GBT27641-2011马螨病诊断技术.pdf 9页

'ICS”．220B41雷园中华人民共$-n国国家标准GB／T27641—20112011-12-30发布马螨病诊断技术Diagnostictechniquesforhorsemange2012-04—01实施宰瞀髁紫瓣訾麟瞥星发布中国国家标准化管理委员会仅19 标准分享网www.bzfxw.com免费下载刖昌GB／T27641—2011本标准按照GB／T1．1—2009的规则起草。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国动物防疫标准化技术委员会(SAC／TC181)归口。本标准起草单位：中华人民共和国山东出入境检验检疫局、中国动物卫生与流行病学中心。本标准主要起草人：梁成珠、朱来华、郑小龙、肖西志、邓明俊、岳志芹、毕道荣、梁君妮、徐彪。 标准分享网www.bzfxw.com免费下载1范围马螨病诊断技术本标准规定了马螨病临床检查、病原样品采集与鉴定等诊断技术要求。本标准适用于马螨病的检疫和诊断。2临床检查GB／T27641--20112．1临床特征马患本病时，先由头、颈、体侧开始，随后蔓延至肩、背、全身，足螨则主要寄生于四肢的下半部。主要表现为皮肤发痒，骚动不安，舔、咬、踢瘙痒部，常倚物摩擦；被毛凌乱，拨开患部被毛，患部皮肤出现结节、水泡，破溃后形成痂皮，被毛脱落，皮肤肥厚，皱褶，病马日渐消瘦。在诊断中，可观察动物是否有用嘴轻咬或摩擦患处皮肤的表现。在拥挤的围栏中强迫动物运动，使机体发热，促进皮肤吸收螨虫的抗原或刺激物(分泌物)，激发临床症状。2．2初步判定2．2．1根据临床症状如剧痒、皮肤增厚、有痂皮、脱毛和消瘦等特征可做出初步判定。2．2．2当发现可疑马匹时，需继续观察或采取病料送实验室进一步病原学检查。3病原样品采集与鉴定3．1设备、器械与试剂3．1．1设备、器械显微镜(100×)、恒温箱(4℃～60℃)、离心机(离心速度3000r／rain)、酒精灯、凸刃小刀、棉拭子、骨科刮勺、自封袋、平皿、试管、载玻片等。3．1．2试剂甘油或液体石蜡、10％氢氧化钾(钠)溶液、60％硫代硫酸钠溶液等。3．2显微镜检查3．2．1病料的采集3．2．1．1保定马匹，将患部与健康部交界处被毛剪掉，用通过火焰灭菌的凸刃小刀倾斜45。刮取裸露部皮屑直到皮肤微出血为止。收集刮下的病料进行实验室检查。3．2．1．2用适当大小的棉拭子插入外耳道直到遇到阻力，然后轻轻地旋转并退出。插入外耳道要轻柔细心，注意马匹的反应。或用骨科刮勺刮取马耳内廓耳垢。3．2．1．3将皮屑和耳垢迅速转移到自封袋或平皿内密封后送往实验室待检。3．2．1．4采集病料前，滴一滴甘油或液体石蜡在皮肤或器具上有助于螨虫的收集。】 标准分享网www.bzfxw.com免费下载GB／T27641—20113．2．2检查方法3．2．2．1直接检查法取适量病料，37℃恒温箱中作用15min～30rain，直接放在平皿上进行镜检。3．2．2．2温水检查法将病料浸入40℃～45℃的水中，置恒温箱内，在温热水的作用下，螨虫由皮屑或耳垢内爬出，集成团而沉入水底，1h～2h后，将浸过病料的液体倒出，将沉渣倾人平皿中镜检。3．2．2．3沉淀法将采集的病料置于试管中，加入10％氢氧化钾(钠)溶液，在酒精灯上煮数分钟(或浸泡2h)，然后2000r／min离心沉淀5min，弃上清液，吸取沉淀物，放在载玻片上，进行镜检。