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GBT28086-2011长针线虫属(传毒种类)检疫鉴定方法.pdf

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'ICS65.020.01B16a亘中华人民共和国国家标准GB/T28086--2011长针线虫属(传毒种类)检疫鉴定方法DetectionandidentificationofLongidorusspp.asvirusvectors2011-12-30发布2012-06-01实施宰瞀徽鬻瓣警攒瞥星发布中国国家标准化管理委员会厘111 标准分享网www.bzfxw.com免费下载前言GB/T28086--2011本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由全国植物检疫标准化技术委员会(SAC/TC271)提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国珠海出入境检验检疫局、中华人民共和国宁波出入境检验检疫局、中华人民共和国云南出入境检验检疫局和珠海市质量计量监督检测所。本标准主要起草人:陈其文、张卫东、廖力、蒋立琴、顾建锋、杜宇、徐淼锋、迟远丽、乐海洋、张慧娟、彭仁。 标准分享网www.bzfxw.com免费下载1范围长针线虫属(传毒种类)检疫鉴定方法本标准规定了长针线虫属传毒种类的检疫鉴定方法。本标准适用于植物根系、土壤及栽培介质中长针线虫属传毒种类的检疫鉴定。2规范性引用文件GB/T28086--2011下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T24830拟毛刺线虫属(传毒种类)检疫鉴定方法SN/T1157进出境植物苗木检疫规程SN/T1158进出境植物盆景检疫规程3长针线虫属(传毒种类)基本信息中文名:长针线虫属传毒种类。学名:Longidorusspp.。英文名:virusvectorsspeciesofNeedlenematodes。剑线虫属传毒种类隶属于线虫门Nematoda(Rudolphi,1808)Lankester,1877、无侧尾腺纲Adeno—phoreaLinstow,1905、矛线目DorylaimidaPearse,1942、长针线虫科Longidoridae(Thorne,1935)Fil—ipjev,1934、长针线虫属Longidorus(Mieoletzky,1922)Filipjev,1934。长针线虫属传毒种类是植物根系的迁移性外寄生线虫,主要依靠土壤、介质土和带根苗木、球茎等寄主植物材料的调运传播。长针线虫属传毒种类的其他信息参见附录A。4方法原理将现场检疫中发现的介质土、土壤以及植株,经漏斗法或浅盘法分离获得线虫,制成临时或永久玻片,显微镜下对雌、雄虫主要鉴定特征仔细观察并测量数据,依据本标准描述的长针线虫属传毒种类形态鉴定特征与其基本生物学信息,按系统分类学方法,鉴定其生物学种类。5仪器和用具仪器和用具按GB/T24830执行。6试剂试剂按GB/T24830执行,分样筛选用300目。 标准分享网www.bzfxw.com免费下载CB/"r28086--2017现场检疫对苗木、球茎等寄主材料进行检查,注意观察苗木的生长状况、根部为害状,以及是否带介质、土壤等。重点选取植株矮化、萎缩,根畸形、粗短、侧根消失等症状的苗木及根际介质或土壤,如无可疑症状则按要求随机取样。取样后立即置密封塑料袋,标记后及时送实验室检测。具体抽样比例按SN/T1157和SN/T1158执行。8实验室检验8.1线虫分离线虫分离按GB/T24830执行。8.2体视显微镜镜检分离获得的水样在10倍以上体视显微镜检查,观察线虫的形态结构。8.3标本制作标本制作按GB/T24830执行。8.4生物显微镜观察、摄影和测量应针对雌、雄虫主要鉴定特征仔细观察并显微摄影,重点包括整体形态、齿尖针、前唇区形态、侧器囊形态、雌虫阴道骨化结构及雄虫交合刺等,并在每张图片上加相应标尺。需观察、测量获得多岐检索表中各鉴定特征数字代码(参见附录B),并计算a、6、C和y等值。9形态鉴定特征9.1长针线虫属鉴定特征9.1.1雌虫虫体细长,热杀死后虫体直到弯成⋯C形,有1排~2排侧体孔。头部圆,连续或缢缩;侧器口小孔状、不明显,侧器囊袋状。齿尖针长、针状,不高度硬化,齿尖针基部平滑、不分叉,齿托长约为齿尖针长的三分之二、中等硬化,基部略厚但不呈凸缘状;齿针导环为单环,距头端的距离通常小于2倍头宽,偶尔位置较后(距头端距离达齿尖针长的40%);有1个背食道腺和2个腹亚侧腺,背食道腺细胞核位于背食道腺开口后一段距离、小于腹亚侧腺细胞核;阴门横裂、位于虫体中部,双卵巢对伸、转折。尾短,呈弓圆锥形,端细圆或宽圆,有几对尾孔。9.1.2雄虫长针线虫属部分种类雄虫未发现,雄虫双生殖腺、对伸,后精巢转折,交合刺粗大、向腹面弯,交合刺顶端部有短的附导片,斜纹交配肌显著、延伸至泄殖腔前几倍体宽处,泄殖腔区有1对交配乳突(有的种有2对~3对),在其前有1列腹中交配乳突,最多有20个,有些种的部分腹中交配乳突交错排列成双排。长针线虫属与近似属的区别见表1。