α7-nAChR激动剂的合成以及成药性评价.pdf 13页

'中国科技论文在线http://www.paper.edu.cn#α7-nAChR激动剂的合成以及成药性评价**谢冰雪，薛雨，马小卓，张亮仁（北京大学药学院，北京100191）5摘要：目的：α7-nAChR激动剂的合成路线研究以及化合物X1的成药性评价。方法：通过Suziki、Baylis-Hillman、热环化反应等合成目标化合物X1。通过急性毒性试验、豚鼠心电影响试验和药物代谢动力学试验评价化合物的成药性。结果：化合物X1LD50大于2000mg/kg，阳性对照物EVP-6124LD50为1882.7mg/kg，属于低毒化合物。豚鼠心电影响结果10显示：化合物X1在10、20mg/kg时对麻醉豚鼠的QT间期及QTc间期均延长超过了10%；EVP-6124在10mg/kg时仍未发生显著的QT间期延长。化合物X1吸收排泄均较慢，生物利用度53.2%，可以达到脑组织并在脑内蓄积。结论：化合物X1毒性小，吸收排泄慢，可能具有潜在的心脏毒性，可作为候选化合物，为临床研究提供重要数据。关键词：药物化学；精神分裂症；α7-nAChR激动剂；成药性评价15中图分类号：R914.4Synthesisofα7-nAChRagonistsdrugsanddrugevaluationXIEBingxue,XUEYu,MAXiaozhuo,ZHANGLiangren(SchoolofPharmacueticalSciences,PekingUniversityHealthScienceCenter,Beijing100191)20Abstract:Objective:Synthesisofα7-nAChRagonistsanddrugevaluation.Method:CompoundX1wassynthesizedwithSuziki,Baylis-hillmanreactionandet.al.Evaluationondrugabilitymainlyincludedacutetoxicitytest,guinea-pigscardio-toxicitytestandpharmacokineticstudy.Results:acutetoxicitytestsshowedthatLD50ofcompoundX1wasmorethan2000mg/kg,whileEVP-6124was1882.7mg/kg,bothofwhichblongtolowtoxicitycompounds.Guinea-pigscardio-toxicitytest25illuminatedthatcompoundX1appearcardio-toxicity.WhendoseofcompoundX1was10,20mg/kg,theQTandQTcinanesthetizedguineapigswereprolongedbymorethan10%.While,EVP-612410mg/kgstilldiden’toccursignificantprolongationinQTandQTc.AbsorptionandexcretionofcompoundX1wasslow.X1canpassthebloodbrainbarrierandaccumulateinbraintissue.Conclusion:compoundX1canbeacandidatewithlowacutetoxicityandgoodpharmacokinetic30properties.However,compoundX1maightbeofpotentialcardio-toxicity.Keywords:Medicinalchemistry;Schizophrenia;α7-nAChRagonists;medicinalevaluation350引言[1][2]α7-nAChR是由5个α7单体组成的同源性五聚体。编码α7单体的基因位于染色体[3][4][5]15q14，称为CHRNA7。人类α7单体大约在50kD，由502个氨基酸组成。