药物分析第七版习题及部分答案.doc 106页

'第一章药物分析与药品质量标准一、基本要求1．掌握：药物分析的性质和任务，药品的定义和特殊性，药品质量和稳定性研究的目的与内容，药品标准制定的方法和原则。2．熟悉：药品标准，中国药典的内容和进展，主要国外药典的内容。3．了解：药品质量管理规范，药品检验的基本程序。二、基本内容本章内容涵盖《药物分析》第7版的绪论和第一章药品质量研究内容与药典概况。（一）基本概念药物(drugs)是指用于预防、治疗、诊断人的疾病，有目的地调节人的生理机能并规定有适应证或者功能主治、用法和用量的物质。药品(medicinalproducts)通常是指由药物经一定的处方和工艺制备而成的制剂产品，是可供临床使用的商品。药物通常比药品表达更广的内涵。药品是用于治病救人、保护健康的特殊商品，具有以下特殊性：①治病与致病的双重性；②严格的质量要求性；(爹社会公共福利性。药物分析(pharmaceuticalanalysis)是研究药物质量规律、发展药物质量控制方法的科学。药物分析是药学科学的重要分支学科，是药学研究的重要技术手段，任务就是对药物进行全面的分析研究，确立药物的质量规律，建立合理有效的药物质量控制方法和标准，保证药品的质量稳定与呵控，保障药品使用的安全、有效和合理。（二）药品标准药品标准（也俗称为药品质量标准）系根据药物自身的理化与生物学特性，按照批准的来源、处方、生产工艺、贮藏运输条件等所制定的、用以检测药品质量是否达到用药要求并衡量其质量是否稳定均一的技术规定。国家药品标准，是指国家食品药品监督管理局(SFDA)颁布的《中华人民共和国药典》、药品注册标准和其他药品标准，其内容包括质量指标、检验方法以及生产工艺等技术要求。国家药品监督管理部门组织药典委员会，负责国家药品标准的制定和修订。国家药品标准是药品生产、供应、使用、检验和药政管理部门共同遵循的法定依据。 药品标准的内涵包括：真伪鉴别、纯度检查和品质要求三个方面，药品在这三方面的综合表现决定了药品的安全性、有效性和质量可控性。《中华人民共和国药典》简称《中国药典》，收载国家药品标准。现行《中国药典》2010年版由一部、二部、三部及其增补本组成，内容分别包括凡例、正文和附录。除特别注明版次外，《中国药典》均指现行版。国家药品标准由凡例与正文及其引用的附录共同构成。凡例(generalnotices)是为正确使用《中国药典》进行药品质量检定的基本原则，是对《中国药典》正文、附录及与质量检定有关的共性问题的统一规定。正文(monograph。)就是药品标准。附录（appendices）主要收载制剂通则、通用检测方法和指导原则。指导原则系为执行药典、考察药品质量、起草与复核药品标准等所制定的指导性规定。主要国外药典有：美国药典(USP-NF)、英国药典(BP)、欧洲药典(EP)、日本药局方(JP)和国际药典(Ph.Int.)。（三）药品标准制定与稳定性试验药品标准一经制定和批准，即具有法律效力。所以，药品标准的制定必须坚持“科学性、先进性、规范性和权威性”的原则。其建壶的分析方法须采用科学的方法和指标进行验证，验证的内容包括专属性、准确度与精密度、线性与范围、检测限与定量限、耐用性等。药品稳定性试验的目的是考察药物在温度、湿度、光线等因素的影响下随时间变化的规律，为药品的生产、包装、贮存、运输条件提供科学依据，同时通过试验建立药品的有效期，以保障用药的安全有效。稳定性试验分为影响因素试验、加速试验与长期试验。影响因素试验是将药品置于剧烈的条件下进行的稳定性考察，方法为高温试验、高湿度试验和强光照射试验。其目的是探讨药物的固有稳定性、了解影响其稳定性的因素及可能的降解途径与降解产物，为制剂生产工艺、包装、贮存条件和建立降解产物分析方法提供科学依据；加速试验是将药物置于模拟极端气候条件下进行的稳定性考察。方法是在温度40C±2℃，相对湿度75%±5%的条件下进行考察。其目的是通过加速药物的化学或物理变化，探讨药物的稳定性，为制剂设计、包装、运输、贮存提供必要的资料；长期试验是将药物置于接近实际贮存的条件（市售包装，温度25C+2aC，相对湿度600-/0±10%）下进行的稳定性考察。其目的为制订药物的有效期提供依据。（四）药品检验 药品检验工作的基本程序～般为取样（检品收检）、检验、留样、报告。取样必须具有科学性、真实性和代表性，取样的基本原则应该是均匀、合理；常规检验以国家药品标准为依据，按照规定方法和有关SOP进行检验，根据检验结果书写检验报告书。检验记录必须做到：记录原始、真实，内容完整、齐全，书写清晰、整洁。根据各项检验结果对检品作出明确的结论。（五）药品质量管理规范为了在药物的研究、开发、生产、经营、使用和监管等各环节实行全程的质量跟踪与管理，国务院药品监督管理部门(SFDA)依法制定了相关的管理规范(GLP、GCP、GMP、GSP和GAP等）。使药品质量控制和保证要求从质量设计（QualitybyDesign）、过程控制(QualitybyProcess)和终端检验(QualitybyTest)三方面来实施，保障用药安全。（六）注册审批制度与ICH为了协调各国对药品的审批注册的不同要求，由欧盟、美国和日本三方的药品注册管理当局和制药企业管理机构发起了“人用药品注册技术要求国际协调会”(IntemationalConferenceonHarmonisationofTechnicalRequirementsforRegistrationofPharmaceuticalsforHumanUse，ICH）。ICH的目的是通过协调一致，使三方在药品注册技术要求上取得共识，为药品研发、审批和上市制定统一的国际性技术指导原则。ICH协调的内容包括药品质量（Quality，以代码Q标识）、安全性（Safety，以代码S标识）、有效性（Efficacy，以代码E标识）和综合要求（Multidisciplinary，以代码M标识）四方面的技术要求。三、习题与解答（一）最佳选择题D1．ICH有关药品质量昀技术要求文件的标识代码是A．EB．MC．PD．QE．SB2．药品标准中鉴别试验的意义在于A．检查已知药物的纯度B．验证已知药物与名称的一致性C．确定已知药物的含量D．考察已知药物的稳定性E．确证未知药物的结构A3．盐酸溶液(9→1000)系指A．盐酸1.0ml加水使成l000ml的溶液B．盐酸1.0ml加甲醇使成l000ml的溶液C．盐酸1.0g加水使成l000ml的溶液D．盐酸1.0g加水l000ml制成的溶液E．盐酸1.0ml加水l000ml制成的溶液 D4．中国药典凡例规定：称取“2.0g”，系指称取重量可为A.1.5~2.5gB.1.6~2.4gC.1.45～2.45gD.1.95~2.05gE.1.96-2.04gD5．中国药典规定：恒重，除另有规定外，系指供试品连续两次干燥或炽灼后的重量差异在A.0.0lmgB.0.03mgC.0.1mgD.0.3mgE.0.5mgE6．原料药稳定性试验的影响因素试验，疏松原料药在开口容器中摊成薄层的厚度应A.>20cmB.≤20cmC.≤l0cmD.≤5cmE.≤l0mmE7．下列内容中，收载于中国药典附录的是A．术语与符号B．计量单位C．标准品与时照品D．准确度与精密度要求E．通用检测方法E8．下列关于欧洲药典(EP)的说法中，不正确的是A．EP在欧盟范围内具有法律效力B．EP不收载制剂标准C．EP的制剂通则中各制剂项下包含：定义（Definition）、生产(Production)和检查(Test)D．EP制剂通则项下的规定为指导性原则E．EP由WHO起草和出版（二）配伍选择题[9—10]A.SFDAB.ChPC.GCPD.GLPE.GMP下列管理规范的英文缩写是D9．荮品非临床研究质量管理规范E10.药品生产质量管理规范[11—13JA．溶质lg(ml)能在溶剂不到1ml中溶解B．溶质lg(ml)能在溶剂1-不到l0ml中溶解C．溶质lg(ml)能在溶剂10-．不到30ml中溶解D．溶质1g(ml)能在溶剂30~不到l00ml中溶解E．溶质lg(ml)能在溶剂100一不到l000ml中溶解 下列溶解度术语系指B11.易溶C12.溶解E13.微溶[14—17JA.2~10℃B.10_30℃C.40～50℃D.70~80℃E.98~100℃下列关于温度的术语系指D14.热水C15.温水A16.冷水B17.常温[18~19]A.BPB.ChPC.EPD.Ph.Int.E.USP下列药典的英文缩写是A18.英国药典C19.欧洲药典（三）多项选择题20.下列方面中，ICH达成共识，并已制定出相关技术要求的有ABCDA．质量(Q)B．安全性(S)C．有效性(S)D．综合要求(M)E．均一性(U)21．《中国药典》内容包括BCDA．前言B．凡例C．正文D．附录E．索引22.下列关于《中国药典》凡例的说法中，正确的有ABCA．《中国药典》的凡例是《中国药典》的内容之一B．《中国药典》的凡例是为正确使用《中国药典》进行药品质量检定的基本原则C．《中国药典》的凡例是对其正文、附录及与质量检定有关的共性问题的统一规定D．《中国药典》的凡例收载有制剂通则E．《中国药典》的凡例收载有通用检测方法23.药品标准中，“性状”项下记载有ABCDE A．外观B．臭C．味D．溶解度E．物理常数24.药品标准中，“检查”项系检查药物的ABCDA．安全性B．有效性C．均一性D．纯度E．