2 标准分享网www.bzfxw.com免费下载表1长针线虫科各属的主要鉴别特征GB/T28086--2011线虫种类鉴定特征长针线虫属类长针线虫属拟长针线虫属剑针线虫属拟剑针线虫属剑线虫属LongidorusLongidoroidesParalongidorusXiphidorusParaxiphidorusXiphinema单环,位于双环,位诱导环于齿尖针齿尖针前部齿尖针后部后部齿尖针基部平滑平滑或叉状叉状齿托基部不呈凸缘状凸缘状小裂缝状或宽横裂侧器口孔状横裂缝状宽横裂缝状孔状缝状漏斗状至倒漏斗状至侧器囊袋状倒马镫状马镫状倒马镫状背食道腺小,位于背大,紧接核大小及其食道腺开口后背食道腺位置一段距离开口9.2长针线虫属传毒种类形态鉴定特征(参见附录B和附录c)9.2.1阿普尔长针线虫(LongidorusapulusLamberti,1977)雌虫虫体细长(5.1mm~9.1mm),热杀死后呈“c”字形;唇区扁平,有轻微缢缩,唇区宽度14,um~17pm,虫体前端至诱导环的长度27pm~34,um;侧器囊大多对称二裂;齿尖针弱,长度为91pm~112pm,齿托较长60pm~88,um;尾部呈圆锥形。雄虫稀少。9.2.2LongidorusarthensisBrown,1994雌虫虫体细长(5.1mm~7.6ram),热杀死后虫体弯曲呈“c”形;唇区钝圆,有轻微缢缩,唇区的宽度大约为16p“;侧器囊大而明显,存在二裂,延伸到口腔到导环距离的三分之二处;尾部钝圆锥形,尾长约为肛门处体宽。雄虫有发现,交合刺典型矛形。9.2.3浙狭长针线虫(LongidorusattenuatesHooper,1961)雌虫虫体细长(5.2mm~7.5ram),热杀死后,虫体后半部形成稍大的弯曲,成“c”形。头部扁平,稍阔,有明显缢缩,缢缩处体宽为导环处体宽四分之三。侧器囊大,基部对称二裂,延伸到口腔到导环距离的二分之一,侧器囊几乎围绕着头部,侧器孔很小;齿尖针细长,是齿托的2倍长,并与齿托有简单的交叉;尾部背面凸起,呈锥形,尾长是肛门处体宽的1.5倍~1.75倍。雄虫稀有,交合刺长45pm。侧附导片末端二裂。9.2.4短环长针线虫(LongidorusbrevlannulatusNorton,1975)雌虫虫体细长(4.0mm~5.9ram),热杀死后常弯曲成⋯C形,有时不规则;体细,平均体宽50pm(除尾端部分);阴门处有轻微突起,阴门孔倾斜;唇区扁平,有缢缩;侧器囊二裂,延伸到几乎接近导环,侧气孔模糊,位于唇区后部;尾部圆锥形,但在有些成虫尾端有短而宽的突起。雄虫未发现。3 标准分享网www.bzfxw.com免费下载GB/T28086--20119.2.5草皮长针线虫(LongidoruscaespiticolaHooper,1961)雌虫虫体细长(5.2mm~8.2mm),热杀死后虫体成“C”形;唇区圆球状,表面光滑,有缢缩,缢缩处体宽少于导环处体宽的二分之一;侧器囊大,不二裂,呈长瓶状或袋状,延伸到口腔到导环距离的三分之二处;齿尖针细长,与齿托有简单的交叉,齿托略微超过齿尖针长度的二分之一;尾部背面凸起,呈圆至钝圆锥形,尾长接近与肛门处的体宽。发现雄虫,交合剌长90/Jm,有附导片,雄虫与雌虫的比例通常为1:2。9.2.6折环长针线虫(LongidorusdiadecturusEvelei曲,1982)雌虫虫体细长(3.3mm~4.0mm),热杀死后虫体直到弯成⋯C形。虫体前端至诱导环的长度50pm~64pm;齿尖针和齿托的长度分别为109pm~121弘m和55pm~66pm,尾部钝圆形。雄虫未发现。9.2.7移去长针线虫[Longidoruselongatus(deMan,1876)Tborne,1936]雌虫虫体细长(4.5mm~6.4ram),热杀死后虫体直到弯成“c”形。唇区扁平,微缢缩,缢缩处体宽占导环处体宽的二分之一到三分之二,口孔有16个乳突;侧器囊大,袋状,延伸到口腔到导环位置的距离的二分之一处,侧器口孔状,难辨认,位于唇区基部;齿尖针细长,与齿托有细微交叉,齿托为齿尖针的二分之一长度;尾部背面凸起,腹面平或稍凹陷,呈圆锥形,尾长是肛门处体宽的1倍~1.3倍。雄虫在大多数种群中通常稀有或没有。9.2.8卫矛长针线虫(LongidoruseuonymusMali,1974)雌虫虫体狭长(6.0mm~7.6ram),热杀死后虫体向腹部弯区;唇区圆滑,前端扁平,唇宽约14pm,深度缢缩,口孔周围有16个乳突;侧器囊大,延伸到口腔到导环位置的二分之一距离,侧器囊基部不明显,有轻微的二裂。齿尖针长而细,齿托约为齿尖针的三分之二。尾长是肛门处体宽的1.3倍,尾部呈钝圆形。雄虫未发现。9.2.9横带长针线虫(LongidorusfasciatusRoca,1981)雌虫虫体细长(6.6mm~8.5ram),热杀死后稍呈“C”形。唇区5pm~6/zm高,宽度12pm~14pm,口孔处呈圆形,不缢缩;侧器囊不对称二裂,两裂片间有一定深度;齿尖针细长,长度为102pm~119bLm,有齿托;尾部钝圆形。雄虫未发现。9.2.10瘦头长针线虫(LongidorusleptocephalusHooper,1961)雌虫虫体细长(3.5mm~6.3ram),热杀死后弯曲成“C”形;唇区圆形,有轻微缢缩,缢缩处体宽占导环处体宽的二分之一到三分之二,口孔处有16个乳突;侧器囊大,基部对称二裂,延伸至口腔到导环距离的二分之一,侧器孔不明显,位于唇乳突的外环;尾部背面凸起,圆锥形,腹侧有轻微的凹陷,约为肛门处体宽的1倍~1.4倍。雄虫很少发现。9.2.11大体长针线虫(LongidorusmacrosomaHooper,1961)雌虫虫体粗壮(6.8mm~12ram),热杀后虫体向腹部弯曲;唇区扁平至轻微凹陷,有缢缩,缢缩处体宽约占导环处体宽的二分之一;侧器大,呈长瓶状,基部有二裂,但从背腹面看则呈袋状;齿尖针细长,齿托超过齿尖针长度的二分之一,尾部短,半圆形到钝圆形,为肛门处体宽的二分之一到三分之二。雄虫普遍,交合刺大,长105pm,钝弓形。d 标准分享网www.bzfxw.com免费下载GB/T28086--20119.2.12马丁长针线虫(LongidorusmartiniMerny,1966)雌虫虫体细长(3.2mm~4.3ram),热杀死后虫体向腹部弯区;虫体前端明显变细,唇区有明显缢缩;虫体前端至诱导环的长度大于50pm;侧器囊呈袋状,没有明显的基部裂片;尾部较长27”m~29pm,呈圆至钝圆锥形。