DB13T 1106-2009 液体乳中青霉噻唑酸钾的测定 高效液相色谱法.pdf 6页

'ICS67.100X16DB13河北省地方标准DB13/T1106-2009液体乳中青霉噻唑酸钾的测定高效液相色谱法DeterminationofPenicilloicacid-potassiuminmilkHPLCmethod2009-05-27发布2009-06-11实施河北省质量技术监督局发布 DB13/T1106-2009月li吕本标准中的附录A为资料性附录。本标准由河北省质量技术监督局提出并归口。本标准起草单位：河北省食品安全重点实验室、河北师范大学生命科学学院、河北医科大学基础医学院、河北省食品质量监督检验研究院。本标准主要起草人：张岩、李挥、刘辰魁、李丛芬、张敬轩、王丽霞、吕品、范斌、康素芬、庞坤。标准分享网www.bzfxw.com免费下载 DB13/T1106-2008液体乳中青霉噻唑酸钾的测定高效液相色谱法范围本标准规定了液体乳中青霉噻唑酸钾的高效液相色谱测定方法。本标准适用于液体乳中青霉噻唑酸钾的测定。本标准的方法检出限：10.0¦Ìg/kg.规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法原理试样中的青霉噻唑酸钾在去除蛋白、脂肪处理后，经高效液相色谱分离，紫外检测器检测，外标法定性定量。4试剂和材料除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。4.1甲醇：色谱纯。www.bzfxw.com4.2磷酸二氢钠。4.3磷酸二氢钠溶液（pH二4.5):4.4无水乙醇。4.5青霉素V钾标准品：纯度）99%04.6青霉噻唑酸钾标准储备液（(1mg/mL)：准确称取0.1000g青霉素V钾置于100mL容量瓶中，加入1mL青霉素酶，室温放置2h后用水定容，摇匀备用。4.7青霉素噻唑酸钾标准工作溶液：根据需要吸取适量青霉噻唑酸钾标准储备液，用空白样品稀释成适当浓度的基质混合标准工作溶液。5仪器5.1高效液相色谱仪：配有紫外检测器（UV)05.2分析天平：感量0.1mg和0.01g各一台。5.3低温高速离心机。5.4水相微孔滤膜：0.45¦Ìm06测定步骤6.1试样溶液的制备准确称取25g（精确到0.01g）牛乳于50mL离心管中，4000r/min低温(4¡ãC）离心10min；去除上层脂肪层；再加入25mL无水乙醇,20000r力min低温(4¡ãC)离心10min，取上清液定容至50mL,经0.45¦Ìm微孔滤膜过滤，待高效液相色谱分析。6.2液相色谱条件 DB13/T1106-2008检测波长：230nm0色谱柱：ODSC185¦Ìm,250mmX2.1mm或相当者。流动相：磷酸二氢钠溶液：甲醇二50:500流速：1mL/min0柱温：30¡ãC0进样量：20匹。6.3测定用青霉噻唑酸钾标准储备溶液配成的基质标准溶液分别进样，以标准工作溶液浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准工作曲线。用标准工作曲线对样品进行定量，样品溶液中青霉噻唑酸钾的响应值均应在仪器测定的线性范围内。结果计算从标准工作曲线上得到试样中相应的青霉噻唑酸钾浓度后，结果按公式（1)计算：X＝cxVx1000=-(1)mxFx1000式中：h＝一一试样中被测组分残留量，单位为微克每千克（拼g/kg)¡ãc―从标准工作曲线得到的试样溶液中被测组分的浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL)¡ã不一试样溶液定容体积，单位为毫升（mL)0m―试样质量，单位为克（g)0尸－一稀释倍数。精密度www.bzfxw.com在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%0标准分享网www.bzfxw.com免费下载 DB13/T1106-2008附录A（资料性附录）青霉噻唑酸钾标准物质色谱图MIA,A14233rm;"。一标“确，，，八、｜；、www.bzfxw.com图A.1青霉噻唑酸钾标准物质色谱图 www.bzfxw.com标准分享网www.bzfxw.com免费下载'