稳定性25.单一对映体的绝对构型确证常用的方法ABCDEA．比旋度（[a]）测定B．手性柱色谱C．单晶X-衍射D．旋光色散(ORD)E．圆二色谱(CD)26．在固体供试品比旋度计算公式＝ABCA．f为测定时的温度(℃)B．D为钠光谱的D线C．n为测得的旋光度D．Z为测定管长度(cm)E．c为每1ml溶液中含有被测物质的重量(g)27.原料药稳定性试验的内容一般包括ABCA．影响因素试验B．加速试验C．长期试验D．干法破坏试验E．湿法破坏试验28.国家药品标准的构成包括BCDA．前言B．凡例C．正文D．附录E．索引（四）是非判断题29.药物是指用于预防、治疗、诊断疾病，并规定有适应证的物质(T)30.药物分析是收载药品质量标准的典籍(F)31.药品标准是对药品质量、规格及检验方法所作的技术规定(T32.原料药的百分含量(%)如规定上限为100%以上时，系指其可能的含有量(F)33．《中国药典》收载的药品中文名称均为法定名称(T)34.熔点测定中，“全熔”系指供试品在毛细管内开始局部液化出现明显液滴时的温度(F)35.百分吸收系数（）中，1%为l00ml溶液中含有1mg的被测物质(F)36.化学原料药含量测定方法选择，要求方法准确度高、精密度好，一般首选容量分析法(T)37.化学原料药稳定性影响因素试验中，高温试验系将供试品于60C温度下放置IO天，于第5天和第10天取样，按稳定性重点考察项目进行检测(T)38.国家药品标准，是指国家食品药品监督管理局颁布的《中华人民共和国药典》、药品注册标准和其他药品标准(T)（五）简答题 39.简述《中国药典》附录收载的内容。药典附录（appendices）主要收载制剂通则、通用检测方法和指导原则。制剂通则系按照药物的剂型分类，针对剂型特点所规定的基本技术要求。通用检测方法系正文品种进行相同检查项目的检测时所应采用的统一的设备、程序、方法及限度等。指导原则系为执行药典、考察药品质量，起草与复核药品标准等所制定的指导性规定。40.简述药品标准中药品名称的命名原则。药品中文名称须按照《中国药品通用名称》收载的名称及其命名原则命名。《中国药典》收载的药品中文名称均为法定名称；药品英文名称除另有规定外，均采用国际非专利药名    有机药物的化学名称须根据中国化学会编撰的《有机化学命名原则》命名，母体的选定须与国际纯粹与应用化学联合会的命名系统一致。41.简述药品标准的制定原则。42.简述中国药典凡例的性质、地位与内容。凡例( General Notices)是正确使用《中国药典》进行药品质量检定的基本原则，是对《中国药典》正文、附录及与质量检定有关的共性问题的统一规定。     凡例和附录中采用“除另有规定外”这一用语，表示存在与凡例或附录有关规定不一致的情况时，则在正文品种中另作规定，并按该规定执行。     凡例中有关药品质量检定的项目规定包括：名称及编排，项目与要求，检验方法和限度，标准品、对照品、对照药材、对照提取物或参考品，计量，精确度，试药、试液、指示剂，动物试验，说明书、包装、标签等。 43.简述药品检验工作的机构和基本程序。 第二章药物的鉴别试验一、基本要求1．掌握：鉴别试验的目的，药物性状和物理常数的测定及其对药物鉴别的作用，常用鉴别方法与选择。2．熟悉：鉴别试验的影响因素与注意事项。3．了解：鉴别试验方法的验证。二、基本内容药物的鉴别试验是根据药物的分子结构、理化性质，采用物理、化学或生物学方法来判断药物的真伪。它是药品质量检验工作中的首项任务，只有在药物鉴别无误的情况下，进行药物的杂质检查、含量测定等分析才有意义。中国药典和世界各国药典所收载的药品项下的鉴别试验方法，均为用来证实贮藏在有标签容器中的药物是否为其所标示的药物，而不是对未知物进行定性分析。这些试验方法虽有一定的专属性，但不足以确证其结构，因此不能赖以鉴别未知物。如《中国药典》凡例中对药物鉴别的定义为：鉴别项下规定的试验方法，系根据反映该药品某些物理、化学或生物学等特性所进行的药物鉴别试验，不完全代表对该药品化学结构的确证。而化学药物的结构确证不同于上述的药物鉴别试验，其主要任务是确认所制备原料药的结构是否正确，适用于未知化合物的鉴别或目标对象的结构确认。鉴别试验目的：真伪鉴别，非未知鉴定；鉴别试验的种类包括性状鉴别、一般鉴别、专属鉴别。常用一般鉴别试验右：丙二酰脲类、托烷生物碱类、芳香第一胺类、有机氟化物、无机金属盐类、有机酸盐、无机酸盐等。鉴别试验常用方法：化学、光谱、色谱、显微、生物学、指纹图谱与特征图谱鉴别法。鉴别试验的条件：浓度、试验温度、酸碱度、试验时间；鉴别试验方法验证内容：专属性和耐用性。三、习题与解答（一）最佳选择题A1．在药品质量标准中，药品的外观、臭、昧等内容归属的项目是A．性状B．-般鉴别C．专属鉴别D．检查E．含量测定C2．取供试品少量，置试管中，加等量的二氧化锰，混匀，加硫酸湿润，缓缓加热，即产生氯气，能使用水湿润的碘化钾淀粉试纸显蓝色。下列物质可用上述试验鉴别的是A．托烷生物碱类B．酒石酸盐C．氯化物 D．硫酸盐E．有机氟化物A3．中国药典中所用的何首乌的鉴别方法是A．高效液相色谱法B．质谱法C．红外光谱法D．显微鉴别法E．X射线粉末衍射法（二）配伍选择题[4—5]A．取供试品的稀溶液，加三氯化铁试液1滴，即显紫色。B．取供试品约lOmg，加发烟硝酸5滴，置水浴上蒸干，得黄色的残渣，放冷，加乙醇2-3滴湿润，加固体氢氧化钾一小粒，即显深紫色。C．取铂丝，用盐酸湿润后，蘸取供试品，在无色火焰中燃烧，火焰显鲜黄色。D．取供试品：加过量氢氧化钠试液后，加热，即分解，发生氨臭；遇用水湿润的红色石蕊试纸，能使之变蓝色，并能使硝酸亚汞试液湿润的滤纸显黑色。E．取供试品溶液，滴加氯化钡试液，即生成白色沉淀；分离，沉淀在盐酸或硝酸中均不溶解。以下各类药物的鉴别试验是A4．水杨酸盐类D5．托烷生物碱类[6—8]A．吸收光谱较为简单，曲线形状变化不大，用作鉴别的专属性远不如红外光谱。B．供试品制备时研磨程度的差异或吸水程度不同等原因，均会影响光谱的形状。C．测定被测物质在750~2500nm(12800~4000cm"1)光谱区的特征光谱并利用适宜的化学计量学方法提取相关信息对被测物质进行定性、定量分析。D．利用原子蒸气可似吸收由该元素作为阴极的空心阴极灯发出的特征谱线特征及供试溶液在特征谱线处的最大吸收和特征谱线的强度减弱程度进行定性、定量分析。E．用准分子离子峰确认化合物，进行二级谱扫描，推断结构化合物断裂机制，确定碎片离子的合理性。上述说法中，用来描述下列光谱鉴别法的是A6．紫外光谱鉴别法C7．红外光谱鉴别法E8．质谱鉴别法 [9—10]A．三氯化铁呈色反应B．重氮化一偶合反应C．Vitali反应D．四氮唑反应E．茚三酮反应下列各类药物的呈色反应鉴别法是A9．水杨酸类D10.肾上腺皮质激素类（三）多项选择题ACD11.芳香第一胺类药物鉴别试验使用的试剂有A．稀盐酸B．稀醋酸C．亚硝酸钠D．B一萘酚E．硝酸银12.下列关于质谱鉴别法的说法中，正确的有ABCDA．将被测物质离子化后，在高真空状态下按离子的质荷比(m/z)大小分高。B．使用高分辨率质谱可得到离子的精确质量数，然后计算出该化合物的分子式。C．分子离子的各种化学键发生断裂后形成碎片离子，由此可推断其裂解方式，得到相应的结构信息。D．鉴定化合物结构的重要参数有化学位移6、峰面积、偶合常数、弛豫时间。E．利用原子蒸气可以吸收由该元素作为阴极的空心阴极灯发出的特征谱线的特性，根据供试溶液在特征谱线处的最大吸收和特征谱线的强度减弱程度可以进行定性、定量分析。CDE13.用于鉴别硝酸盐的试剂有A．硫酸B．醋酸铅C．硫酸亚铁D．铜丝E．高锰酸钾（四）是非判断题14.旋光度是药物的物理常数(T)15.绘制药物盐酸盐红外光谱时，若样品与溴化钾之间发生离子交换反应时，也可采用溴化钾作为制片基质(F)16.无机金属盐焰色反应中钠离子显紫色；钾离子显鲜黄色；钙离子显砖红色(F)（五）筒答题17.简述药物分析中常用的鉴别方法。18.简述影响鉴别试验的条件。19.简述红外光谱鉴别法试样制备方法。压片法、糊法、膜法、溶液法（六）设计题20.已知普鲁卡因的结构式如下，请根据药物的结构设计三种鉴别方法。 （宋沁馨） 第三章药物的杂质检查一、基本要求1．掌握：药物中杂质的来源以及杂质的分类；杂质限量的概念和计算；一般杂质和特殊杂质的检查方法。2．熟悉：药物中杂质的鉴定方法。3．了解：热分析法的基本原理及其在杂质研究中的应用。二、基本内容ChP将任何影响药品纯度的物质均称为杂质。药物的纯度是指药物的纯净程度，药物中的杂质是影响药物纯度的主要因素。药物的纯度需要从药物的外观性状、理化常数、杂质检查和含量测定等方面作为一个有联系的整体来综合评定。药物的纯度检查也可称为杂质检查。药物中的杂质主要有两个来源：一是由生产过程中引入；二是在贮藏过程中受外界条件的影响，引起药物理化特性发生变化而产生。了解药物中杂质的来源，可以有针对性地制订出药物中杂质的检查项目和检查方法。药物中的杂质有多种分类方法，按照其来源可以分为一般杂质和特殊杂质：一般杂质是指在自然界中分布较广泛，在多种药物的生产和贮藏过程中容易引入的杂质；特殊杂质是指在特定药物的生产和贮藏过程中引入的杂质，这类杂质随药物的不同而不同。按照杂质的毒性分类，可以分为毒性杂质和信号杂质，其中信号杂质一般无毒，但其含量的多少可以反映出药物的纯度情况及生产工艺的正常与否。