雄虫有发现。9.2.13LongidorusprofundorumHooper,1966雌虫虫体细长(6.0mm~12.0mm),唇区平截状,不缢缩,唇宽约为食道基部体宽的四分之一,口孔处有16个乳突,侧器囊大而明显,二裂,延伸至口腔到导环距离的三分之二处;齿尖针长而细,齿托超过齿尖针长度的二分之一}尾长约为肛门处体宽的四分之三,尾圆锥形。雄虫有发现,交合刺矛形,有附导片。9.3长针线虫属主要传毒种类测计值长针线虫属传播种类的测计值见表2。表2长针线虫属传毒种类测计值测计值传毒线虫种类LoDSoDPoGRy6mm“mUm%阿普尔长针线虫旦5.1~9.1110~16910.7~18.a128~21691~11260~8024~3449~54Lapulus舌6.2~6.3IZ9~13113.8~15.3142~143102~10364~6631卫5.1~7.674.5~1181l。9~15.7123~18498~11165~7530~3848~53L.arthensis舌4.6~7.088.O~99.710.S~14.8117~174102~11664~76浙狭长针线虫旦5.Z~7.5109~21012.7~22.582~14773~9336~4527~3244~55L.attenuatus舌5.5~6.3119~17112.9~17.199~11480~8438~4030~32短环长针线虫早4,0~5.986~11912.3~23.2111~15476~8828~4521~2643.1~50.2L.breviannulatus0草皮长针线虫旦5.2~8.263~84lO.4~17.C83~162100~12056~9030~4144~58L.caespiticola舌5.4~7.564~8610.0~16.276~17399~11552~8032~45折环长针线虫皇3.3~4.012Z~177101~12155~6650~64L.diadecturus舌移去长针线虫旦4.5~6.476~1239.7~17.573~14181~10234~7128~3745~53Lelongatu5古5.O~6.493~12711.5~15.389~15572~9843~5830~33卫矛长针线虫旱6.1~7.8124~1861S.S~22.E175~】9881~9045~7626~3347~56Leuonymus舌横带长针线虫早6.6~8.5121~14311.8~25.5187~283102~11945~7033~3942~52L.危sciatus舌瘦头长针线虫早3.5~6.374~1378.0~20.075~15458~7830~6225~3245~59Lleptocephalus舌 标准分享网www.bzfxw.com免费下载GB/T28086--2011表2(续)测计值传毒线虫种类L0DSODP0GRVbmmⅡm“m%大体长针线虫旱6.8~12.066~14211.0~21.0148~290119~15053~9537~4841~59古6.7~11.176~12011.O~19.9148~268113~14753~9740~47马丁长针线虫旦3.Z~4.381~1609.1~17110~18483~9651~6151~5652~56L.martini舌2.8~3.993~13310.2~13.568~16280~9446~7060~68早6.Or8.881~11911.1~19.1124~22288~10534~4145~58L.profundorum舌5.7~7.683~13810.2~19.4120~18992~10332~40注:L——体长;n——体长/最大体宽;卜体长/体前端至食道与肠连接处的距离;c——体长/尾长;0Ds——Odontostyle齿尖针长度;oDP——Odontosphore齿托长度;V——体前端至阴门处距离x100/体长;oGR——Oralaperturetoguidering口孔到诱导环长度。10结果判定将观察、测量获得的各鉴定特征数字代码与多歧检索表按字母顺序进行核对,如果所有数字均与某种相符,则初步鉴定为该种。若初步鉴定为长针线虫属传毒种类,且符合第9章对应形态鉴定特征以及表2测计值,可判为检出长针线虫属传毒种类,其寄主和地理分布等信息可供参考。11样品保存若鉴定为长针线虫属传毒种类,则将剩余的线虫杀死、固定制成永久玻片保存;也可以用4%甲醛固定后长期保存。标签上应注明样品编号、种名、寄主、产地、制作人和制作时间等。对已鉴定出带有长针线虫的植物材料,经登记后,要保存在5℃~10℃及干燥、防鼠防虫处,并标明样品编号、截获日期、截获人、寄主名称、运输工具名称、输出国名等,样品需至少保存6个月,以备复验、谈判和仲裁。 标准分享网www.bzfxw.com免费下载附录A(资料性附录)长针线虫禺(传毒种类)相关资料A.1长针线虫属传毒种类以及传播的病毒种类见表A.1。表A.1长针线虫属传毒种类以及所传播的病毒种类GB/T28086--201介体线虫所传病毒种类阿普尔长针线虫1.洋蓟意大刺潜隐病毒阿普利亚株系artichokeitalianlatentvirusApuliastrain(AILV-Apulia)L.apulus2.菊苣褪绿环斑病毒chicorychloroticringspotvirus(CCRV)L.aTthensis樱桃丛簇病毒cherryrosettevirus(CRV)浙狭长针线虫1,番茄黑斑环病毒英格兰株系tomatoblackringvirusEnglishstrain(TBRV-E)2.番茄黑斑环病毒德国株系tomatoblackringvirusGermanystrain(TBRV-G)L.attenuatus3.