同源性α7-nAChR与配体结合的结合位点在两个单体的交界面上(见图1)。40基金项目：国家自然科学基金项目(81373272)作者简介：谢冰雪（1990-），女，a7烟酰胺乙酰胆碱受体激动剂的合成以及成药性评价通信联系人：张亮仁（1963-）,博导,主要研究方向:核苷、核苷酸及寡核苷酸的设计与合成.E-mail:.E-mail:liangren@bjmu.edu.cn-1- 中国科技论文在线http://www.paper.edu.cn图1α7-nAChR结构示意图Fig.1Simulationstructureofα7-nAChR研究认为烟碱型乙酰胆碱受体是精神分裂症的一个重要靶点，α7-nAChR与认知密切相[6][7]关。α7-nAChR主要分布在海马区、皮层区和皮下边缘区，这些区域与认知功能紧密关联；45精神分裂症患者中吸烟者的比例比正常人高，烟草中的尼古丁持续刺激α7-nAChR，可导致[8]α7-nAChR敏感度降低；尸检结果显示精神分裂症患者脑内海马区等部位的α7-nAChR数[9][10][11]目减少；病理研究结果显示，尼古丁等α7-nAChR激动剂可以改善认知障碍问题。目前，基于α7-nAChR在治疗精神分裂症中认知障碍的药物研发已经较为深入，其中，[12][13]EVP-6124已经进入临床Ⅲ期试验。本研究在本课题组前期工作基础上，选取化合物50X1用于进一步合成以及成药性评价。1实验材料与仪器1.1合成实验材料与仪器6-溴吡啶-2-甲醛（北京偶合科技有限公司）；丙烯酸甲酯（北京偶合科技有限公司）；DABCO（阿拉丁）；乙酸酐（北京化工厂）；HATU（北京偶合科技有限公司）；DIPEA55（北京偶合科技有限公司）；Pb(OAc)2（阿拉丁）；苯硼酸（北京偶合科技有限公司）；R-3-氨基奎宁（北京偶合科技有限公司）BrukerAvanceIII400型核磁共振仪；QSTAR液质联用仪；BrukerApexIVFTMS型傅立叶离子回旋变换质谱仪；薄层层析硅胶板（上海上邦实业有限公司）；柱层析硅胶（200-300目，上海上邦实业有限公司）。601.2动物实验材料及实验器材KM小鼠（由徐州医学院实验动物中心提供）；豚鼠（徐州医学院提供）；环糊精、氟哌啶醇、乌拉坦（sigma公司产品）；乙腈（色谱纯，MerckCompany，Germany），甲醇（色谱纯，MerckCompany，Germany），甲酸（TEDIACompany，USA）。Powerlab生理记录仪采（南京美易科技有限公司）；CMS-2010EV高效液相色谱-质谱联65用仪（岛津公司）；LC-20AD泵；CBM-20A系统控制器；SIL-20AC自动进样器；CTO-20A柱温箱；Milli-QGradientA10超纯水仪（MilliporeInc，USA）。-2- 中国科技论文在线http://www.paper.edu.cn2实验部分2.1化合物的合成2.1.1化合物N-[(3R)-1-氮杂双环[2.2.2]辛烷-3-基]-5-苯基中氮茚-2-甲酰胺（X1）的合成OOHOOHHNHBOHNOBrNOOabOOAcNNONOOecOdOOHNH22HClNNOHNfN70X1Scheme2.1.Reagentsandconditions:(a)K2CO3,Pd(OAc)2,CH3OH/H2O,reflux,1h;(b)methylacrylate,DABCO,1,4-dioxane/H2O,r.t.,1h;(c)Ac2O,100℃,0.5h;(d)120℃,1h;(e)1)NaOH,MeOH/H2O,reflux,overnight.2)1MHCl(aq),10min;(f)(R)-3-aminoquinuclidinedihydrochloride,HATU,DIPEA,CH2Cl2,0℃→r.t.,12h.751）6-溴吡啶-2-甲醛（232mg,1.26mmol），苯硼酸（231mg,1.89mmol），K2CO3(348mg,2.52mmol),Pd(OAc)2(4mg,0.0189mmol)加入到20mL(EtOH:H2O=3:1)溶剂中，80℃下反应20min。