按照化学粪别和特性分为：无机杂质、有机杂质和残留溶剂，其中有机杂质又可以分为特定杂质和非特定杂质。杂质的限量为药物中所含杂质的最大允许量，通常用百分之几或百万分之几表示。计算公式为：L(%)或杂质限量的控制方法包括两种：限量检查法和对杂质进行定量测定。进行限量检查时，多数采用对照法，还可以采用灵敏度法和限值法。药物中杂质的检查主要依据药物与杂质在物理性质或化学性质上的差异来进行。杂质的控制要合理，即合理确定杂质检查项目与限度，合理选择杂质检查方法。用于杂质检查的分析方法要求专属、灵敏，检测限一定要符合质量标准中对杂质限度的要求，检测限不得大于该杂质的报告限度。常用的检查方法有：化学方法、色谱方法、光谱方法、热分析法、酸碱度检查法和物理性状检查法。其中，化学方法包括：显色反应检查法、沉淀反应检查法、生成气体检查法和滴定法；色谱方法包括：薄层色谱法(TLC)、高效液相色谱法( HPLC)、气相色谱法(GC)、毛细管电泳法(CE)，由于色谱法可以利用药物与杂质的色谱性质的差异，能有效地将杂质与药物进行分离和检测，因而色谱法广泛地应用于药物中杂质的检查，是检查药物中有关物质的首选方法；光谱方法包括：可见一紫外分光光度法、红外分光光度法、原子吸收分光光度法；常用的热分析法有：热重分析法(TGA)、差热分析法(DTA)、差示扫描量热法(DSC)及相关联用技术；酸碱度检查法包括：酸碱滴定法、指示液法、pH测定法；物理性状检查法是根据药物与杂质在性状上的不同，如臭味和挥发性的差异、颜色的差异、溶解行为的差异和旋光性等的差异进行检查。药物中一般杂质检查的内容包括：氯化物检查法、硫酸盐检查法、铁盐检查法、重金属检查法、砷盐检查法、干燥失重测定法、水分测定法、炽灼残渣检查法、易炭化物检查法、残留溶剂测定法、溶液颜色检查法、溶液澄清度检查法。药物中特殊杂质的研究是药物质量控制的重要部分，可以为药物的工艺研究、质量研究、稳定性研究、药理毒理及临床研究提供重要信息。新原料荮和新制剂中的杂质，表观含量在0.1%及其以上的杂质以及表观含量在0.1%以下的具有强烈生物作用的杂质或毒性杂质，要求定性或确证其结构。杂质的鉴定方法主要有：有杂质对照品鉴定法和无杂质对照品鉴定法，前者系通过合成杂质对照品进行鉴定，适用于样品中的杂质量较小，且杂质的分离纯化较为困难；后者系从药物中分离制备特定杂质进行鉴别，适用于药物中被鉴定的杂质量较大时的情况。三、习题与解答（一）最佳选择题B1．下列属于信号杂质的是A．砷盐B．硫酸盐C．铅D．氰化物E．汞D2．酶类药物中酶类杂质的检查可采用的方法是A．HPLC法B．TLC法C．UV法D．CE法E．GC法B3．药物中无效或低效晶型的检查可以采用的方法是A．高效液相色谱法B．红外分光光度法C．可见一紫外分光光度法D．原子吸收分光光度法E．气相色谱法D4．原子吸收分光光度法检查药物中金属杂质时，通常采用的方法是A．内标法B．外标法C．加校正因子的主成分自身对照法D．标准加入法E．不加校正因子的主成分自身对照法C5．氯化物检查法中，适宜的酸度是 A．50ml中加2ml稀硝酸B．50ml中加5ml稀硝酸C．50ml中加l0ml稀硝酸D．50ml中加5ml硝酸E．50ml中加l0ml硝酸C6．氯化物检查法中，用以解决供试品溶液带颜色对测定干扰的方法是A．活性炭脱色法B．有机溶剂提取后检查法C．内消色法D．标准液比色法E．改用他法C7．BP采用进行铁盐检查的方法是A．古蔡氏法B．硫氰酸盐法C。巯基醋酸法D．硫代乙酰胺法E．硫化钠法D8．采用硫氰酸盐法检查铁盐时，若供试液管与对照液管所呈硫氰酸铁的颜色较浅不便比较时，可采取的措施是A．内消色法B．外消色法C．标准液比色法D．正丁醇提取后比色法E．改用他法B9．下列试液中，用作ChP重金属检查法中的显色剂的是A．硫酸铁铵试液B．硫化钠试液C．氰化钾试液D．重铬酸钾试液E．硫酸铜试液D10.硫代乙酰胺法检查重金属时，受溶液pH影响较大，适合的pH是A.11.5B.9.5C.7.5D.3.5E.1.5B11．采用硫代乙酰胺法检查重金属时，供试品如有色需在加硫代乙酰胺前在对照溶液管中加入的是A．过氧化氢溶液B．稀焦糖溶液C．盐酸羟胺溶液D．抗坏血酸E．过硫酸铵D12.采用硫代乙酰胺法检查重金属时，供试品如有微量高铁盐存在，需加入的是A．碘试液B．重铬酸钾溶液C．高锰酸钾溶液D．抗坏血酸E．过硫酸铵A13.采用炽灼后硫代乙酰胺法检查重金属时，应控制的炽灼温度范围是A.500–600℃B.600-700℃C.700-800℃D.800一900℃E.900–l000℃B14.乳酸钠溶液中重金属的检查应采用的方法是A．硫代乙酰胺法B．炽灼后硫代乙酰胺法C．古蔡氏法 D．硫化钠法E．硫氰酸盐法B15.USP收载的砷盐检查法是A．古蔡氏法B．Ag(DDC)法C．次磷酸法E．亚硫酸法D．白田道夫法C16.ChP古蔡氏法检查砷盐，加入碘化钾的主要作用是A．将五价的砷还原为砷化氢B．将三价的砷还原为砷化氢C．将五价的砷还原为三价的砷D．将氯化锡还原为氯化亚锡E．将硫还原为硫化氢A17.在古蔡氏检砷法中，加入醋酸铅棉花的目的是A．除去硫化氢的影响B．防止瓶内飞沫溅出C．使砷化氢气体上升速度稳定D．使溴化汞试纸呈色均匀E．将五价砷还原为砷化氢B18.ChP采用Ag(DDC)法检查砷盐时，为吸收反应中产生的二乙基二硫代氨基甲酸，加入的试剂是A．吡啶B．三乙胺一三氯甲烷C．二氯甲烷D．氢氧他钠E．正丁醇C19．ChP检查葡萄糖酸锑钠中的砷盐时，采用的方法是A．古蔡氏法B．Ag(DDC)法C．白田道夫法D．次磷酸法E．亚硫酸法A20.费休氏法测定水分时，水与费休氏试液作用的摩尔比是A．水一碘一二氧化硫一甲醇一吡啶(1：1：1：1：3)B．水一碘一二氧化硫一甲醇一吡啶(1：1：1：1：5)C．水一碘一三氧化硫一甲醇一吡啶(1：1：1：1：3)D．水一碘一三氧化硫一甲醇一吡啶(1：I：1：1：5)E．水一碘一三氧化硫一甲醇一丙酮(1：1：1：1：3)C21．ChP中收载的残留溶剂检查法是A．HPLC法B．TLC法C．GC法D．TGA法E．DSC法D22.GC法测定三氯甲烷的残留量，为得到较高的灵敏度，宜采用的检测器是A.UVB.DADC.FIDD.ECDE.NPDA23.下列有机溶剂中，属于一类溶剂的是 A．四氯化碳B．乙腈C．氯苯D．三氯甲烷E．甲醇B24.浊度标准液的配制是利用乌洛托品在酸性条件下水解，水解产物与肼缩合，产生不溶于水的白色混浊，该白色混浊是A．碗酸肼B．甲醛腙C．甲酰胺D．乙醛腙E．乙酰胺D25.下列方法中，用于药物中光学异构体杂质检查的是A．紫外一可见分光光度法B．红外分光光度法C．原子吸收分光光度法D．手性高效液相色谱法E．薄层色谱法（二）配伍选择题[26—28JA．以某类杂质作为项目名称B．以杂质的特性作为项目名称C．以杂质的化学名作为项目名称D．根据检测方法选用项目名称E．以杂质和药物的化学性质区别作为项目名称下列杂质的命名的依据是C26.肾上腺素中的“酮体”D27.易炭化物A28.山梨醇中的“还原糖”[29~31]A．超出此限度的杂质均应在检测报告中报告，并应报告具体的检测数。B．超出此限度的杂质均应进行定性分析，确定其化学结构。C．质量标准中一般允许的杂质限度，如制订的限度高于此限度，则应有充分的依据。D．超出此限度的杂质均应进行定性定量分析，确定其化学结构及含草。E．以上均不是。下列杂质限度的定义是B29.identificationthresholdA30.reportingthresholdC31.qualificationthreshold[32~34]A．杂质与试剂产生颜色C．杂质与试剂产生气体B．杂质与滴定剂发生氧化还原反应 D．杂质与滴定剂发生中和反应E．杂质与试剂产生沉淀下列杂质采用化学法检查的原理是B32.硫酸亚铁中高铁盐的检查A33.氯硝柳胺中5一氯水杨酸的检查E34.盐酸肼屈嗪中游离胼的检查[35—38]A．硝酸银试液B．硫代乙酰胺试液C．氯化钡试液D．盐酸、锌粒E．硫氰醵铵试液下列杂质的检查所用到的试剂是E35.铁盐C36.硫酸盐A37.氯化物D38.砷盐[39~42]A．硝酸B．氯化亚锡C．碘化钾D．无水碳酸钠E．氢氧化钙下列药物采用古蔡氏法检查砷盐时，应先加入A39.硫代硫酸钠B40.枸橼酸铁铵E41.呋塞米D42.苯甲酸钠[43~44]A．遇硫酸易炭化或易氧化呈色的微量有机杂质B．有色杂质C．易氧化呈色的无机杂质D．水分及其他挥发性杂质E．有机药物或挥发性无机药物中非挥发性无机杂质下列项目检查的杂质是A43.易炭化物 E44.炽灼残渣（三）多项选择题AE45.药物中杂质限量的表示方法有A．百分之几B．千分之几C．万分之几D．十万分之几E．百万分之几ACE46．下列药物中杂质检查的方法系根据药物与杂质在性状上的差异进行的有A．乙醇中杂醇油的检查B．氯硝柳胺中2一氯4-硝基苯胺的检查C．盐酸胺碘酮中游离碘D．地蒽酚的酸度检查E．硫酸阿托品中莨菪碱的检查ABD47．采用硫氰酸盐法检查铁盐时，加入过硫酸铵的作用有A．将供试品中Fe2+氧化成Fe3+B．防止光线使硫氰酸铁还原C．防止Fe3+水解D．防止硫氰酸铁分解褪色E．使溶液色泽梯度明显，易于区别CD48.盐酸氟奋乃静中重金属的检查可以采用的容器有A．瓷坩埚B．铝坩埚C．铂坩埚D．石英坩埚E．瓷蒸发皿49．BP中收载的砷盐检查法有ACA．古蔡氏法B．Ag(DDC)法C．次磷酸法D．白田道夫法E．