番茄环斑病毒tomatoringspotvirus(ToRSV)短环长针线虫1.桃丛簇花叶病毒peachrosettemosaicvirus(PRMV)‘L.bre讲口n”"latu$z.雀麦花叶病毒hromemosaicvirus(BMV)‘草皮长针线虫1.悬钩子环斑病毒英格兰株系RaspberryringspotvirusEnglishstrain(RpRSV-E)12.南芥菜花叶病毒Arabismosaicvirus(ArMV)‘L.caespiticola3.樱桃卷叶病毒Cherryleafrollvirus(CLRV)折环长针线虫桃丛簇花叶病毒PRMVL.diadecturus1.樱桃卷叶病毒cLRVz.麝香石竹环斑病毒Carnationringspotvirus(cRsV)‘3.桃丛簇花叶病毒PRMV‘移去长针线虫4.悬钩子环斑病毒苏格兰株系RpRSV-SL.elongatus5.番茄黑环病毒苏格兰株系Tomato6缸c^ringvirusScottishstrain(TBRV-S)6。番茄黑环病毒西班牙株系TBRV—Spain7.番茄环斑病毒ToRSV8.悬钩子环斑病毒英格兰株系RpRSV-E卫矛长针线虫1.卫矛花叶病毒Euonymusmosaicvirus(EuoMV)‘横带长针线虫洋蓟意大利潜隐病毒希腊株系AILV-GreeeeL.血sciatus瘦头长针线虫悬钩子环斑病毒英格兰株系RpRSV-E‘L.1eptocephalus樱桃卷叶病毒CLRV"L.profundorum悬钩子环斑病毒英格兰株系RpRSV-E‘ 标准分享网www.bzfxw.com免费下载GB/T28086--201表A.1(续)介体线虫所传病毒种类1.悬钩子环斑病毒英格兰株系RpRSV-E2.悬钩子环斑病毒苏格兰株系Ras砷erryringspotvirusScottishstrain(RpRSV-S)大体长针线虫3.樱桃卷叶病毒Cherryleafrollvirus(CLRV)‘4.雀麦花叶病毒BMV"5.麝香石竹环斑病毒CRSV‘6.李属坏死环斑病毒Prunusnecroticringspotvirus(PNRsV)‘马丁长针线虫L.martini桑环斑病毒Mulberryringspotvirus(MRSV)‘被认为线虫作为病毒传播介体的证据并不充分。A.2长针线虫属传毒种类主要寄主及地理分布见表A.2。表A.2长针线虫属传毒种类主要寄主及地理分布线虫名称主要寄主地理分布阿普尔长针线虫洋蓟(Cirsiumspp.)、菊苣(Cichoriumspp.)、葡萄意大利、希腊L.apulus(Vitisspp.)樱桃(Prunuspseudocerasus)、葡萄(Vitisspp.)、三毛L.arthensis德国、瑞士、澳大利亚榉(Fagusspp.)紫花苜蓿(Medicagosatira)、蚕豆(Viciafaba)、甘蓝(Brassicacaulorapa)、黄瓜(Cucumissativus)、唐菖蒲(Gladiolusgandavensis)、葡萄(Vitisspp.)、韭菜(Alliumporrum)、莴苣(Lactucasatiwa)、洋葱(Alliumcepa)、水仙(Narcissustazetta)、桃(Prunuspersica)、马铃薯(Solanumtuberosum)、南瓜(Cucurbitapepo)、悬钩德国、斯洛伐克、匈牙利、西班浙狭长针线虫子(Rubusspp.)、草莓(Fragariaananas$n)、糖用甜菜牙、英国、保加利亚、法国、意大利、L.attenuatus(Betavulgris)、番茄(Lycopersiconesculentum)、郁金香波兰、俄罗斯、澳大利亚、新西兰、(Tulipagesneriana)、大麦(Hordeumvulgare)、胡萝h加拿大,美国(Daucuscarota)芦笋(Tetragonolobuspurpureus)、芸苔(Brassicacampestris)、毒麦(Loliumtemulentum)、薄荷(Menthahaplocalyx)、小麦(Triticumsativum)、苜蓿属(Medicagospp.)、天竺葵属(Pelargoniusspp.)、夹竹桃属(Neriumspp.)、洋蓟(Cirsiumspp.)短环长针线虫L.breviannulatus桃(Prunuspersica)、李(Prunussalicina)加拿大、美国、印度大麦(Hordeumvulgare)、苹果(Malusdomestica)、草皮长针线虫昆诺阿黎(Chenopodiumquinoa)克氏烟(Nicotiana法国、比利时、荷兰、德国L.caespiticolaclevelandii)草莓(Fragariaant2nassa).蔷薇(Rosaspp.)碧东茄(Petuniaspp.)、葡萄(Vitisspp.)8 表A.2(续)GB/T28086--2011线虫名称主要寄主地理分布折环长针线虫桃(Prunuspersica)、李(Prunussalicina)美国、加拿大L.diadecturus寄主范围广,包括银莲花(Anemonecathayensis)、甜菜(BemvMlgris)、草莓(Fraga—achiloensis)、樱桃印度、巴基斯坦、俄罗斯、瑞典、(Prunuspseudocerasus)、醋栗(Ribesuvacrispa)、葡萄波兰、荷兰、英国、斯洛伐克、德国、移去长针线虫(Vitisspp.)、苹果(Malusdomestica)、水仙(Narcissus奥地剥、西班牙、保如利亚、瑞典、L.elongatusspp.)、夹竹桃(Neriumspp.)