反应结束后，加入饱和氯化钠稀释，EA萃取，硅胶柱层析分离产物，产量284mg，产率90%802）烯丙酸甲酯（1.1mL,12.3mmol），DABCO（458mg,4.1mmol）混合放入25mL圆底烧瓶中，加入10mL混合溶剂（1,4-二氧六环:水=1:1），常温下搅拌1h，TLC反应检测，反应结束。乙酸乙酯萃取，旋干，硅胶柱层析分离产物，得产物2-[2-(6-苯-吡啶-)-羟甲基]丙酸甲酯，产量998mg，产率90.2%。3）2-[2-(6-苯-吡啶-)-羟甲基]丙酸甲酯998mg，溶于3.7mL乙酸酐，100℃回流1h，反应结85束。EA萃取，旋干，继续加热到140℃反应1h，反应结束。溶于EA中，硅胶柱层析分离产物，得5-苯-3,5-二氢重氮茚-2-羧酸甲酯，产量467mg，产率50%。4）5-苯-3,5-二氢重氮茚-2-羧酸甲酯230mg，NaOH（153mg,3.82mmol），溶于(MeOH:H2O=3:1)8mL，回流2h，1NHCl调节pH析出大量白色固体，抽滤洗涤即为5-苯-3,5-二氢重氮茚-2-羧酸，产量177mg，产率82%。905）5-苯-3,5-二氢重氮茚-2-羧酸177mg，R-3-氨基奎宁（149mg,0.75mmol），HATU(342mg,0.90mmol)，DIPEA(0.4mL,2.25mmol)溶于5mLCH2Cl2中，冰水浴搅拌3h，水洗，有机层旋干，加入少量CH2Cl2冰水浴搅拌3h，析出大量固体，过滤，EA重结晶得终产物X1，产量187mg，产率72.2%。-3- 中国科技论文在线http://www.paper.edu.cn6)结构鉴定（附件1）195HNMR400MHz,DMSO-d6)δ8.33(d,J=6.1Hz,1H),7.84(d,J=1.0Hz,1H),7.68(dd,J=8.0,1.4Hz,2H),7.65-7.54(m,3H),7.51(d,J=9.0Hz,1H),7.03(d,J=1.5Hz,1H),6.88(dd,J=9.0,6.7Hz,1H),6.60(dd,J=6.6,0.9Hz,1H),4.20(d,J=4.9Hz,1H),3.50(t,J=11.5Hz,1H),3.27-3.15(m,1H),3.07(dd,J=18.0,11.5Hz,4H),2.09(d,J=2.7Hz,1H),1.98(dd,J=15.8,10.9Hz,1H),1.81(dd,J=7.6,5.3Hz,2H),1.61(t,J=12.1Hz,1H);13CNMR(101MHz,100DMSO-d6)δ163.8,136.6,134.2,133.2,129.6,129.3,128.3,123.4,119.0,118.8,112.6,111.8,99.8,51.4,45.8,45.3,44.8,24.6,2.2,17.7;HRMS(ESI-TOF+)m/zCalcd.ForC22H23N3O+[M+1]:346.1914;found346.1919.2.1.2对照品N-[(3R)-1-氮杂双环[2.2.2]辛烷-3-基]-7-氯苯并[b]噻吩-2-甲酰胺盐酸盐（EVP-6124盐酸盐）的合成NH2ClOKOH2HClOHSSONClOHaClOHHATU,DIPEACH2Cl2bClClSOEtOH/HClSOHClHNcHNN105NScheme2.2SynthesisrouteofEVP-6124.Reagentsandconditions:(a)1)HSCH2CO2H,KOH,H2O,reflux,2h;2)HCl;(b)(R)-3-aminoquinuclidinedihydrochloride,HATU,DIPEA,DMF,0℃→r.t.,overnight.1）1.34g（1.0mL,14.4mmol）巯基乙酸，1.62g（28.8mmol,2.0eq.）氢氧化钾溶于30mL110水中，加入2.50g（14.4mmol,1.0eq.）2,3-二氯苯甲醛，加热回流反应2天，TLC监测反应进程。反应完成后冷却到室温，加入20mL水，并用乙醚洗涤。取水相，加入足量的浓盐酸酸化，有淡黄色固体析出，抽滤，水洗，干燥得淡黄色固体产物（7-氯-1-苯并噻吩-2-甲酸）1.47g，收率：48.2%。