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'湖南生物机电职业技术学院毕业设计报告书题目：猕猴桃组培茎尖培育方案设计专业都市园艺班级园艺13327班姓名宋和美指导教师蔡冬元2016年6月1日 目录第一部分设计任务与调研…………………………………………………………第二部分设计说明………………………………………………………………………第三部分设计试验……………………………………………………第四部分参考文献…………………………………………………………………第五部分致谢………………………………………………………………………… 第一部分设计任务与调研一、主要任务获得猕猴桃长势良好茎尖殖培养基配方以及最佳的生根培养基配方。二、设计的思路、方法设计不同的植物生长激素梯度组合，设计平行重复实验，按照不同的配比设计愈伤组织诱导培养基。三、相关资料猕猴桃的功效与作用有哪些?营养学家介绍猕猴桃是一种营养价值丰富的水果，具有多重功效和作用，被人们称为果中之王。猕猴头含有亮氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、酪氨酸、丙氨酸等10多种氨基酸，以及丰富的矿物质，包括丰富的钙、磷、铁，还含有胡萝卜素和多种维生素，对保持人体健康具有重要的作用。可以作为一种饮料治疗坏血病。每天一杯猕猴桃饮料可以在一个月以内很好的改善肤色和质地。它含有的维生素C有助于降低血液中的胆固醇水平，起到扩张血管和降低血压的作用。它还加强心脏肌肉。猕猴桃的功效还包括提升免疫功能，治疗肝脏疾病，消化不良，贫血，泌尿系统问题，呼吸系统疾病，脑疾病等。它还增加红血球生产，加强牙齿和指甲。应该记住的是，健康均衡的饮食，每日摄入大量的水，在加上使用猕猴桃可以治愈很多健康问题。 第二部分设计说明一、理论分析1.以猕猴桃的茎尖为外植体,在MS培养基上,研究不同培养条件下植物生长调节剂对愈伤组织诱导及离体快繁的影响。结果表明:MS培养基附加6-BA1.0～2.0mg/L,NAA0.5～1.0mg/L,2,4-D0.5～1.0mg/L,KT0.5mg/L都可使根、茎、叶诱导形成愈伤组织,其诱导效果根>茎>叶,且暗培养条件下的诱导率优于自然条件下的培养,并选出最佳培养基1/2MS+BA0.5+NAA0.5；以猕猴桃茎尖的外植体,在自然光和暗培养条件下可一步成苗,其出芽率自然光下优于暗培养条件下,最佳培养基为1/2MS+BA0.5+NAA0.5。2.以猕猴桃的茎尖为外植体,诱导出丛生芽,丛生芽经切割后接种到继代增殖培养基上,每月可增殖5～8倍,在含NAA的1/2MS培养上,试管苗生根率达到100%,试管苗移栽成活率达到90%以上。[7]二、设计方案选择猕猴桃茎尖为实验材料，以MS培养基为基本的培养基；选择组织培养常用的细胞分裂素6-BA和生长素NAA进行研究。设置植物生长调节物质浓度梯度组合，并设置平行重复实验。培养基的制作：1/2MS+BA0.5+NAA0.5(初代)三、预期目标从培养材料的优选，培养条件的优化，培养基的筛选等方面着手研究，利用组织培养技术获得无菌培养物，再进行继代培养获得猕猴桃最佳的茎尖增殖培养基配方以及最佳的生根培养基配方，最终获得快速繁殖的流程。 