、薄荷(Mentha南非、澳大利亚、新西兰、加拿大、haplocalyx)、马铃薯(Solanumtuberosum)、悬钩子美国(Rubuspalmatus)、红醋栗(Ri&5rubrum)、胡萝h(DaucⅢcarota)、苜蓿属(Medicagospp.)卫矛长针线虫马铃薯(Solanumtuberosum)、葡萄(Wtisspp.)、蔷薇比利时、保加利亚、斯洛伐克、澳L.etgonYm“5(Rosaspp.)大利亚横带长针线虫L.危sciates洋蓟(Cirsiumspp.)希腊、英国胡萝h(Daucuscarota)、马铃薯(Solanumtuberosum)、苹果(Malusdomestica)、甜菜(Beta瘦头长针线虫口ulgris)、郁金香(TulipagP肌e矗口n口)、芫青(Brassica英国、保加利亚、斯洛伐克、西班rapa)、鼠李(Rhamnusspp.)、金盏花(Calendulaoffici—牙、比利时、德国、瑞典、丹麦、爱尔L.1eptocephalusnalis)、大麦(Hordeumvulgate)、碧东茄(Petuniahybr—兰、挪威、荷兰、埃及ida)、昆诺阿黎(Chenopodiumquinoa)、蔷毂(Rosaspp.)、葡萄(Vitisspp.)、禾本科(Gramineae)寄主范围广泛,包括银莲花(Anemonecathayensis)、甜菜(Betavulg“s)、水仙(Narcissusspp.)、黑莓(Rubusmticosa)、樱桃(Pranuspseudocerasus)、醋栗(Ribes法国、英国、比利时、德国、荷兰、大体长针线虫uvacrispa)、苹果(Malusdomestica)、葡萄(Vitisspp.)、爱尔兰、意大利、西班牙、斯洛伐夹竹桃(Ne—umspp.)、马铃薯(Solanumtuberosum)、克、俄罗斯、澳大利亚悬钩子(Rubuspalmatus)、草莓(Fragariaananassa)、苜蓿属(Medicagospp.)桑树(MDⅢ5spp.)、葡萄(Vitisspp.)、马铃薯马丁长针线虫(Solanumtuberosum)、圆茄(Solanummelongenavar.日本L.martiniesculerztum)、烟草(Nicotianaspp.)、碧东茄(Petuniaspp.)悬钩子(Rubuspalmatus)、马铃薯(Solanumtuberos—L.profundorumum)、葡萄(Vitisspp.)、苹果(Malusdomestica)、蔷薇英国、瑞士、比利时(Rosaspp.)9 GB/T28086--201附录B(资料性附录)长针线虫属多歧检索表表B.1长针线虫属多歧检索表序号种类ABCDEFGHI1L.juveniloides121242L.reneyii121l513L.brevis12l15614L.paramonile12323215L.monile12426L.“^gdoi1212433(4)4527L.1eptocephalus12l233223134128L.1aevicapetatus1221212319L.ju。enilis1222356110L.makatinus12223211L.cdr声etanensis12233443256212L.monilaides12232(3)32112213L.mir“s123121223114L.pisi12313441223561215L.sylphus21212116L.bernardi212231225117L.pini21232236118L.aetnaeus212312123561219L.rotundicaudatus21(2)3212220L.ampullatus2126221L.pawneensis22324122L.globulicauda22341325123L.kakamus2232(3)4134545224L.c07t90ensls23121212125L.auratus23123223126L.paramirus2314124127L.1atocephalus2313(4)41234561228L.protae2312232342129L.distinctus231223232356230L.euonymus923122342(3)3423423l10 表B.1(续)GB/T28086--2011序号种类ABCDEFGHI31L.r曲{23223256132L.attenuatus‘234234234451233L.breviannulatus2332232I34L.grandis234523323423412135L.belloi23412333412312236L.igo—s2341231323137L.africanus234122321212345138L.Ⅲnws312112139L.£ongicn“dnnu3122316140L.conicaudoides312321245141L.belondiroidPs3131421242L.jiangsuensis31312143L.ishrati31324245144L.indicus313214145L.camelliae313l121246L.martinij31254122312l47L.fragilis3213256148L.curvatus32312126149L.conicaudatus3231232150L.sturhani32(3)322324151L.alvegus32323344556152L.arthemisiae32331323253L.athesinuso3233132312254L."ineacola32323431255L.1usitanicus334233(4)323421256L.glycines342323423412257L.juglandicola3432342312258L.