2）117mg（0.55mmol,1.1eq.）上步的产物，100mg（0.5mmol,1.0eq.）3-(3R)-氨基奎宁二盐115酸盐，387mg（0.53mL,3.0mmol,6.0eq.）DIPEA加入到10mLDMF中，冷却到0℃后缓慢加入380mg（1.0mmol,2.0eq.）HATU，自然升至室温，室温反应12h。完全反应后，旋转蒸发除去溶剂，残渣溶于二氯甲烷，依次用饱和碳酸氢钠溶液和饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，硅胶柱层析（DCM/CH3OH/浓氨水=90/10/2）得油状化合物。3）向油状物中加入3mL3M的氯化氢的乙醇溶液，室温反应过夜后旋干，加入1mL甲醇、1202mL异丙醇和足量的无水乙醚，直到有浑浊出现并且不再增加。抽滤、干燥得到类白色固体144mg，收率：89.2%。4）结构鉴定（附件2）1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.45(s,1H),9.33(d,J=6.0Hz,1H),8.53(s,1H),7.96(d,J=7.8Hz,1H),7.72-7.41(m,2H),4.34(d,J=5.6Hz,1H),3.63(t,J=11.5Hz,1H),3.52125-3.33(m,5H),3.31-3.08(m,3H),2.30-2.06(m,2H),1.91(dd,J=7.8,5.4Hz,2H),1.73(t,J=12.0Hz,1H);13CNMR(101MHz,DMSO-d6)δ161.4,140.5,140.2,139.0,126.7,126.6,126.5,+125.8,124.3,50.3,45.4,45.0,24.3,21.3,17.1;MS(ESI-TOF+)m/z321.3[M+H].-4- 中国科技论文在线http://www.paper.edu.cn2.2急性毒性试验2.2.1限度实验130取KM小鼠，雌雄各半，随机分为3组，每组5只，分别为化合物X1以及阳性对照药EVP-61242000mg/kg组和溶剂组，0.2mL/10g灌胃给药。观察动物7日内的死亡情况。2.2.2半数致死量试验取KM小鼠，雌雄各半，随机分为6组，每组6只，分别为1200、1500、1875、2344、2930mg/kg和溶剂组，按0.2mL/10g灌胃给药，观察动物3日内的死亡情况。1352.3优选化合物对豚鼠心电的影响2.3.1实验方法及步骤（1）给药体积与途径：1mL/kg，颈静脉给药。（2）配药：将药物溶解于20%β-环糊精。（3）分组：豚鼠随机分为阴性对照组（20%β-环糊精），阳性对照组（氟哌啶醇）、化合140物高、中、低剂量组，每组6只，雌雄各半。（4）手术过程：豚鼠以20%的乌拉坦（0.75mL/100g，ip）麻醉，分离气管和颈静脉，对豚鼠颈静脉置管。气管剪开，止血。术后将麻醉豚鼠保温（保持肛温38±0.5℃）。按心电图标准II导联安置心电电极，Powerlab多通道记录仪记录，同步监测麻醉豚鼠的心电图。（5）给药方法：注射泵推注药物10min。145（6）心电测定：测定每次给药前及给药后5、10、15、20、25、30min时的豚鼠心电图各1min。2.4血浆药物代谢动力学以及通过血脑屏障实验2.4.1血浆药物代谢动力学研究1)色谱和质谱条件150色谱条件：色谱柱为AgilentZorbaxBPC18柱（150mm×4.6mm,5μm,美国Agilent公司）；预柱：C18保护柱（4mm×3.0mm,5μm,美国X1omenex公司）；流动相：乙腈-30mM醋酸铵水溶液（含0.1%甲酸）=35:65（v/v）；流速：1.0mL•min-1；柱温：30℃。质谱条件：离子化方式：电喷雾离子化（ESI）；温度350℃；选择性离子监测（selected-ionmonitoring,SIM），正离子检测；干燥器温度：350℃；碎裂电压：75V；雾化器压力（psig）：15535；干燥气流速12.0L/min；高度真空1.3E-005Torr。