四、资金使用情况序号开支科目预算经费（元）主要用途1试剂费1500实验研究所需的各种试剂2打印费200打印上交资料、研究资料3材料费300用来购置培养瓶4总额2000第三部分设计试验一、实验目的：通过实验，初步掌握猕猴桃材料消毒、接种的无菌操作技术以及猕猴桃初代培养的方法。二、实验器材：1、实验材料：猕猴桃的茎尖2、实验试剂：0.1%升汞、吐温80、酒精3、实验设备:初代培养基47瓶、无菌水，灭菌工具、超净工作台，高压灭菌锅等。三、实验方法和步骤：1、培养基的制作：1/2MS+BA0.5+NAA0.5(初代)2、灭菌：配制好的培养基放入到灭菌高压锅中，大概在121度灭菌15分钟到30分钟， 3、接种：在接种前，打开超净工作台紫外灯，照射约15分钟；然后关闭紫外灯，打开超净工作台的风机，并微启超净工作台的玻璃挡板，通风20min后，即可进行无菌操作。用75%的酒精纱布擦拭3、接种：在接种前，打开超净工作台紫外灯，照射约15分超净工作台面，再将接种工具放进超净工作台中。4、猴桃茎尖的处理：⑴到基地取一些长势良好的猕猴桃茎尖⑵猕猴桃表面处理：①修剪②刷去表面的绒毛③用饱和洗衣粉浸泡10分钟④流水冲洗60秒⑤沥干水带进接种室⑥用70%-75%酒精浸30分钟，倒出⑦用0.1%升汞+吐温80浸泡3秒钟⑧用无菌水冲洗5-6次5、无菌操作：在超净工作台中，将灭好菌的猕猴桃茎尖放在接种工具上，清除没有用的部位，将切好的的猕猴桃放进猕猴桃初代培养基上。6、培养：将接种好的猕猴桃外植体控制在温度25±2℃，光照周期12h/d,光照强度2000lx，培养20天。3.1组员分工本组组员共8人，分工合理明确。2人清洗培养瓶，2人进行猕猴桃茎尖处理，1人准备所需材料，2人配制培养基，1人进行无菌操作接种。 四、数据统计与分析方法试验结束时，目测生长情况并用5级表示，分别记为“+”表示长势缓慢，没有明显变化；“++”表示生长缓慢，新根少，叶片较黄,愈伤组织少；“+++”表示长势一般，新根少，叶片较绿，狭窄，茎细，愈伤组织较少；“++++”表示长势较好，新根较多，根较短，叶片浓绿较宽，茎粗大，愈伤组织较多；“+++++”表示长势优良，新根多且长，叶片浓绿较宽，茎粗节多，愈伤组织多。 第四部分参考文献1、朱鸿云.2007.猕猴桃.北京.中国林业出版社2、张指南、候志洁.中华猕猴桃的引种栽培与利用.北京.中国3、梁畴芬,福格逊;中华猕猴桃硬毛变种学名订正[J];广西植物;1984年03期4、李思光,罗玉萍,陈万秋,黄卫;猕猴桃基因组DNA的提取及其RAPD扩增研究[J];南昌大学学报(理科版);2001年03 第五部分致谢毕业设计已经接近了尾声，这也意味着我的大学生活就要结束了，学习生活一晃而过。首先，我要特别感谢我的指导老师蔡冬元老师。做设计的过程是艰辛的，但是在我的努力之下还是完成了。在这个过程中蔡老师给了我很大的的帮助，没有她的尽心指导和严格的要求，我也不会顺利完成这次设计。每次遇到难题，我最先做的就是向蔡老师寻求帮助，而蔡老师每次不管忙或闲，总会抽空来找我面谈，然后一起商量解决的办法。蔡老师平日里工作繁多，但我做毕业设计的每个阶段，从选题到查阅资料，到之后设计报告的修改，后期毕业设计格式调整等各个环节中都给予了我悉心的指导。这几个月以来，蔡老师不仅在学业上给我以精心指导，同时还在思想给我以无微不至的关怀，在此谨向蔡老师致以诚挚的谢意和崇高的敬意。其次，还要感谢这三年来教我知识的每位老师们，毕业论文能够顺利完成，你们也都有很大的功劳。最后，要向这三年大学生活期间所有帮助过我的同学们以及各位朋友们说一声谢谢。'