亚硫酸法BE50.ChP收载的测定药物中水分的方法有A．热重分析法B．费休氏法C．差热分析法D．差示扫描量热法E．甲苯法AD51.ChP采用费休氏法测定药物中的水分，到达指示终点的方法有A．溶液自身颜色变化B．加入淀粉指示液C．加入酚酞指示液D．永停法E．加入结晶紫指示液52．ChP中采用GC法测定残留溶剂，可以采用的测定方法有ABCA．毛细管柱顶空进样等温法B．毛细管柱顶空进样程序升温法C．溶液直接进样法D．填充柱顶空进样等温法E．填充柱顶空进样程序升温法ACE53.原料药和新制剂中的杂质，需要对其定性或确证其结构的有A．表观含量在0.1%及其以上的杂质 B．表观含量在0.010-10一0.1%的杂质C．表观含量在0.1%以下的具有强烈生物作用的杂质或毒性杂质D．表观含量在0.01%以下的具有强烈生物作用的杂质或毒性杂质E．最大日剂量$2g的原料药中含量≥1.Omg的杂质（四）是非判断题54.光谱法是检查药物中“有关物质”的首选方法(F)55.加校正因子的主成分自身对照测定法适用于未知杂质的控制(F)56.采用TLC法检查药物中的杂质，只需规定单个杂质的限度(F)57.古蔡氏检砷法中需比较供试品砷斑与标准砷斑的面积大小来判断供试品中的砷盐是否符合限量规定(F)58.费休氏法测定水分时，加入无水甲醇仅仅是作为溶剂(F)59.残留溶剂甲酰胺适于采用顶空法测定(F)60.“恒重”指连续两次干燥或炽灼后称重的差异在0.5mg以下的重量(F)61.药物的澄清度检查多数以水为溶剂，但有时酸、碱或有机溶剂也可作为溶剂(T)（五）简答题62.药用规格与化学试剂规格有何不同？63.杂质的来源途径有哪些？杂质包括哪些种类？64.简述薄层色谱法用于杂质限量检查的几种方法。65.简述高效液相色谱法用于杂质检测的几种方法及其适用条件。66.检查重金属时其限度以何种金属的限度表示？原因是什么？ChP2010收载了几种检查方法？分别适用于哪些药物中的重金属检查？67.砷盐检查的方法有哪些？每种方法的原理是什么？68.简述药物中有机杂质鉴定的方法。（六）计算题69.维生素C中重金属的检查：取本品1．0g，加水溶解成25ml，要求重金属的含量不超过百万分之十，应量取标准铅溶液(0.0lmgPb/ml)多少毫升？70.富马酸亚铁中砷盐的检查：取本品0.50g，加无水碳酸钠0.5g，混匀，加溴试液4ml，置水浴上蒸干后，在500~600C炽灼2小时，放冷，残渣加溴一盐酸溶液l0ml与水15ml使溶解，移至蒸馏瓶中，加酸性氯化亚锡试液1ml，蒸馏，流出液导人贮有水5ml的接 收器中，至蒸馏瓶中约剩5ml时，停止蒸馏，馏出液加水适量使成28ml，按古蔡氏法检查砷盐。(1)加入无水碳酸钠的作用是什么？(2)加入酸性氯化亚锡的作用是什么？(3)加入浓度为lAs/ml的标准砷溶液2ml，在该测定条件下，砷盐的限量是多少？71．氨苯砜中检查“有关物质”采用11I．C法：取本品，精密称定，加甲醇适量制成10mg/ml的溶液，作为供试品溶液。取供试品溶液适量加甲醇稀释制成20g／ml的溶液，作为对照溶液。取上述两种溶液各lolll点于同一块薄层板上，展开。供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液的主斑点比较，颜色不得更深。请计算样品申“有关物质”的限量。（七）设计题72.贝诺酯中氯化物的检查，规定氯化物的限度为0.01%，请据此设计本药物中氯化物的检查方法（包括取样量、所用标准溶液与试液、检查方法）。73.司可巴比妥钠中重金属的检查，规定含重金属不得超过百万分之二十，请据此设计本药物的重金属检查方法（包括取样量、所用标准溶液与试液、检查方法）。 第四章药物的含量测定方法与验证一、基本要求1．掌握：药物含量的容量、光谱和色谱分析法，滴定度与含量计算，色谱系统适用性试验的内容、要求及相关计算，样品分析的前处理方法，药物分析方法的验证与内容。2．熟悉：各类分析法的基本原理与条件选择，样品分析前处理方法的适用范围，不同分析方法对验证内容的基本要求。3．了解：滴定液的配制与标定，分析仪器的校正和检定。二、基本内容药物的含量系指药物中所含主成分的量，是评价药物质量的重要指标。药物的含量测定则是运用化学、物理学或生物学及微生物学的方法测定药物的含量，它是评价药物质量的主要手段，也是药品质量标准的重要内容。药物的含量测定可分为两大类，即基于化学或物理学原理的“含量测定”和基于生物学原理的“效价测定”。其中，效价测定法（包括生物检定法、微生物检定法、酶法）的方法建立与验证过程各具特殊性，本章将主要探讨基于化学或物理学原理的“含量测定”。可供药物含量测定的分析方法主要包括容量分析法、光谱分析法和色谱分析法。其中，容量分析法操作简便，结果准确，方法耐用性高，但方法缺乏专属性，主要适用于对结果准确度与精密度要求较高的样品测定；光谱分析法简便、快速，灵镦度高，并具有一定的准确度，但方法专属性稍差，主要适用于对灵敏度要求较高、样本量较大的分析项目；色谱分析法则具有高灵敏度与高专属性，并具有一定的准确度，但其结果计算需要对照品，本法主要适用于对方法的专属性与灵敏度要求较高的复杂样品的含量测定。药物的含量测定所采用的分析方法一般要求操作简便，结果准确、重现。但对于药物的不同形式，其含量测定方法的选择依据有所侧重。对于化学原料药的含量测定，因为纯度较高、所含杂质较少，故强调测定结果的准确和重现，通常要求方法具有更高的准确度和精密度，首选容量分析法；对于药物制剂的含量测定，则因为制剂组分复杂、干扰物质多，且含量限度一般较宽，故更加强调方法的灵敏度和专属性或选择性，多采用具有分离能力的色谱分析法，在辅料不干扰测定时也可选用光谱分析法；而对于药物制剂的定量检查，如溶出度、含量均匀度检查中药物的溶出量或含量的测定，因为分析样本量较大、且限亦较宽，在辅料不干扰测定时宜选用光谱分析法。 无论采用何种方法对药物进行鉴别、检查和含量测定，为确保其分析结果的可靠性，要求分析方法应准确、稳定、耐用。所以，需要对所建立的分析方法进行方法学验证。验证内容包括：准确度、精密度、专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性。三、习题与解答（一）最佳选择题D1．紫外分光光度计的吸光度准确度的检定，中国药典规定A．使用重铬酸钾水溶液B．使用亚硝酸钠甲醇溶液C．配制成5%的浓度D．测定不同波长下的吸收系数E．要求在220nm波长处透光率<0.8%B2．反相色谱法流动相的最佳pH范围是A.0-2B.2—8C.8～10D.10~12E.12～14E3．高效液相色谱法色谱峰拖尾因子（对称因子）的计算公式是A.B.C.D.C4．气相色谱法最常用的检测器是A．蒸发光散射检测器B．二极管阵列检测器C．火焰离子化检测器D．电化学检测器E．电子俘获检测器A5．在较短时间内，在相同条件下，由同一分析人员连续测定所得结果的RSD称为A．重复性B．中间精密度C．重现性D．耐用性E．稳定性（二）配伍选择题[6—8]A．色谱柱的效能B．色谱系统的重复性C．色谱峰的对称性D．方法的灵敏度E．方法的准确度下列色谱参数用于评价A6．理论板数 C7．拖尾因子B8．色谱峰面积或峰面积比值的RSD[9—10]A．检测限B．定量限C．准确度D．精密度E．线性下列检验项目需要验证的内容是A9．鉴别试验A10.杂质限度检查[11~14JA．1B．1.5C．2.0D，3E．10下列要求的限度为D11.检测限要求信噪比E12.定量限要求信噪比B13.定量分析时要求色谱峰分离度应大于C14.定量分析时色谱峰面积的重复性要求雕1D(%)不大于（三）多项选择题ABCE15.下列关于滴定度的说法，正确的是A．滴定度是一种浓度形式，单位通常是mg/mlB．滴定度系指每1ml规定浓度的滴定液所相当的被测物质的量（通常用mg表示）C．若口与6分别为被测物与滴定剂反应的摩尔比，m为被测物的分子量，T为滴定液的摩尔浓度，则滴定度D．滴定度是分光光度法计算浓度的参数E．滴定度可根据滴定反应及滴定液摩尔浓度与被测物分子量求得ABCE16.紫外一可见分光光度法用于含量测定的方法有A．对照品比较法B．吸收系数法C．标准曲线法D．灵敏度法E．计算分光光度法ACBE17.HPLC法常用的检测器有A．紫外检测器B．蒸发光散射检测器C．电化学检测器D．电子俘获检测器E．质谱检测器ABCDE18.药品质量标准分析方法验证的内容有 A．准确度B．重复性C．专属性D．检测限E．耐用性ABCDE19.下列分析方法准确度的说法，正确的是A．准确度系指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度B．准确度一般用回收率(%)表示C．可用本法所得的结果与已知准确度的另一方法测定的结果进行比较验证D．E．在规定范围内，至少用9个测定结果（3个浓度，每个浓度各3份）进行评价（四）是非判断题20.滴定度系指每Iml规定浓度的滴定液所相当的被测物质的量（通常用mg表示）(T)21.滴定度可根据滴定反应及滴定液摩尔浓度与被测物分子量求得(T)22.根据物质在特定波长处的吸收系数（）及供试溶液的吸光度可计算该溶液的浓度(g/l00ml)(T)23.紫外分光光度法使用有机溶剂时，测定波长不能小于截止使用波长(T)24.某些物质受紫外光或可见光照射激发后能发射出比激发光渡长较短的荧光(F)25.