检测离子为：X1[M＋H]＋（质荷比,m/z）：346.0。2)血浆样品预处理取血浆样品180μL，置于2.0mL离心管中，加入乙腈溶液20μL，混匀，再加入乙腈600μL，涡旋3min，4℃下离心（12,000rpm）10min，取上清液于50℃氮气流下吹干，将吹干样品用160150μL乙腈复溶，涡旋混匀，4℃下离心（12,000rpm）5min，取上清液50μL进行LC-MS-5- 中国科技论文在线http://www.paper.edu.cn分析。3)化合物在大鼠体内的药动学研究尾静脉组：SD大鼠12只，雄性。试验前禁食12h，自由饮水，尾静脉注射给予X1-11.0mg•kgPEG400生理盐水溶液，分别于给药前和给药后0.083、0.25、0.5、1、2、3、5、-11657、9和12h于眼底静脉丛采血0.3mL，置离心管中，3500r•min离心10min，分离血浆，冷冻保存在-20℃冰箱中待测。-1灌胃组：各取SD大鼠12只，雄性。试验前禁食12h，自由饮水，灌胃给予3.0mg•kg和30mg•kg-1X1水溶液，分别于给药前和给药后0.167、0.5、1、2、3、5、7、9、12和-124h于眼底静脉丛采血0.3mL，置离心管中，3500r•min离心10min，分离血浆，冷冻保存170在-20℃冰箱中待测。2.4.2化合物在大鼠体内的血脑屏障透过性试验-1取SD大鼠9只，雄性，随机分成3组。试验前禁食12h，自由饮水，灌胃给予30mg•kgX1水溶液，分别于给药前和给药后2、3、7h于眼底静脉丛采血0.3mL后立即腹主动脉放血处死，取脑，用生理盐水洗净残留血迹，滤纸吸干，称重，加入适量（1:1）生理盐水进-1175行匀浆，制成脑组织匀浆液，冷藏备用。将血液样品置于离心管中，4000r•min离心10min，分离血浆，冷冻保存在-20℃冰箱中待测。2.5数据统计处理LD50的计算釆用Bliss法;LD50与曲线斜率的比较采用多重t检验。全部实验数据以Mean±SD表示，统计学差异采用配对t检验，P<0.05为差异具有统180计学意义，P<0.01为显著性差异，当心电参数给药前后的变化率≧10%时，认为药物对该心电参数具有明显的影响。应用DAS2.1.1程序计算主要药动学参数。Tmax和Cmax采用实测值，采用梯形法计算AUC0-t值和AUC0-∞值，以半对数作图法，由消除相末端浓度点计算t1/2。若在达峰前用零表示，达峰后以n.d.（notdetectable）表示，均用零值计算。1853实验结果与讨论3.1化合物X1合成结果与讨论[14]Suziki反应，使用Pd(OAc)2作为催化剂、K2CO3提供碱性，甲醇和水作溶剂，回流反应1h，收率可达90%。Baylis–Hillman反应，醛基部分与丙烯酸甲酯的投料比为1:3，催化剂为1.0eq.DABCO，190溶剂为1,4-二氧六环和水（1:1），室温反应1h。此方法所得产物的收率普遍较高，均大于80%。TLC监测反应进程，底物（醛基部分）可以完全反应。Baylis–Hillman反应机理见图2-6- 中国科技论文在线http://www.paper.edu.cn图2Baylis–Hillman反应机理195Fig.2Baylis–HillmanReactionMechanism3.2急性毒性试验实验结果及讨论3.2.1限度实验结果在限度实验中，化合物X1组小鼠在灌胃给予2000mg/kg后，观察7天，在前两天有两只小鼠死亡，EVP-6124共死亡三只。2003.2.2EVP-6124半数致死量试验根据限度实验，可知EVP-6124在2000mg/kg时共死亡3只，因此选择空白组和5个剂量组进行实验（表1）。表1EVP-6124半数致死量试验测定动物死亡情况Tab.150%LethalDoseTestforEVP-6124剂量/（mg/kg）动物数/（只）死亡数/（只）空白60120060150061187564234464293066205Bliss方法测定化合物EVP-6124结果如下：回归方程y(Probit)=-26.908+9.7435Log(D)半数致死量LD50=1882.7mg/kg3.3优选化合物对豚鼠心电的影响本次实验发现，20%β-环糊精溶媒对照组对麻醉豚鼠的QTc间期没有明显影响，210EVP-6124对麻醉豚鼠的QT间期及QTc间期均没有明显延长的影响，相反还缩短了豚鼠QTc间期。