Ⅲic£’丘nfnf“j3(4)l2313212259L.nirulai3412326260L.orientalis3412312232161L.chikmagalurensis341341212162L.psidii341231212163L扣百34123223256264L.profundorum“341234323421265L.jagerae34125412l(2)1211 GB/T28086--201表B.1(续)序号种类ABCDEFGHI66L.socailis342(2)3312126167L.crataegi342331334121268L.elongatusb“‘“‘。342332231221269L.henanus342334232312170L.dunensi5342323432171L.raski343l234121272L.goodeyi343233412173L.caespiticola343341434121274L.taniwha34345l2121275L.balticus3442334231276L.paravineacola34452332345234177L.emundsi345212231278L.paralongicaudatus3452312212561279L.撕formis345452344Z34523445628035122313342312281L.apulus。‘‘’“’1’‘3523323343282L.tardicauda41312321283L.in抬rmedius412231,32122l84L.iranicus41231232185L.olegi42312421286L.危sciatus“1423133423187L.trapezoides4232334231l88425121l89L.mobae42542233523290L.pauli423323431291L.arthensis423312312292L.diadecturus。423525212193L^rsti42354522312194L.cⅢ“j43l242195L.proximus431342311296L.cohni4324452.4297L.alaskaensis4323(2)311298L.reisi4342(3)35456199L.t崛ikoualtii435l43121100L.mGgnu$434413512112 表B.1(续)GB/T28086--2011序号种类ABCDEFGHI101L.kynsi4524212102L.huipe“4523313412103L.Parala吐aensis(4)532233121104L.hangzhouensis451(3)41421105L.pseudo~elongatus4522343121106L.himalayensis452521l107L.closelongatus452324Z(2)34242.41108L.apuloides45233234534122109L.silvae452334l3342(3)1l110L.iuglandis4523341,22341212111L.1ignosus45312312112L.macromucronatus。45353l2l1113L.v/nearum45353423451212114L.seihhorsti45432Z234211546434344513l2116L.cylindri~caudatus523223121I117L.paraelongatus523323l342118L.macrotero~mucronatus53414121119L.israelensis531423l1120L.0D£5snec^£n5ii5431421121L.major54534234521122L.o即n05“s563Z4Z45542123L.uroshis562343412334212124L知ngi56352(3)5232121125L.nevesi56343(4)13351212126L.picenus563(4)3413342l2127L.cretensis563443l1234112128L.∞gln螂56452332312129L.plus5645341231130L.hElveti%56453414341Z13lL.naganensis63522(3)1l1132L.1itchii57252231(2)l2133L.(zmericnM57534322312134Leridanicus6712341423Z1l135L.piceicola6723342122312213 GB/T28086--2011表B.1(续)序号种类ABCDEFGHI136L.carl口athicus6734123121137L.dalmassoi6743234232(4)2138L.orongo~rongensis67451434212139L.kr/cis7354223212140L.缸rjani753232122洼:特征取值及其与其相应的代码结果A:齿尖针长度(卢m)1:<602:61~803:81~1004:101~1205:121~1406:141~1607:>160B:唇区的直径(ptm)1:<122:12~153:16~194:20~235:>23c:虫体前端至诱导环的长度(/tm)1:17~202:21~303:31~404:41~505:≥51D:前唇区的形态1:虫体前端明显变细,唇区圆滑,没有缢缩。2:虫体前端明显变细,唇区圆滑,有凹陷缢缩。3:虫体前端明显变细,唇区平截状,没有缢缩或轻微凹陷缢缩。