反相色谱系统使用极性填充剂，常用的色谱柱填充剂为化学键合硅胶(F)26.精密度系指在规定的测试条件下，同一个均匀供试品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度(T)27.检测限是指试样中被测物能被准确测定的最低浓度或量(F)（五）简答题28．请说明剩余量回滴法含量计算公式：中形各符号的含义。29.简述紫外分光光度法对溶剂的要求。30.简述气相色谱法的进样方式31.简述凯氏定氮法的原理与应用32.简述氧瓶燃烧法用于含碘药物测定时的燃烧产物以及吸收液的选择（六）计算题33.用碘滴定液滴定维生素C，化学反应式为：C6H806+I2—C6H606+2HI计算：碘滴定液(0.05mol/L)对维生素C(M(C6H806)=176.13J的滴定度。34.用溴酸钾法测定异烟肼的含量时，反应式如下： 3C6H7N30+2KBr03→3C6H5N02+3N2T+2KBr+3H20计算：溴酸钾滴定液(0.01667mol/L)对异烟肼[M(C6H7N30)=137.14]的滴定度。35.司可巴比妥钠的含量测定方法如下：取本品约0.Ig，精密称定，置250ml碘瓶中，加水lOml，振摇使溶解，精密加溴滴定液(0.05mol/L)25ml，再加盐酸Sml，立即密塞并振摇1分钟，在暗处放置15分钟后，注意微开瓶塞，加碘化钾试液lOml，立即密塞，摇匀后，用硫代硫酸钠滴定液(0.Imol/L)滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。反应式如下：已知：司可巴比妥钠的摩尔质虽肘=260.27；供试品的称取量形=0.1022g;硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L)浓度校正因数F=1.038;供试品滴定消耗硫代硫酸钠滴定液15.73ml；空白试验消耗硫代硫酸钠滴定液23.2lml。计算：司可巴比妥钠的含量(%)。（七）设计题36.碘苯酯为10-对碘苯基十一酸乙酯与邻、间位的碘苯基十一酸乙酯的混合物，结构式、分子式与分子量如下：拟采用氧瓶燃烧一碘量法测定碘苯酯的含量，请设计含量测定方法（包括原理、操作步骤、所用试剂、含量计算公式）。（于治国） 第六章芳酸类非甾体抗炎药物的分析一、基本要求1．掌握：芳酸类非甾体抗炎药物的结构和性质；主要芳酸类药物的鉴别、检查和含量测定的原理与特点。2．熟悉：主要芳酸类非甾体抗炎药物杂质的结构、危害、检查方法与含量限度。3．了解：影响芳酸类非甾体抗炎药物稳定性的主要因素，体内样品与临床监测。二、基本内容非甾体抗炎药(Non-steroidalAnti-inflammatoryDrugs，NSAIDs)是一类不含有甾体骨架的抗炎药，是目前临床使用最多的药物种类之一。本类药物具有不同的化学结构，但多数具有芳酸基本结构，即芳基取代羧酸结构。根据芳基在羧酸的取代位置及芳基上的取代基的不同，芳酸类药物可分为水杨酸（邻羟基苯甲酸）、邻氨基苯甲酸、邻氨基苯乙酸、芳基丙酸、吲哚乙酸及苯并噻嗪甲酸等六类。尼美舒利和对乙酰氨基酚在结构上不属于芳酸类，但作为较常用的非甾体抗炎药将在本章一并介绍。本类药物的结构特点为同时具有游离羧基和苯环，其酸性特征可作为原料药的含量测定基础，即在中性乙醇或其他水溶性有机溶剂中，用氢氧化钠滴定液直接滴定；苯环的紫外光吸收特性常被用于本类药物的鉴别、定量检查及部分制剂的含量测定。本类药物的酯类易子水解的特性决定了其特殊杂质检查的项目与方法，如阿司匹林中游离水杨酸的检查，ChP曾采用三价铁比色法检查。但由于在供试品溶液制备过程中阿司匹林的继续水解使检查结果不稳定。所以ChP2010采用1%冰醋酸甲醇溶液制备供试品溶液，以增加阿司匹林的稳定性，同时采用高效液相色谱法(HPLC)检查，以提高检查结果的可靠性。基于药物结构中游离羧基的酸性和芳环的紫外吸收特性，本类药物原料药的含量测定主要采用酸碱滴定法，制剂的定量检查，如溶出度（释放度）、含量均匀度等主要采用紫外一可见分光光度法，而制剂的含量测定则采用紫外一可见分光光度法和高效液相色谱法。本类药物的分析方法见表6-1。三、习题与解答（一）最佳选择题C1．阿司匹林与碳酸钠试液共热后，再加稀硫酸酸化，产生的白色沉淀是 A．苯酚B．乙酰水杨酸C．水杨酸D．醋酸E．水杨酰水杨酸D2．下列药物中，不能发生三氯化铁反应的是A．二氟尼柳B．阿司匹林C．吡罗昔康D．吲哚美辛E．对乙酰氨基酚D3．两步滴定法测定阿司匹林片剂的依据是A．剩余滴定法B．羧基的酸性C．酸水解定量消耗碱液D．其酯水解定量消耗碱液E．利用水解产物的酸碱性B4．芳酸类药物的酸碱滴定中，常采用中性乙醇作溶剂，所谓“中性”是指A．pH=7B．对所用指示剂显中性C．除去酸性杂质的乙醇D．对甲基橙显中性E．对甲基红显中性C5．柱分配色谱一紫外分光光度法测定阿司匹林胶囊含量时，以加有碳酸氢钠的硅藻土为固定相，用三氯甲烷洗脱的是A．阿司匹林B．水杨酸C．中性或碱性杂质D．水杨酸和阿司匹林E．酸性杂质D6．下列药物中，能采用重氮化一偶合反应进行鉴别的是A．阿司匹林B．美洛昔康C．尼美舒利D．对乙酰氨基酚E．吲哚美辛A7．直接酸碱滴定法测定双水杨酯原料含量时，若滴定过程中双水杨酯发生水解反应，对测定结果的影响是A．偏高B．偏低C．不确定D．无变化E．与所选指示剂有关C8．甲芬那酸中特殊杂质2，3-=甲基苯胺的检查，ChP2010采用的方法是A．HPLCB．TLCC．GCD．UVE．滴定法B9．在试管中炽灼后生成的气体能使湿润的醋酸铅试纸显黑色的药物是A．阿司匹林B．美洛昔康C．尼美舒利D．对乙酰氨基酚E．吲哚美辛D10.对乙酰氨基酚中有关物质的检查采用HPLC法进行，其流动相中加入四丁基氢 氧化铵的作用是A．调节pHB．增加流动相的离子强度C．提高有关物质的保留行为D．降低有关物质的保留行为E．扫尾剂的作用（二）配伍选择题[11—12]A．对氨基酚B．游离水杨酸C．二聚体D．氯化物E．以上均不是以下药物中存在的特殊杂质是B11.阿司匹林A12.对乙酰氨基酚[13—16]A．加酸水解，在酸性条件下，与亚硝酸钠、碱性B一萘酚反应，显红色B．溶于硫酸后，与重铬酸钾反应显深蓝色，随即变为棕绿色C．与硝酸反虚显黄色D．与碳酸钠试液加热水解，再加过量稀硫酸酸化后生成白色沉淀，并发出醋酸的臭气E．加乙醇溶解后，加二硝基苯肼试液，加热至沸，放冷即产生橙色沉淀以下药物的鉴别反应是B13.甲芬那酸E14.酮洛芬A15.对乙酰氨基酚D16.阿司匹林[17—19]A．高效液相色谱法C．原子吸收分光光度法E．薄层色谱法下列药物杂质的检查方法为B．气相色谱法D．紫外分光光度法B17.甲芬那酸中2，3-=甲基苯胺的检查 E18.二氟尼柳中有关物质A的检查A19.萘普生中有关物质的检查[20—22]A．用中性乙醇溶解，用氢氧化钠滴定液滴定，酚酞作指示剂B．用冰醋酸溶解，用高氯酸滴定液滴定C．高效液相色谱法测定D．紫外分光光度法测定E．在稀盐酸溶液中，用亚硝酸钠滴定液滴定，永停法指示终点下列药物的含量测定方法为A20.阿司匹林C21.吡罗昔康B22.二氟尼柳肢囊（三）多项选择题ACE23.能直接与三氯化铁试液反应生成有色配位化合物的药物有A．水杨酸B．阿司匹林C．吡罗昔康D．美洛昔康E．对乙酰氨基酚ABDE24.下列关于直接滴定法测定阿司匹林含量的说法，正确的有A．反应摩尔比为1：lB．用氢氧化钠滴定液滴定C．以pH7的乙醇溶液作为溶剂D．以酚酞作为指示剂E．滴定时应在不断振摇下稍快进行ABCD25.两步滴定法测定阿司匹林片剂含量时，第一步消耗的氢氧化钠的作用有A．中和游离水杨酸B．中和阿司匹林分子中的羧基C．中和酸性杂质D．中和辅料中的酸E．水解酯键ABE26.下列ChP2010收载的药物中，其有关物质的检查采用TLC法的有A．二氟尼柳B．布洛芬C．阿司匹林D．甲芬那酸E．吡罗昔康（四）是非判断题27.水杨酸可在碱性下与三氯化铁试液反应生成紫堇色配位化合物(C)28.双水杨酸中游离水杨酸的检查采用HPLC法(C) 29.ChP2010中，甲芬那酸的有关物质2，3-二甲基苯胺用气相色谱法检查(D)30.采用水解后剩余量滴定法测定阿司匹林含量时，需进行空白试验校正，其目的是消除空白溶剂中杂质有机酸的影响(C)31．双氯芬酸钠的鉴别可以采用氯化物鉴别反应(D)（五）简答题32.简述阿司匹林片两步滴定法的原理与操作要点。33.简述柱分配色谱-紫外分光光度法测定阿司匹林胶囊含量的原理。34.简述二氟尼柳中有关物质检查的原理。（六）计算题35.吡罗昔康含量测定方法如下：精密称取本品0.2103g，加冰醋酸20ml使溶解，加结晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液显蓝绿色，消耗高氯酸滴定液(0.1mol/L)6.19ml；另取冰醋酸20ml，同法滴定，消耗高氯酸滴定液(0.1mol/L)O.03ml，已知：高氯酸滴定液(0.1Imol/L)的浓度校正因数F=1.029；滴定度r=33.14mg/ml。计算：吡罗昔康含量。36.甲芬那酸中有关物质2，3-二甲基苯胺以气相色谱法检查，方法如下：取本品适量，精密称定，用二氯甲烷一甲醇(3：1)溶液溶解并定量稀释制成每1ml中约含25mg的溶液，作为供试品溶液；另取2，3-=甲基苯胺适量，精密称定，用二氯甲烷一甲醇(3：1)溶液溶解并定量稀释制成每Iml中约含2.5lcg的溶液，作为对照品溶液。