氟哌啶醇是临床上易引起病人QT延长风险的抗精神分裂症药物，在本次豚鼠心电实验中也发现其剂量在1、3mg/kg时对QT间期及QTc间期均延长超过了10%，具有剂量关系。化合物X1剂量在10、20mg/kg时对麻醉豚鼠的QT间期及QTc间期均延长超过了10%，-7- 中国科技论文在线http://www.paper.edu.cn215具有剂量关系。不同药物给药后对麻醉豚鼠QT及QTc-B等参数的影响的平均值见表2。（+表示给药后提高，-表示给药后降低；当变化率≧10%时说明参数有明显改变）表2给药后对麻醉豚鼠QT及QTc-B等参数的影响平均结果Tab.2QTandQTc-BofAnaestheticGuineaafterDrugInjection与基础值相比，给药后相应参数平均变化率（%）剂量心率PR间QT间QTc-B药物QRSP波R波T波/mg/kg/(次期期间期/(ms)/(mv)/(mv)/(mv)/min)/(ms)/(ms)/(ms)20%-0.81.01.20.10.0-3.2-0.7-4.8溶媒组20%-7.7-1.713.710.35.3-12.9-2.828.520%-1.3-1.73.71.20.0-12.5-5.7950.3-5.5-3.0-4.711.57.5-5.60.397.7氟哌啶醇1-15.17.6-8.825.815.2-9.1-1.2217.73-22.115.7-1.731.216.3-4.6-5.4379.55-2.40.813.71.71.36.013.87.2X1100.325.572.319.813.4-6.7-40.1295.520-16.333.092.831.422.1-7.6-50.0396.92.55.90.0-2.5-6.5-3.3-3.5-5.457.4EVP-612454.91.1-0.7-6.6-4.6-13.1-8.69.6104.60.13.7-4.1-2.0-15.6-7.56.03.4化合物X1药代动力学实验结果与讨论2203.4.1标准曲线以及线性范围以药物浓度(ng/mL)为横坐标，峰面积为纵坐标，进行线性回归，得到标准曲线方程为：y=723.41x+23405，r=0.9978。结果表明，X1血药浓度在2-2000ng/mL范围内，峰面积与血药浓度具有良好的线性关系(图3)225图3LC-MS法测定大鼠血浆中化合物X1含量的标准曲线-8- 中国科技论文在线http://www.paper.edu.cnFig.3StandardCurveofCompoundX1UtilizingLC-MS3.4.2化合物X1血浆样品测定结果230尾静脉组和低、高剂量灌胃组大鼠血浆药物浓度-时间曲线见图4。图4鼠尾静脉注射给予1.0mg/kgX1、灌胃给予3.0mg/kgX1、灌胃给予30mg/kgX1后的血浆药物浓度-时间曲线235Fig.4Concentration-TimeCurveof1.0mg/kgX13.0mg/KgX1forInjection、3.0mg/kgX1And30mg/kgX1ByGavage3.4.3X1药动学参数将尾静脉组和高低剂量灌胃组所测得的血药浓度-时间数据代入DAS2.1.1程序计算得到的主要药动学参数结果见表3。240表3尾静脉组和高低剂量灌胃组的主要药动学参数Tab.3PharmacokineticParametersofInjectionGroupandGavageGroupsNo.t1/2/Tmax/Cmax/AUC0-t/AUC0-∞/Cl/V/F/(h)(h)(μg·L-1)(μg·h·L-1)(μg·h·L-1)(L·(h·kg)-1)(L·kg-1)%尾静1.4±0.50.08394.4±5296.1±52.8111.1±609±5.724.9±1.4脉灌胃-4.6±1.45.5±2.3443.42±46151.9±121177.4±14522.8±9.728.2±3.653.2低灌胃-3.58±0.55.33±2.33425±91.44269±7444336±7377.1±1.3336.7±8.7高由药动学参数可以看出灌胃组的高低剂量组之间t1/2和Cmax与剂量呈正相关。