3．2．2．4漂浮法将采集的病料置于试管中，加入10％氢氧化钾(钠)溶液，煮沸数分钟(或浸泡2h)，然后2000r／rain离心沉淀5rain，弃上清液，取沉淀物，用蒸馏水将其中的氢氧化钾(钠)浸洗干净，在沉淀物中加入60％硫代硫酸钠溶液使液体满于管口，但不溢出。静置5min～10rain，螨即浮集于液面，可用载玻片直接蘸取镜检。3．3结果判定在显微镜下检查，发现有螨虫体(卵)为阳性结果，未发现螨虫体(卵)为阴性结果(参考附录A和附录B)。四种检查方法只要一种方法鉴定为阳性，则判定为阳性结果。 标准分享网www.bzfxw.com免费下载附录A(资料性附录)螨虫的形态示意圄圄A1Sareoptlcm衄耻mite疥蜻图A2Femaleseabi始mitewithegg雌性疥螨和虫卵 标准分享网www.bzfxw.com免费下载maleCourtesyofDrDietrichBarth，Merial雄性疥螨圈A4Sarcoptesscablei，female．CourtesyofDrDietrichBarth，Merial雌性疥螨图A5P$oroptes，male．CourtesyofDr．DietrichBarth，Merial雄性痒螨蒸麓 图A678Chorioples，femaleCourtlyofDr．DietrichBarth．Merial雌性足螨或皮螨 GB／T27641—20116未发育)图A．10螨的卵(已发育)⑧．一◎ B．1疥螨、痒螨的形态特征附录B(资料性附录)螨虫的形态特征GB／T27641—2011B．1．1疥螨虫体近圆形或椭圆形，背面隆起，乳白或浅黄色，大小为0．2mm～o．5mm。口器短，基部有一对刺；螯肢和须肢粗短。足短而圆，第4对足几乎全部被遮于腹下。躯体后半部有几对杆状刚毛和长鬃。腹面光滑，仅有少数刚毛和4对足。足短粗，分5节，呈圆锥形。前两对足与后两对足之间的距离较大，足的基部有角质内突。雌螨在足1、2、雄螨在足1、2、4有吸盘，吸盘的柄不分节。表皮有皱纹；背面中部有三角形鳞状突及棒状短刺。肛门位于躯体末端。雄螨无生殖吸盘，体末端亦不呈凸缘。B．1．2痒螨虫体呈长圆形，体长0．5mm～o．9mm，肉眼可见。口器长，呈圆锥形；螯肢细长，两趾上有三角形齿；须肢亦细长。躯体背面表皮有细皱纹。肛门位于躯体末端。足较长，特别是前两对。雌虫的第1、2、4对足和雄虫的前3对足都有吸盘，吸盘长在一个分三节的柄上。雌虫的第3对足上各有两根长刚毛。雄虫第4对足特别短，没有吸盘和刚毛。雄虫躯体末端有两个大结节，上各有长毛数根，腹面后部有两个性吸盘；生殖器居于第4基节之间。雌虫躯体腹面前部有一个宽阔的生殖孔，后端有纵裂的阴道，阴道背侧为肛门。B．1．3疥螨和痒螨的区别要点见表B．1。表B．1疥螨和痒螨类的区别要点(自孔繁瑶)足的特点类别肛门位置雌雄疥疥螨属足1、2有长柄不分节的吸盘足1、2、4有长柄不分节的吸盘体末端螨背肛螨属同上体背侧类膝螨属足无吸盘足1、2、4有长柄分节的吸盘体末端痒螨属足1、2、4有长柄分节的吸盘体末端痒足螨属足1、2、4有短柄不分节的吸盘足1、2、3、4有短柄不分节体末端螨的吸盘，第4足极小类足1、2有短柄的吸盘，足1、2、3、4有短柄的吸盘，耳痒螨属体末端第4足极小B．2螨虫卵螨虫卵呈圆形或椭圆形，淡黄色或灰白色，壳薄，大小约80p．m×180,um，产出后经3d～5d孵化为幼虫。'