精密量取供试品溶液和对照品溶液各l山，分别注入气相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液中如有与2，3-二甲基苯胺保留时间一致的色谱峰，其峰面积不得大于对照品溶液中2，3-二甲基苯胺峰面积。计算杂质2，3-=甲基苯胺的限量。（七）设计题37.今有三瓶药物分别为水杨酸(A)、阿司匹林(B)和对乙酰氨基酚(C)，但瓶上标签脱落，请采用适当的化学方法将三者区分开。38.已知某药物的结构式、分子式与分子量如下：请根据药物的结构与性质，设计含量测定方法，包括原理、操作要点（溶剂、滴定液、指示液等）、含量甘算公式。 第七章苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析一、基本要求1．掌握：苯乙胺类拟肾上腺素类药物的结构和性质；主要苯乙胺类拟肾上腺素类药物的鉴别、检查和含量测定的原理与特点。2．熟悉：主要苯乙胺类拟肾上腺素类药物杂质的结构、危害、检查方法与含量限度。3．了解：影响苯乙胺类拟肾上腺素类药物稳定性的主要因素及体内样品与临床监测方法。二、基本内容本类药物大多为具有苯乙胺基本结构的拟肾上腺素类药物。其中肾上腺素、盐酸异丙肾上腺素、重酒石酸去甲肾上腺素、盐酸多巴胺和硫酸特布他林分子结构中苯环的3，4位上都有2个邻位酚羟基，与儿茶酚类似，属于儿茶酚胺类药物。本类药物某些化合物具有酚羟基特性，可与重金属离子配位呈色，可用于鉴别；药物分子结构中具有烃氨基侧链，显弱碱性。大多数本类药物苯乙胺基本结构存在手性碳原子，具有光学活性，可利用此特性进行药物分析。本类药物均具有苯环的特征吸收带，可以用于药物的定性鉴别与定量分析。常见的鉴别试验：三氯化铁反应、氧化反应（盐酸异丙肾上腺素）、甲醛一硫酸反应等；多数药物需检查酮体，酮体在3lOnm处有最大吸收，采用紫外分光光度法进行检查。基于药物结构中的弱碱性和芳环的紫外吸收特性，本类药物原料药的含量测定主要采周非水溶液滴定法，盐酸去氧肾上腺素及注射液采用溴量法，盐酸克仑特罗原料药采用亚硝酸钠法；制剂的定量检查，如溶出度（释放度）、含量均匀度等主要采用紫外一可见分光光度法，而制剂的含量测定则以高效液相色谱法为主。本类药物的分析方法见表7-1：三、习题与解答（一）最佳选择题C1．下列苯乙胺类药物中，可与三氯化铁试剂显深绿色，再滴加碳酸氢钠溶液，即变蓝色，然后变成红色的是A．硫酸苯丙胺B．盐酸甲氧明C．盐酸异丙肾上腺素D．盐酸克仑特罗E．盐酸苯乙双胍E 2．中国药典（2010年版）盐酸去氧肾上腺素含量测定中，1ml溴滴定液(0.1mol/L)相当于多少毫克的盐酸去氧肾上腺素(M=203.67)A.3.395mgB.33.95mgC.20.38mgD.6.llmgE.6.789mgB3．下列药物中，可显双缩脲反应的是A．盐酸多巴胺B．盐酸麻黄碱C．苯佐卡因D．对氨基苯甲酸E．氧烯洛尔E4．下列药物中，可显Rimini反应的是A．盐酸多巴胺B．氧烯洛尔C．苯佐卡因D．对氨基苯甲酸E．重酒石酸间羟胺E5．下列药物中，属于苯乙胺类药物的是A．盐酸利多卡因B．氨甲苯酸C．乙酰水杨酸D．苯佐卡因E．盐酸克仑特罗D6．下列药物中，可用溴量法定量的是A．黄体酮B．维生素BiC．对氨基水杨酸钠D．盐酸去氧肾上腺素E．戊巴比妥（二）配伍选择题[7—8]A．对氨基苯甲酸B．酮体C．间氨基酚D．对氨基酚E．酮胺中国药典规定下列药物需检查的特殊杂质是E7．盐酸甲氧明B8．肾上腺素[9—11]A．以结晶紫指示液指示终点B．以麝香草酚酞指示终点C．电位法指示终点D．以萘酚苯甲醇指示终点E．以麝香草酚蓝指示终点采用非水溶液滴定法测定下列药物含量时的指示终点方法是A9．重酒石酸去甲肾上腺素D10.盐酸甲氢明C11.硫酸特布他林[12—15] A．紫外分光光度法B．反相高效液相色谱法D．亚硝酸钠滴定法C．非水溶液滴定法E．溴量法下列药物的含量测定方法是C12.盐酸异丙肾上腺素B13.盐酸氨溴索片B14.硫酸沙丁胺醇注射液E15.盐酸去氧肾上腺素[16—19]A．与甲醛一硫酸反应显玫瑰红一橙红_深棕红的变化过程B．加碘试液产生明显的红棕色C．与亚硝基铁氰化钠反应D．与硫酸铜和氢氧化钠试液反应即显蓝紫色E．在磷酸盐缓冲液(pH7.0)中测定比旋度下列药物的鉴别反应是C16.重酒石酸间羟胺B17.肾上腺素D18.盐酸麻黄碱A19.盐酸去氧肾上腺素（三）多项选择题BC20.盐酸去氧肾上腺素常用的鉴别反应有A．重氮化一偶合反应B．三氯化铁显色反应C．双缩脲反应D．氧化反应E．Rimini反应ACDE21.下列药物中，采用非水溶液滴定法测定含量的有A．硫酸特布他林B．盐酸普鲁卡因C．盐酸甲氧明D．硫酸沙丁胺醇E．肾上腺素CD22.肾上腺素可选用的鉴别方法有A．重氮化·偶合反应B．制备衍生物测熔点C．三氯化铁反应D．氧化反应E．氯化物反应ACE23.下列药物中，中国药典（2010年版）采用三氯化铁反应鉴别的有A．盐酸去氧肾上腺素B．盐酸丁卡因C．肾上腺素 D．盐酸普鲁卡因胺E．盐酸多巴胺（四）是非判断题24.多数苯乙胺类药物基本结构中存在手性碳原子，具有光学活性(T)25.ChP2010收载的苯乙胺类拟肾上腺素药物均要求进行有关物质检查，其中盐酸去氧肾上腺素选择高效液相色谱法(F)26.重酒石酸去甲肾上腺素在碱性条件下比较稳定，几乎木被碘氧化(F)27.某些苯乙胺类药物分子结构中具有邻苯二酚（或酚羟基）结构，可与重金属离子配位呈色(T)28.ChP2010收载的盐酸克仑特罗原料药采用非水溶液滴定法测定含量(F)（五）简答题29.简述溴量法测定苯乙胺类药物的基本原理。30.苯乙胺类药物的鉴别试验主要有哪些？31.苯乙胺类药物具有哪些结构特点和理化性质？32.肾上腺素需要检查什么杂质？如何检查？33.ChP2010如何区别重酒石酸去甲肾上腺素与盐酸异丙肾上腺素？（六）计算题34.称取硫酸沙丁胺醇0.4135g，精密称定，加冰醋酸lOml，微热使溶解，放冷，加醋酐15ml和结晶紫指示液l滴，用高氯酸滴定液(0.Imol/L)滴定至溶液显蓝绿色，并将滴定结果用空白试验校正。消耗高氯酸滴定液(0.1034mol/L)6.97ml，空白消耗0.lOml，每1ml的高氯酸滴定液(0.Imol/L)相当于57.67mg的(C13H21N03)：．H2S04，求本品的百分含量？已知：高氯酸滴定液(0.1mol/L)的浓度校正因数F=1.034；滴定度r=57.67mg/ml。计算：硫酸沙丁胺醇的百分含量。35.重酒石酸去甲肾上腺素含量测定：精密称取本品0.2256g，加冰醋酸l0ml溶解后，加结晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液显蓝绿色，并将滴定结果用空白试验校正。已知：高氯酸滴定液(0.1mol/L)的F=1.027(23℃)，冰醋酸的体积膨胀系数为1.1×10-3/℃，消耗高氯酸滴定液(0.1mol/L)6.80ml，空白消耗0.l0ml，每1ml的高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于31.93mg的(C8H1lN30)．C4H406。求：(1)样品测定时室温20aC，此时高氯酸滴定液的F值是多少？(2)本品的百分含量？36.肾上腺素注射液含量测定：称取肾上腺素对照品50. 0mg，置25ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取此溶液与内标溶液(0.12mg/ml)各2ml，置l0ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀。取20山注入HPLC仪，测得肾上腺素和内标物的峰面积分别为14250和10112；另精密量取肾上腺素注射液1ml，置l0ml量瓶中，加相同浓度内标液2ml，加流动相稀释至刻度，摇匀。取20vl注入HPLC仪，测得肾上腺素和内标物的峰面积分别为17840和10210。注射液的标示量为lOmg/2ml，求其标示百分含量。已知：肾上腺素对照品峰面积A。=14250，质量m。=50/25x2=4.0mg．内标物峰面积Ai=10112，质量mi=0.12x2=0.24mg;肾上腺素样品峰面积A：=17840，内标物峰面积Ai=10210。计算：肾上腺素注射液的标示百分含量。（七）设计题37.已知某药物的结构式、分子式与分子量如下：OHCIIH17N03"HClMW=247.72请根据药物的结构与性质，设计含量测定方法，包括原理、操作要点（溶剂、滴定液、指示液等）、含量计算公式。 第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析一、基本要求1．掌握：对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的结构和性质；主要代表性药物的鉴别、检查和含量测定的原理与特点。2．熟悉：主要对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物杂质的结构、危害、检查方法与含量限度。3．