9-十四碳一烯酸甲酯C14:1C15H28O256219-06-810十五碳酸甲酯C15:0C16H32O27132-64-111顺-10-十五碳一烯酸甲酯C15:1C16H30O290176-52-612十六碳酸甲酯C16:0C17H34O2112-39-013顺-9-十六碳一烯酸甲酯C16:1C17H32O21120-25-814十七碳酸甲酯C17:0C18H36O21731-92-615顺-10-十七碳一烯酸甲酯C17:1C18H34O275190-82-816十八碳酸甲酯C18:0C19H38O2112-61-817反-9-十八碳一烯酸甲酯C18:1n9tC19H36O21937-62-818顺-9-十八碳一烯酸甲酯C18:1n9cC19H36O2112-62-919反,反-9,12-十八碳二烯酸甲酯C18:2n6tC19H34O22566-97-420顺,顺-9,12-十八碳二烯酸甲酯C18:2n6cC19H34O2112-63-021二十碳酸甲酯C20:0C21H42O21120-28-122顺,顺,顺-6,9,12-十八碳三烯酸甲酯C18:3n6C19H32O216326-32-223顺-11-二十碳一烯酸甲酯C20:1C21H40O22390-09-224顺,顺,顺-9,12,15-十八碳三烯酸甲酯C18:3n3C19H32O2301-00-825二十一碳酸甲酯C21:0C22H44O26064-90-026顺,顺-11,14-二十碳二烯酸甲酯C20:2C21H38O261012-46-227二十二碳酸甲酯C22:0C23H46O2929-77-128顺,顺,顺-8,11,14-二十碳三烯酸甲酯C20:3n6C21H36O221061-10-929顺-13-二十二碳一烯酸甲酯C22:1n9C23H44O21120-34-912 GB5009.168—2016表A.1(续)序号脂肪酸甲酯脂肪酸简称分子式CAS号30顺11,14,17-二十碳三烯酸甲酯C20:3n3C21H36O255682-88-731顺-5,8,11,14-二十碳四烯酸甲酯C20:4n6C21H34O22566-89-432二十三碳酸甲酯C23:0C24H48O22433-97-833顺13,16-二十二碳二烯酸甲酯C22:2C23H42O261012-47-334二十四碳酸甲酯C24:0C25H50O22442-49-135顺-5,8,11,14,17-二十碳五烯酸甲酯C20:5n3C21H32O22734-47-636顺-15-二十四碳一烯酸甲酯C24:1C25H48O22733-88-237顺-4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯酸甲酯C22:6n3C23H34O22566-90-713 GB5009.168—2016$$"%-."%"%&)#),&$%#-"%$)**%.&"!#!(%)$&(#"+*$)%&"(#)))%&$#"%",$)%")&(#%)%&$#(*"$),%"(&%#)(&$%#%,"$)"%!1&.#"!22$-+1(%&3"0"#"0%&$)//#+"%,.$(-"()&+!#!!*!,%!&$)!.)+#"*"$."*(*"("!))!))+&"!%%&#"&(&##)$!%"$*$)"%$&"("(")%%(&#%)#"$&&*!#,#%$!#$!"($)",$#"0(!(*)!%.&!#&")#,1$%$"+%$!#"(#&"(/+(")&$)&0#!/*#$."/"(")$!.*+")&%)-#&)$)#-&,#"($%!+"0-$!*#&."(%"%!)"+)9%#&(&8#)"+$!7$%*&/.%6-.""5"%()$4+&#"%&#!#%"!"$!!"%$%!.23"("!"!+(1/%)!!&&##!!*%(!14 GB5009.168—2016附录C脂肪酸甲酯的保留时间和相对保留时间参考脂肪酸甲酯的保留时间和相对保留时间参考见表C.1。表C.1脂肪酸甲酯的保留时间和相对保留时间参考序号脂肪酸甲酯脂肪酸简称保留时间/min相对保留时间/(C11:0)1丁酸甲酯C4:012.560.472己酸甲酯C6:015.540.593辛酸甲酯C8:019.830.754葵酸甲酯C10:024.320.925十一碳酸甲酯C11:026.461.006十二碳酸甲酯C12:028.491.087十三碳酸甲酯C13:030.461.158十四碳酸甲酯C14:032.451.239顺-9-十四碳一烯酸甲酯C14:134.311.3010十五碳酸甲酯C15:034.561.3111顺-10-十五碳一烯酸甲酯C15:136.621.3812十六碳酸甲酯C16:036.871.3913顺-9-十六碳一烯酸甲酯C16:138.811.4714十七碳酸甲酯C17:039.421.4915顺-10-十七碳一烯酸甲酯C17:141.591.5716十八碳酸甲酯C18:042.271.6017反-9-十八碳一烯酸甲酯C18:1n9t43.731.6518顺-9-十八碳一烯酸甲酯C18:1n9c44.381.6819反,反-9,12-十八碳二烯酸甲酯C18:2n6t46.161.7420顺,顺-9,12-十八碳二烯酸甲酯C18:2n6c47.731.8021二十碳酸甲酯C20:048.901.8522顺,顺,顺-6,9,12-十八碳三烯酸甲酯C18:3n650.501.9123顺-11-二十碳一烯酸甲酯C20:151.511.9524顺,顺,顺-9,12,15-十八碳三烯酸甲酯C18:3n352.151.9725二十一碳酸甲酯C21:052.952.0026顺,顺-11,14-二十碳二烯酸甲酯C20:255.992.1227二十二碳酸甲酯C22:057.752.1828顺,顺,顺-8,11,14-二十碳三烯酸甲酯C20:3n659.782.2629顺-13-二十二碳一烯酸甲酯C22:1n961.352.3230顺11,14,17-二十碳三烯酸甲酯C20:3n362.122.3515 