4:虫体前端明显变细或成亚圆筒形,唇区有明显收缩缢缩或膨大。E:侧器囊形态1:或多或少呈袋状,没有明显的基部裂片;2:或多或少呈袋状,有对称二分裂(裂片长度近乎相等);3:或多或少呈袋状,有不对称二分裂(其中有一裂片比另一裂片短或几乎看不到)4:呈长形,漏斗状,没有裂片5:呈短形,漏斗状至马镫状F:虫体体长(mm)1:<32:3.1~5.03:5.1~7.04:7.1~9.05:/>9.1G:“a”比值1:<802:81~1203:121~1604:>160H:尾形1:半圆至钝圆锥形,ct<12:圆至钝圆锥形,c’=1.O~1.53:圆至钝圆锥形,c’;1.6~2.04:圆锥形,c’一1.0~1.55:圆锥形,c7—1.6~2.06:圆锥形,c’>2.0I:雄虫出现与否1:发现雄虫;2:未发现雄虫;12:在一些群体中发现雄虫,但在其他群体中未见雄虫。a:L.distinctus,L.attenuatus和L.alvegus这三个种非常相似。唇区圆滑,有深陷缢缩,因此显出膨大;尾部圆锥形,相当长(c’=1.5~2.9);诱导环位于26/,tm~33pm,齿尖针长71pm~93/tm。1.侧器囊基部对称二裂;c’=1.5~1.8L.attenuatus侧器囊基部不对称二裂;c’;1.7~2.922.体长3.1mm~5.5mm;a一88~127;c’一1.7~2.4;唇区宽度12pm~13/LmL.distinctus体长6.3mm~7.8mm;a一172~211;c’;2.O~2.9;唇区宽度一13pm~16“mL.al口egusb:头部平,齿尖针区域有四个腹颈孔,尾部腹面挺直或有微小凹进去L.elongatus.头部圆,齿尖针区域无腹颈孔,尾部腹面凹进去L.conicaudatusc:L.elongatus,Lhenanus,L.dunensis,L.cohni和L.apulus这五种虫区别如下:1.唇区平截;连续或浅陷缢缩2唇区圆形;有深陷缢缩32.唇区宽度一12pm~13Fm;“a”值一般小于120L.elongatus唇区宽度一14pm~17卢m;“a”值一般大于120L.apulus3.a一160~225;二龄幼虫尾部长度60扯m~64pm;侧器囊基部浅二裂;食道线核位置异常L.cohnia;80~160;二龄幼虫尾部长度55/,tm;食道线核正常44.唇区出现膨大;GR=29pm~33gm;侧体孔总数为320~370个,其中约20个在颈区;背颈孔1个或没有⋯⋯⋯L.dunensis唇区无膨大;GR=39卜m~46pm;侧体孔总数为100~130个,其中约10~14个在颈;背颈孔1~3个⋯-⋯⋯·-L.henanusd:侧器囊基部几乎不二裂L.trapezoides14 表B.1(续)GB/T28086--2011序号1种类ABCDEFGH侧器囊基部深二裂e:Lfangi,L.diadecturus和L.m删舢ronⅡf埘诱导环远远后置(大于或等于四个唇区宽)的相似种。1.齿托长78pm~95,am,齿尖针长207Fm~232,am齿托长55,am~77,am,齿尖针长168,am~200pmL.血sciatus2.齿托长55,am~66“m,尾长25Fm~29,am,“c”一122~177齿托长67,am~77,am,尾长21,am~22pm,“c”=190~230f:L.arthemisiae,Lelongates和L.apulus相似1.侧器囊基部不呈对称二裂,雄虫的交合刺较短39,am~49,am侧器囊基部呈对称二裂,雄虫的交合刺较长>55/Lm2.唇区宽度一12"m~13gm;“a”值一般小于120唇区宽度一14pm~17ttm;“a”值一般大于1202L.diadecturusL.macromucronatusL.arthemisiae2L.elongatusg:L.psidii,L.intermedius,L.athesinus,L.conicephalatus和L.igoris代码相近,可按下列比对加以区分1.侧器囊基部呈对称二裂L.apulus侧器囊基部呈不对称二裂2.虫体较短(3.0mm~3.2ram),c7≤I.0虫体较长(3.6mm~4.5ram),c7—1.1~1.43.唇区宽度14,um~21pm,交合刺长度71,am~88,am唇区宽度≤12pm。交合刺长度38pm或未发现雄虫23L.psidiiL.intermedius4.虫体较短(3.2mm~3.9ram),“a”一66.0h88.5,有发现雄虫虫体较长(4.2mm~6.5ram),“口”一103.0h131.7,有发现雄虫4L.conicephalatush:唇区宽度20pm~23,am,虫体前端至诱导环长度23,am--29,am,子宫囊178,am~354,am,未见雄虫唇区宽度14~17pm,虫体前端至诱导环的长度27~34pm,子宫囊90~130,amL.igoris和Lfascdatus体长4.2mm~6.5mm,唇区宽度9.3pm~11.8,am,齿尖针长75.5pm~105.8p.m体长6.6mm~8.5mlTl唇区宽度12pm~14,am,齿尖针长102pm~119,amj:诱导环明较长62pm~81pm,尾部较短17.5pm~23pm,c’=o.8~1.0诱导环明较短51弘m~58pm,尾部较长27#m~29/Im,c’一1.1~I.3LfasciatusL.J口ge托8L.martinik:L.elongatus,L.1usitanicus,L.huiperi,L.glycines,L.paravineacola和L.juglandicola等一组的代码非常接近,区别如下:1.唇区宽度为11pm~16,am唇区宽度为17,am~27,am2.侧器囊基部呈不对称二裂倔器囊基部呈对称二裂或不裂2L.1usitanicus3.