了解：影响对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物稳定性的主要因素及体内样品与临床监测方法。二、基本内容局麻药物是一类能在用药部位局部可逆性地阻断感觉神经冲动发生与传导的药物。局麻药物的化学结构通常包括三个部分：①亲脂性芳香环；②中间连接功能基；③亲水性氨基。中间部分连接芳环和氨基的功能基是酯键即为对氨基苯甲酸酯类局麻药物，代表药物为普鲁卡因；中间功能基是酰胺键则为酰苯胺类局麻药物，代表药物为利多卡因。对氨基苯甲酸酯类药物的结构中具有芳伯氨基（除盐酸丁卡因外），故显重氮化·偶合反应；具有与芳醛缩合成Schiff碱反应；易氧化变色等。酰苯胺类药物结构中具有芳酰氨基，在酸性溶液中易水解为芳伯氨基化合物，显芳伯氨基特性反应。对氨基苯甲酸酯类药物因分子结构中含有酯键，故易水解。盐酸利多卡因、盐酸布比卡因和盐酸罗哌卡因分子结构中酰氨基上的氮可在水溶液申与铜离子或钴离子络合，生成有色的配位化合物沉淀。此沉淀可溶于三氯甲烷等有机溶剂后呈色。对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类药物分子结构中均含有苯环及相应的取代基与脂烃胺侧链，具有紫外吸收光谱特征与红外光谱特征，因此是国内外药典常采用的鉴别方法。盐酸普鲁卡因及其注射液需进行对氨基苯甲酸的特殊杂质检查。基于药物结构中大部分具有芳伯氨基以及水解后有芳伯氨基，本类药物原料药的含量测定主要采用亚硝酸钠滴定法，制剂的含量测定则采用紫外一可见分光光度法和高效液相色谱法。本类药物的分析方法见表8-1： 表8-1ChP2010收载的部分局麻药物的原料药的分析方法三、习题与解答（一）最佳选择题A1．具芳伯氨基或经水解生成芳伯氨基的药物可用亚硝酸钠滴定，其反应条件是A．适量强酸环境，加适量溴化钾，室温下进行B．弱酸酸性环境，40aC以上加速进行C．酸浓度高，反应完全，宜采用高浓度酸D．酸度高反应加速，宜采用高酸度E．酸性条件下，室温即可，避免副反应E2．芳香胺类药物的含量测定方法是A．非水溶液滴定法B．亚硝酸钠滴定法C．间接酸量法D．B+C两种E．A+B两种B3．下列药物中，能在碳酸钠试液中与硫酸铜反应生成蓝紫色配位化合物的是A．盐酸普鲁卡因B．盐酸利多卡因C．盐酸丁卡因D．对乙酰氨基酚E．肾上腺素A4．下列药物中，ChP直接用芳香第一胺反应进行鉴别的是A．盐酸普鲁卡因B．盐酸利多卡因C．盐酸丁卡因D．乙酰氨基酚E．盐酸去氧肾上腺素C5.盐酸丁卡因与亚硝酸钠作用形成的产物是A．重氮盐B．偶氮染料C．N-亚硝基化合物D．亚硝基苯化合物E．偶氮氨基化合物D6．盐酸普鲁卡因中需检查的特殊杂质是A．水杨酸B．对氨基酚C．有关物质D．对氨基苯甲酸E．酮体A7．亚硝酸钠滴定法测定盐酸普鲁卡因含量时用的酸是A．盐酸B．硫酸C．氢溴酸D．硝酸E．磷酸D8．下列药物中，经水解后加碘试液可生成黄色沉淀的是A．盐酸利多卡因B．氨甲苯酸C．乙酰水杨酸D．苯佐卡因E．盐酸克仑特罗A9．下列药物中，在酸性条件下可与CoCl：试液反应生成亮绿色的是 A．盐酸利多卡因B．氨甲苯酸C．乙酰水杨酸D．苯佐卡因E．盐酸普鲁卡因胺A10.中国药典（2010年版）收载的盐酸布比卡因含量测定方法是A．非水溶液滴定法B．酸性染料比色法C．紫外分光光度法D．亚硝酸钠滴定法E．铈量法C11.用制备衍生物测熔点的方法鉴别盐酸丁卡因，加入的试液是A．三硝基苯酚B．硫酸铜C．硫氪酸铵D．三氯化铁E．亚硝基铁氰化钠D12.中国药典（2010年版）用于指示亚硝酸钠滴定法的终点的方法是A．内指示剂法B．外指示剂法C．电位法D．永停滴定法E．自身指示剂法C13.下列药物中，不属于对氨基苯甲酸酯类的是A．盐酸普鲁卡因B．苯佐卡因C．盐酸利多卡因D．盐酸丁卡因E．盐酸氯普鲁卡因B14.下列药物中，能被浓过氧化氢氧化成羟肟酸，再与三氯化铁作用形成配位化合物羟肟酸铁的是A．盐酸利多卡因B．盐酸普鲁卡因胺C．盐酸普鲁卡因D．盐酸去甲肾上腺素E．苯佐卡因C15.亚硝酸钠滴定法滴定开始时将滴定管尖端插入液面下约2/3处的原因是A．使重氮化反应速度减慢B．使重氮化反应速度加快C．避免HN02挥发和分解D．避免HBr的挥发E．增加NO+Br-的浓度（二）配伍选择题[16—17]A．加入三氯化铁试液，显紫红色B．在碳酸钠试液中，与硫酸铜反应，生成蓝紫色配合物C．与硝酸反应，显黄色D．在酸性条件下与亚硝酸钠反应后，再与碱性B一萘酚反应显橙红色E．加入三氯化铁试液，生成赭色沉淀下列药物的鉴别反应是 D16.盐酸氯普鲁卡因B17.盐酸利多卡因[18—20]A．对氨基苯甲酸B．酮体C．4-氨基-2-氯苯甲酸D．2，6-=甲基苯胺E．间氨基酚下列药物中应检查的杂质是C18.盐酸氯普鲁卡因注射液D19.盐酸利多卡因注射液A20.盐酸普鲁卡因注射液[21—24]A．紫外分光光度法B．反相高效液相色谱法C．非水溶液滴定法D．亚硝酸钠滴定法E．溴量法下列药物的含量测定方法是B21.盐酸利多卡因A22.注射用盐酸丁卡因B23.盐酸利多卡因注射液D24.盐酸普鲁卡因胺[25—28]A．胺基的，B．苯环的C．羟基的D．酯基的E．胺基的用红外光谱法鉴别盐酸普鲁卡因，下列吸收峰的归属是A25.3315cm-1,3200cm-1D26.1692cm-lB27.1604cm-1,1520cm-1E28.2585cm-l（三）多项选择题AB29.盐酸普鲁卡因常用的鉴别反应有A．重氮化一偶合反应B．水解反应C．氧化反应D．磺化反应E．碘化反应CD30.下列药物中，可采用亚硝酸钠滴定法测定含量的有 A．苯巴比妥B．盐酸丁卡因C．苯佐卡因D．盐酸普鲁卡因胺E．盐酸去氧肾上腺素BD31.下列药物中，不属于酰苯胺类的有A．盐酸布比卡因B．苯佐卡因C．盐酸利多卡因D．盐酸丁卡因E．盐酸罗哌卡因ACE32．下列药物中，中国药典（2010年版）采用红外光谱法进行鉴别的有A．盐酸布比卡因B．肾上腺素C．盐酸利多卡因D．重酒石酸去甲肾上腺素E．盐酸普鲁卡因AD33．下列药物中，可用非水溶液滴定法测定含量的有A．盐酸丁卡因B．对氨基水杨酸钠C．盐酸氧普鲁卡因D．盐酸布比卡因E．苯佐卡因（四）是非判断题34.重氮化反应中，加入适量的溴化钾的目的是加快反应速度(T)35.重氮化反应速度的快慢与芳伯氨基的碱性强弱有关，碱性强反应速度就快(F)36.具有芳酰胺基团的药物在酸性溶液中能直接用亚硝酸钠液滴定(F)37.苯佐卡因可在酸性条件下加热水解后，加碘试液即生成黄色沉淀(F38.盐酸利多卡因在酸性溶液中与氯化钴试液反应，生成亮绿色的细小钻盐沉淀(T)（五）简答题39.亚硝酸钠滴定法测定芳胺类药物的原理是什么？在测定中应注意哪些反应条件？40.如何区别盐酸利多卡因和盐酸普鲁卡因？41.亚硝酸钠滴定法常采用的指示终点的方法有哪些？《中国药典》收载的是哪种？42.盐酸普鲁卡因的特殊杂质是什么？中国药典采用什么方法对其进行限量检查？43.盐酸普鲁卡因注射液为什么会变黄？（六）计算题44.称取盐酸普鲁卡因供试品0.62l0g，用亚硝酸钠滴定液(0.1mol/L)滴定至终点时，消耗亚硝酸钠滴定液(0.1mol/L)22.67ml，已知每1ml亚硝酸钠滴定液(0.1mol/L)相当于27.28mg的盐酸普鲁卡因，求本品的百分含量？已知：取样量形=0.62l0g，亚硝酸钠滴定液消耗体积y=22.67ml，滴定度T=27.28mg/ml。，计算：盐酸普鲁卡因的百分含量。 45.盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸(PABA)的检查：取本品，加乙醇制成2.5mg/ml的溶液，作为供试液，另取PABA对照品，加乙醇制成60/ml的溶液，作为对照液，取供试液10l，对照液5I，分别点于同一薄层板上，展开，显色，供试液所显杂质斑点颜色，不得比对照液所显斑点颜色深。求PABA的限量是多少？已知：供试液浓度Cx=2.5mg/ml，对照液浓度C。=60/ml，供试液点样体积VX=10l，对照液E=5l。（七）设计题46.今有3瓶药物分别为盐酸利多卡因(A)、盐酸丁卡因(B)和盐酸普鲁卡因(C)，但瓶上标签脱落，请采用适当的化学方法将三者区分开。47.已知某药物的结构式、分子式与分子量如下：请根据药物的结构与性质，设计含量测定方法，包括原理、操作要点（溶剂、滴定液、指示液等）、含量计算公式。 第十章巴比妥及苯二氮杂革类镇静催眠药物的分析一、基本要求1．掌握：巴比妥和苯二氮杂革类镇静催眠药物的结构与主要理化性质、鉴别试验及含量测定的原理。2．熟悉：本类药物鉴别试验及含量测定的常用方法、特殊杂质及其检查方法。3．了解：本类药物的体内药物分析方法。二、基本内容巴比妥类和苯二氮杂革类药物均为临床上广泛应用的镇静催眠药，其临床安全和合理用药有明确管制。巴比妥类药物均为巴比妥酸的衍生物，其基本结构可分为两部分：一部分为母核巴比妥酸的环状丙二酰脲结构，此结构是巴比妥类药物的共同部分，决定巴比妥类药物的共性，可用于与其他类药物相区别。另一部分是取代基部分，根据取代基的不同，具有不同的理化性质，这些理化性质可用于各种巴比妥类药物之间的相互区别。巴比妥类药物的母核环状结构中含有1，3-=酰亚胺基团，因而其分子能发生酮式一烯醇式互变异构，在水溶液中发生二级电离，具有弱酸性，并可与强碱反应生成水溶性的盐类，一般为钠盐。上述这些性质可以用于巴比妥类药物的分离、鉴别、检查和含量测定。