由t1/2和Cl可知化合物在大鼠体内清除较快。灌胃高剂量组由于代谢饱和导致其代谢相对缓245慢，即AUC0-∞较大，从而导致其生物利用度无法计算。相反，灌胃组低剂量由于代谢较-9- 中国科技论文在线http://www.paper.edu.cn为迅速，使得其AUC0-∞较小，生物利用度为53.2%。3.4.4化合物大鼠血脑透过性实验结果大鼠灌胃给予30mg/kg的化合物X1后，不同时刻脑组织和血浆中化合物X1的含量结果见表4所示。250表4不同时刻脑组织和血浆中化合物X1的含量（ng/mL,n=3）Tab.4ConcentrationsofX1inBrainandBlood脑组织/（ng/mL）血浆/（ng/mL）Time/（h）237237130.9855.53233.65677.40444.671324.63212.5454.3797.23112.52510.92308.03363.2782.4884.101815.831012.91613.96平均值35.6064.12138.33868.58656.17748.87标准差25.6815.9182.81867.60310.72521.55由表中数据结果可以看出，化合物X1在脑组织中和血浆中的趋势是相同的，化合物可以透过血脑屏障到达脑中。由化合物X1在脑组织中含量变化趋势可以得出其在脑组织中有255蓄积。4结论本论文基于α7-nAChR激动剂进行合成，并进行了成药性评价。对优选化合物X1进行急性毒性试验，并与临床Ⅲ药物EVP-6124进行比较。实验结果显示X1LD50大于2000mg/kg，EVP-6124为1882.7mg/kg，安全级别均为低毒。通过观察动物中毒表现，小鼠多数260表现出萎靡的状态，表明药物作用可能具有神经抑制的作用。豚鼠心电的影响实验结果显示，X1对豚鼠心电具有潜在的心脏毒性，而EVP-6124安全性高，10mg/kg仍未对QT间期有明显的影响。该化合物吸收慢，清除也较慢，生物利用度高。3mg/kgX1在大鼠体内的绝对生物利用度为53.2%。化合物X1能穿过血脑屏障到达脑组织且在脑组织中有蓄积。本试验结果明确了化合物X1在大鼠体内的药动学行为，为化合物X1的成药性评价提供了依据。265附件1113X1的HNMR,CNMR-10- 中国科技论文在线http://www.paper.edu.cn270附件2113EVP-6124的HNMR,CNMR-11- 中国科技论文在线http://www.paper.edu.cn275[参考文献](References)[1]JensenAA,FrølundB,LiljeforsT,etal.Neuronalnicotinicacetylcholinereceptors:structuralrevelations,targetidentifications,andtherapeuticinspirations[J].JMedChem,2005,48(15):4705-4745.[2]HurstR,RollemaH,BertrandD.Nicotinicacetylcholinereceptors:frombasicsciencetotherapeutics[J].PharmacolTher,2013,137(1):22-54.280[3]GaultJ,RobinsonM,BergerR,etal.Genomicorganizationandpartialduplicationofthehumanα7neuronalnicotinicacetylcholinereceptorgene(CHRNA7)[J].Genomics,1998,52(2):173-185.-12- 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