侧器囊基部不分裂,唇区宽度为27,am~33btm侧器囊基部呈对称二裂,唇区宽度为20,am~27,amL.kuiperi4.诱导环位置22.3pm~26.4Pm,齿托长50.8,am~60.9pm诱导环位置28bomb37pm,齿托长63,am~83gm45.唇区较宽21,am~27,am,齿尖针长度为95.0pm~113.7pm,未见雄虫唇区较宽31pm~37弘m,齿尖针长度为81.0pm~95.0pm,有雄虫齿托较短56,am~64,am。尾部末端较圆,c7=0.8~1.0,幼虫的尾部呈亚指状5L.paravineacolaL.juglandicola··L.pauliL.口pulusL.sturhaniL.apulus齿托较长60,am~88pm,尾部呈圆锥体形,c7一o.9~1.2,幼虫的尾部无亚指状m:体长4.4rglm~6.4mm,齿尖针78,am~96pm,尾部呈钝圆锥形体长5.3mm~9.7mm,齿尖针91pm~112,am,尾部呈圆锥形15篡一 GB/T28086--201表B.1(续)序号1种类ABCDEFGHn:虫体较小,a=120.3~143.5,虫体前端至诱导环的长度27.2tzm~35.8pm,齿尖针长101虫体较大,a=81~119,虫体前端至诱导环的长度34pm~41卜m,齿尖针较短88pm~105Izmo:虫体前端至诱导环的长度24pm~3l/xm,侧器囊基部有明显的二裂L.profitndorumL.sturhaniL.elongatusL.sturhaniL.euonymus虫体前端至诱导环的长度30#m~40卜m,侧器囊基部有不清晰的二裂P:体长4.4mm~6.4ITlrn,a=100~130,唇区浅缢缩体长6.0mm~7.6mm,a一24~171,唇区深度缢缩或膨大16 附录C(姿料性附录)长针钱虫传毒种类的形态特征图lOgml---------JA——雌虫体前部;卜雌虫体后部;C~F——1龄~4龄幼虫尾部;G——雌虫尾部。图C.1阿普尔长针线虫(L.apulus)形态特征图GB/T28086--2011O17 GB/T28086--2011A——雌虫的食道区;B—一雌虫头部(右侧面);c——雌虫头部(背面);n—一雄虫头部(右侧面)E——体后部(侧面);18F——雄虫交合刺和引带;G——右到左:1龄~4龄、雄虫,两条雌虫整体H、I——1龄幼虫尾部;J~L——2龄~4龄幼虫尾部;M、N——雌虫尾部。图c.2L.arthensis特征图 GB/T28086--2011A——头部(侧面)}B——雌虫;C——前食道区(腹面);D—一唇区;E——雄虫尾部(侧面);F~I——1龄~4龄幼虫尾部(侧面);J、K——雌虫尾部(侧面),图C.3浙狭长针线虫(L.attenuatus)特征图19 GB/T28086--2011二!E10um24,umA——雌虫体前部(侧面);昏—一雌虫顶面观;c——侧器囊(侧面)}D—一侧器囊(背面);E——雌虫尾部(侧面);F——雌虫前生殖腺(侧面)。图C.4短环长针线虫(L.6rPvf¨M[f口fHs)特征图 GB/T28086--2011A——食道区(侧面);B_—唇区;c——交合刺和引带;n—头部(腹面);E——雄虫尾部(侧面);F——侧器;G一雌虫;H——雄虫尾部(腹面);I——雌虫尾部(腹面);J~M——左到右:1龄~4龄幼虫尾部(侧面);N、O——雌虫尾部(侧面)。图C.5草皮长针线虫(L.caespiticola)特征图Z1 GB/T28086--201A——雌虫体前部;卧—一雌虫食道区;c——食道棘突;D—一生殖系统;E——雌虫尾部;F——3龄幼虫尾部;G——4龄幼虫尾部。GBCI堑坐IB、DA、C、E、F,G图C.6折环长针线虫(L.diadecturus)特征图饿㈣蚓 OGB/T28086--2011A——食道区(背侧面);B~n—一头部(B,C侧面,D腹面)E——雌虫生殖腺;F——头部顶面观}G——交合刺;H——阴门(腹面);I——阴道(腹面);J~M——1龄~4龄幼虫尾部N——雄虫尾部(侧面);0~Q——雌虫尾部。图C.7移去长针线虫(L.elongatus)特征图23 GB/T28086--2011塑生竺L—一GKL㈥彰蟛A——雌虫体前部(侧面);B~E——1龄~4龄幼虫整体F——雌虫整体;p—一雄虫食道区(侧面);H——头部顶面观;I——雌虫体前部(背面);J~L——雄虫尾部(侧面);M——阴门区(侧面);N~Q——1龄~4龄幼虫尾部(侧面)。图C.8卫矛长针线虫(L.euonymus)特征图 CGB/T28086--201A——雌虫体前部B_—一雌虫体后部C——阴门区。图C.9横带长针线虫(L.fasciatus)特征图25 GB/T28086--201EFGH删I心iiⅫ蚴"-翅A——头部(侧面);卜唇区;C——前食道区(腹面);n—一雌虫整体;E~H——1龄~4龄幼虫尾部;IJ——雌虫尾部(侧面)。图c.10瘦头长针线虫(L.1eptocephalus)特征图26 GB/T28086--2011KLMNO炒炒A——雄虫尾部(侧面);BJ一口孔横截面;c——头部}n—一食道;E——交合刺和引带;F——唇区;G—一雄虫尾部(腹面);H——整体;I——雌虫尾部(腹面);J~M——左刭右分别:1龄~4龄幼虫尾部;N、o—雌虫尾部(侧面)。图c.11大体长针线虫(L.macrosoma)特征图27 GB/T28086--2011A——雌虫体前部(侧面)B~c——雌虫尾部;n—一雄虫体后部;E——雄虫尾部。28图c.12马丁长针线虫(L.maHini)特征图 封A~D一1龄~4龄幼虫尾部E~H——1龄~4龄幼虫整体I——雄虫整体;J——雌虫整体;K——雄虫尾部(侧面);L——雄虫尾部(腹面);M——交合刺和引带。图C.13L.profundorumum特征图'