DB13T 1116-2009 焦糖色中的4一甲基咪唑的测定-高效液相色谱法.pdf 8页

'ICS67.100X1、、夕了DB136可丬丬．﹄．﹄省地方标准DB13/T1116-2009焦糖色中的4一甲基咪唑的测定高效液相色谱法Determinationof4-methylimidazoaspartameincaramelHPLCmethod2009-05-27发布2009-06-11实施河北省质量技术监督局发布 标准分享网www.bzfxw.com免费下载 DB13/T1116-2009月IJ吕本标准中的附录A为资料性附录。本标准由河北省质量技术监督局提出并归口。本标准起草单位：河北省食品质量监督检验研究院、河北省食品安全重点实验室、河北师范大学生命科学学院、河北医科大学基础医学院。本标准主要起草人：李挥、张岩、李强、刘敬泽、吕品、刘辰魁、王丽霞、康素芬。www.bzfxw.com www.bzfxw.com标准分享网www.bzfxw.com免费下载 DB13/T1116-2009焦糖色中的4一甲基咪唑的测定高效液相色谱法1范围本标准规定了焦糖色中4一甲基咪唑的测定方法。本标准适用于焦糖色中4一甲基咪唑的测定。本方法的检出限为5mg/kg.2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T6682分析实验用水规格和试验方法原理样品中4一甲基咪唑经高效液相反相CI8柱分离后，根据色谱峰的保留时间定性，根据峰面积定量。4试剂与材料www.bzfxw.com除另有规定，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。4I．n甲醇：色谱纯。4乙．Q无水乙醇。4．U三氯甲烷。4月叶。．用三氯甲烷一无水乙醇萃取液（80:20)：移取80mL的三氯甲烷及20mL的无水乙醇混合均匀备4.5碳酸钠。4.6碳酸钠溶液（100g/L)：准确吸取碳酸钠100g于1000mL容量瓶中，用水定容至刻度。4.7庚烷磺酸钠。4.8磷酸二氢钾。4.9磷酸。4.10磷酸二氢钾缓冲液（(0.05mol/L)：称取磷酸二氢钾6.8g、庚烷磺酸钠1g于1000mL容量瓶中，加水900mL，用稀磷酸调节pH至3.5，用水定容至1000mLo4.114一甲基咪唑标准品：纯度）99%o4.124-甲基咪唑标准储备溶液：准确称取0.1000g4一甲基咪唑于100mL的容量瓶中，用流动相溶解定容至刻度。4一甲基咪唑含量1.0mg/mL，作为贮备溶液。4.134一甲基咪唑标准使用系列溶液：准确吸取4一甲基咪唑贮备溶液1.0mL,2.0mL,3.0mL,4.0mL.5.OmL于50mL容量瓶中，用流动相定容至刻度，浓度分别为20卩g/mL,40林g/mL,60林g/山L,80.tg/mL.100¦Ìg/mL的系列标准溶液，置于冰箱冷藏保存。5仪器与设备 DB13/T1116-20095.1高效液相色谱仪，带紫外检测器。5.2旋转蒸发器。5.3电子天平：感重0.1mg.0.001go5.4分液漏斗：250mLo5．5振荡器。5.6微孔滤膜：0.45林M.6分析步骤6.1样品处理：准确称取3g样品（精确至0.001g)，加巧mL水溶解，移入250mL分液漏斗中，加100g/L碳酸钠溶液15mL，加三氯甲烷一无水乙醇萃取液60mL，剧烈振摇5min。静置分层后，将有机相移入另一分液漏斗中，水相再按同样方法萃取一次，合并有机相；用100g/L碳酸钠溶液洗涤提取液3次，每次30mL。然后将有机相通过无水硫酸钠滤入旋转蒸发瓶中，50℃浓缩至近干，取下，以水溶解残渣并定容至10毗，经0.45林m微孔膜过滤后供HPLC分析。6.2测定6.2.1HPLC参考条件分析柱：C18,4.6mmx250mm粒度5¦Ìmo流动相：甲醇:0.05mol几磷酸二氢钾缓冲液（(pH3.5，含0.1％庚烷磺酸钠）=5:950波长：210nmo流速：1.0mL/mino6.2.2标准曲线：分别进标准系列溶液各10¦ÌL，进行HPLC分析，然后以峰面积为纵坐标，以4一甲基咪唑的含量为横坐标，绘制标准曲线。6.2.3试样测定：吸取www.bzfxw.com6.1处理后的试样溶液10gL进行HPLC分析，测定其峰面积，从标准曲线查得测定液中4一甲基咪唑的含量7结果计算试样中4一甲基咪唑的含量按下式计算：cxVxl000X=(1)mx1000式中：X一试样中4一甲基咪唑的含量，单位为毫克每千克（mg/kg);c一由标准曲线上查得进样液中4一甲基咪唑的量，单位为微克每毫升（林g/mL);V一试样稀释液总体积，单位为毫升（mL);m一试样质量，单位为克（g);计算结果保留两位有效数字。8精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%0标准分享网www.bzfxw.com免费下载 DB13/T1116-2009附录A（资料性附录）4一甲基咪唑标准物质色谱图13.08_踢的．月a.06_。da.0S.a.02a月awww.bzfxw.com口二a召力it10刀a1召刀aza刀口盆6.013匀a刀a匀‘习a图A.14一甲基咪哇标准物质色谱图 www.bzfxw.com标准分享网www.bzfxw.com免费下载'