GB5009.168—2016表C.1(续)序号脂肪酸甲酯脂肪酸简称保留时间/min相对保留时间/(C11:0)31顺-5,8,11,14-二十碳四烯酸甲酯C20:4n663.042.3832二十三碳酸甲酯C23:063.532.4033顺13,16-二十二碳二烯酸甲酯C22:267.682.5634二十四碳酸甲酯C24:069.992.6435顺-5,8,11,14,17-二十碳五烯酸甲酯C20:5n370.362.6636顺-15-二十四碳一烯酸甲酯C24:172.982.7637顺-4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯酸甲酯C22:6n381.723.0916 GB5009.168—2016附录D脂肪酸甲酯、脂肪酸和脂肪酸甘油三酯之间的转化系数脂肪酸甲酯、脂肪酸和脂肪酸甘油三酯之间的转化系数见表D.1。表D.1脂肪酸甲酯、脂肪酸和脂肪酸甘油三酯之间的转化系数序号脂肪酸简称FFAME-FAFFAME-TGFTG-FA1C4:00.86270.98680.87422C6:00.89230.98970.90163C8:00.91140.99150.91924C10:00.92470.99280.93145C11:00.93000.99330.93636C12:00.93460.99370.94057C13:00.93860.99410.94418C14:00.94210.99450.94749C14:1n50.94170.99440.946910C15:00.94530.99480.950311C15:1n50.94490.99470.949912C16:00.94810.99500.952913C16:1n70.94770.99500.952514C17:00.95070.99530.955215C17:1n70.95030.99520.954916C18:00.95300.99550.957317C18:1n9t0.95270.99550.957018C18:1n9c0.95270.99550.957019C18:2n6t0.95240.99540.956720C18:2n6c0.95240.99540.956721C20:00.95700.99590.961022C18:3n60.95200.99540.956423C20:10.95680.99590.960824C18:3n30.95200.99540.956425C21:00.95880.99610.962626C20:20.95650.99580.960527C22:00.96040.99620.964128C20:3n60.95620.99580.960329C22:1n90.96020.99620.963930C20:3n30.95620.99580.960317 GB5009.168—2016表D.1(续)序号脂肪酸简称FFAME-FAFFAME-TGFTG-FA31C20:4n60.95600.99580.960032C23:00.96190.99640.965533C22:2n60.96000.99620.963734C24:00.96330.99650.966735C20:5n30.95570.99580.959836C24:1n90.96320.99650.966637C22:6n30.95900.99610.9628注:FFAME-FA———脂肪酸甲酯转换成脂肪酸的转换系数。FFAME-TG———脂肪酸甲酯转换成相当于单个脂肪酸甘油三酯(1/3)的转换系数。FTG-FA———脂肪酸甘油三酯转换为脂肪酸的转换系数。18 GB5009.168—2016附录E脂肪酸的定量限脂肪酸的定量限见表E.1。表E.1脂肪酸的定量限序号脂肪酸简称定量限(固体类)/(g/100g)定量限(液体类)/(g/100g)1C4:00.00330.00132C6:00.00330.00133C8:00.00330.00134C10:00.00660.00265C11:00.00330.00136C12:00.00660.00267C13:00.00330.00138C14:00.00330.00139C14:1n50.00330.001310C15:00.00330.001311C15:1n50.00330.001312C16:00.00660.002613C16:1n70.00330.001314C17:00.00660.002615C17:1n70.00330.001316C18:00.00660.002617C18:1n9t0.00330.001318C18:1n9c0.00660.002619C18:2n6t0.00330.001320C18:2n6c0.00330.001321C20:00.00660.002622C18:3n60.00660.002623C20:10.00330.001324C18:3n30.00330.001325C21:00.00330.001326C20:20.00330.001327C22:00.00660.002628C20:3n60.00330.001329C22:1n90.00330.001330C20:3n30.00330.001319 GB5009.168—2016表E.1(续)序号脂肪酸简称定量限(固体类)/(g/100g)定量限(液体类)/(g/100g)31C20:4n60.00330.001332C23:00.00330.001333C22:2n60.00330.001334C24:00.00660.002635C20:5n30.00330.001336C24:1n90.00330.001337C22:6n30.00330.001320'