巴比妥类药物的分子结构中含有酰亚胺结构，与碱液共沸即水解，释放出氨气，可使湿润的红色石蕊试纸变蓝，此反应被用于鉴别异戍巴比妥和巴比妥。巴比妥类药物分子结构中含有丙二酰脲(-CONHCONHCO-)或酰亚胺基团，在合适pH的溶液中，可与某些重金属离子，如Ag+、Cu2+、C02+、Hg2+等反应呈色或产生有色沉淀，常用于本类药物的鉴别和含量测定。巴比妥类药物分子结构中丙二酰脲基团中的氢比较活泼，可与香草醛在浓硫酸存在下发生缩合反应，生成棕红色产物，BP2010戊巴比妥采用此反应进行鉴别。巴比妥类药物的紫外吸收光谱随着其电离级数不同，而发生显著的变化，可用于本类药物的鉴别、检查和含量测定。巴比妥类药物常用的含量测定方法有银量法、溴量法、紫外分光光度法、酸碱滴定法、提取重量法、HPLC法、GC法及电泳法等。巴比妥类药物的分析方法见表10-1： 三、习题与解答（一）最佳选择题C1．下列鉴别反应中，属于丙二酰脲类反应的是A．甲醛硫酸反应B．硫色素反应C．铜盐反应D．硫酸荧光反应E．戊烯二醛反应C2．下列巴比妥类药物中，可与铜盐吡啶试剂生成绿色配合物，又与铅盐生成白色沉淀的是A．巴比妥B．异戊巴比妥C．硫喷妥钠D．环己烯巴比妥E．苯巴比妥B3．下列反应中，用于苯巴比妥鉴别的是A．硫酸反应B．甲醛一硫酸反应C．与碘液的反应D．二硝基氯苯反应E．戊烯二醛反应E4．下列金属盐中，一般不用于巴比妥药物鉴别的是A．铜盐B．银盐C．汞盐D．钴盐E．锌盐C5．下列药物中，可在氢氧化钠碱性条件下与铅离子反应生成白色沉淀的是A．司可巴比妥B．异戊巴比妥C．硫喷妥钠D．戊巴比妥E．苯巴比妥D6．巴比妥类药物是弱酸类药物的原因是A．在水中不溶解B．在有机溶剂中溶解C．有一定的熔点D．在水溶液中发生二级电离E．遇氧化剂或还原剂环状结构不会破裂C7．下列方法中，ChP2010用于地西泮含量测定的是A．高效液相色谱法B．铈量法C．非水溶液滴定法D．溴酸钾法E．紫外一可见分光光度法（二）配伍选择题[8—10]A．与甲醛-硫酸反应显玫瑰红色B．能使溴试液褪色 C．与亚硝基铁氰化钠反应显蓝紫色D．与香草醛反应生成棕红色产物E．与铜吡啶试液反应显绿色下列巴比妥药物的鉴别反应是E8．硫喷妥钠A9．苯巴比妥B10.司可巴比妥[11~12JA．二氢吡啶环B．七元亚胺内酰胺环C．环状丙二酰脲D．吡酮酸E．苯烃胺下列药物的分子结构中具有B11.硝西泮C12.硫喷妥钠[13—14]A．电位滴定法B．淀粉指示剂C．KI-淀粉指示剂D．结晶紫指示剂E．永停滴定法下列含量测定的终点指示方法是A13.银量法测定苯巴比妥的含量B14.溴量法测定司可巴比妥钠的含量[15—17]A．紫外分光光度法B．溴量法C．银量法D．非水滴定法E．亚硝酸钠滴定法下列药物含量的测定方法是C15.苯巴比妥B16.司可巴比妥钠A17.注射用硫喷妥钠（三）多项选择题CD18.下列反应中，可用于巴比妥类药物鉴别的有A．与钡盐反应生成白色化合物B．与镁盐反应生成红色化合物C．与银盐反应生成白色沉淀D．与铜盐反应生成有色产物 E．与氢氧化钠反应生成白色沉淀ACDE19.苯巴比妥的特殊杂质检查项目有A．酸度B．炽灼残渣C．有关物质D．中性或碱性物质E．乙醇溶液的澄清度BCDE20.下列方法中，可用于巴比妥类药物含量测定的有A．碘量法B．银量法C．紫外分光光度法D．酸碱滴定法E．溴量法BCD21.下列方法中，可用于苯二氮杂革类药物含量测定的有A．铈量法B．UV法C．HPLC法D．非水溶液滴定法E．钯离子比色法（四）是非判断题22.巴比妥类药物在碳酸钠溶液中，加入硝酸银试液，生成白色沉淀，振摇后溶解，继续滴加过量硝酸银试液，沉淀不再出现(F)23.巴比妥类药物的鉴别方法之一是与镁盐反应生成红色化合物(F)24.巴比妥类药物的母核环状结构中含有l，3-=酰亚胺基团，在水溶液中呈弱酸性(T)25.戊巴比妥的鉴别方法是与香草醛在浓硫酸下发生反应，生成氨气，可使红色石蕊试纸变蓝(F)26.司可巴比妥钠在碱性溶液中与高锰酸钾反应，高锰酸钾可由紫色变为棕色(T)27．氯氮革中有关物质的检查方法包括薄层色谱法、高效液相色谱法以及酸性溶液的澄清度法(T)28.阿普唑仑的盐酸溶液遇硅钨酸溶液生成白色沉淀，而与碘化铋钾溶液，生成橙红色沉淀(T)29.氯氮草溶于硫酸后，在紫外光灯(365nm)下检视，显黄色(T)（五）计算题30.取苯巴比妥(C12H12N203=232.24)财照品用适量溶剂配成10g／ml的对照液。另取50mg苯巴比妥钠(C12H11N203Na=254.22)供试品溶于水，加酸，用三氯甲烷提取蒸干后，残渣用适当溶剂配成l00ml溶液，取1ml，稀释至50ml作为供试品溶液。在240nm波长处测定吸光度，对照液为0.431，供试液为0.392，计算苯巴比妥钠的百分含量？31.取苯巴比妥0.4045g，加入新制的碳酸钠试液16ml使溶解，加丙酮12ml与水90ml，用硝酸银滴定液(0.1025mol/L)滴定至终点，消耗硝酸银滴定液16.88ml，求苯巴比 妥的百分含量？每1ml硝酸银滴定液(0.Imol/L)相当于23.22mg的C，2HUN20。。（六）简答题32.简述巴比妥类药物的结构与理化性质的关系。33.简述巴比妥类药物含量测定方法及常用方法的测定原理。34.简述巴比妥类药物与银盐、铜盐、钻盐及汞盐反应的原理和现象。35.简述苯二氮杂革类药物的主要理化性质。（七）设计题36.今有三瓶药物分别为苯巴比妥(A)、司可巴比妥钠(B)和硫喷妥钠(C)，但瓶上标签脱落，请采用适当的化学方法将三者区分开。37.已知某药物的结构式、分子式与分子量如下：请根据药物的结构与性质，分别设计其原料药和制剂含量测定方法，包括原理、操作要点（取样量的计算、选用溶剂、滴定液等）、含量计算公式。 第十一章吩噻嗪累抗精神病药物的分析一、基本要求1．掌握：吩噻嗪类药物的结构一性质一分析方法的关系和含量测定方法。2．熟悉：吩噻嗪类药物的鉴别试验与有关物质检查方法。3．了解：吩噻嗪类药物的性状。二、基本内容吩噻嗪类(硫氮杂蒽类，phenothiazines)药物是一类多巴胺受体阻断剂，主要用于治疗I型精神分裂症，属于抗精神病药(antipsychotics)。本类药物具有硫氮杂蒽母核，母核上2位和10位被不同的基团取代，构成一系列吩噻嗪类抗精神病药物。ChP2010收载的本类药物及其制剂有：盐酸氯丙嗪、盐酸异丙嗪、盐酸三氟拉嗪、盐酸琉利达嗪、奋乃静、癸氟奋乃静和盐酸氟奋乃静。本类药物所具有的硫氮杂蒽母核具有还原性，易于被硫酸、硝酸、过氧化氢、三氯化铁试液等氧化剂氧化，可以与钯离子配合显色，在205nm、254nm和300nm处有最大吸收，是本类药物鉴别和含量测定的基础；10位取代的脂烃氨基、哌嗪及哌啶的衍生物所含的氮原子碱性较强，其碱性特征也可作为本类药物的鉴别和原料药的含量测定基础，即与生物碱沉淀剂反应用于鉴别，采用非水溶液滴定法测定原料药的含量，采用乙醇一水溶液中的氢氧化钠滴定法测定本类药物盐酸盐的含量。硫氮杂蒽毋核的紫外光吸收特性常被用于本类药物的鉴别、定量检查及部分制剂的含量测定。吩噻嗪类药物的有关物质主要包括：残留的原料及中间产物、副产物、药物的氧化产物。由于药物与有关物质在结构和性质上的相似性，检查一般采用高效液相色谱法(HPLC)和薄层色谱法(TLC)。基于药物结构中取代基的碱性和硫氮杂蒽母核的紫外吸收特性，本类药物原料药的含量测定主要采用酸碱滴定法，制剂的含量测定则主要采用紫外-可见分光光度法和高效液相色谱法。其中可以用于吩噻嗪类药物制剂含量测定的分光光度法包括直接分光光度法、提取后分光光度法、提取后双波长分光光度法、二阶导数分光光度法和钯离子比色法。本类药物的分析方法见表11-1：三、习题与解答A1．能够与盐酸氯丙嗪反应生成沉淀的试剂是 A．三硝基苯酚B．三氯化铁C．茜素锆D．碱性酒石酸铜E．氯化钡A2．下列药品中置于铜网上燃烧，火焰显绿色的是A．奋乃静B．氟奋乃静C．癸氟奋乃静D．异丙嗪E．硫利达嗪D3.2位含氟取代基的吩噻嗪类药物经有机破坏后在酸性条件下与显色剂反应显色，所用的显色剂是A．三氯化铁B．亚硝基铁氰化钠C．茜素磺酸钠D．茜素锆E．2，4-=硝基氯苯E4．下列吩噻嗪类药物中，在254nm波长处吸收峰的强度和位置受到取代基的影响，其中峰位红移最为显著的是A．盐酸异丙嗪B．盐酸氯丙嗪C．奋乃静D．癸氟奋乃静E．盐酸硫利达嗪C5．USP32-NF27采周TLC法鉴别奋乃静注射液，为抑制奋乃静与硅胶基团的结合，减轻斑点拖尾，在丙酮展开剂中加入的是A．冰醋酸B．醋酐C．氨水D．三氯甲烷E．甲醇C6．国内外药典关于吩噻嗪类药物及其盐酸盐原料药的含量测定常采用的方法是A．铈量法B．钯离子比色法C．非水溶液滴定法D．紫外分光光度法E．高效液相色谱法A7．ChP2010中盐酸氯丙嗪片的含量测定采用的是A．直接分光光度法B．提取后分光光度法C．提取后双波长分光光度法D．-阶导数分光光度法E．二阶导数分光光度法D8．钯离子比色法可以测定的药物是A．丙磺舒B．布洛芬C．阿普唑仑D．盐酸氯丙嗪E．异烟肼D9．有氧化产物存在时，吩噻嗪类药物的鉴别与含量测定的方法是A．非水溶液滴定法B．亚硝酸钠滴定法C．薄层色谱法DD．钯离子比色法E．直接紫外分光光度法10.目前测定复杂生物样本中微量药物的首选方法是A.HPCEB.GCC.GC-MSD.LC-MSE.LC-NMR （二）配伍选择题[11—12]A．外标法B．内标加校正因子法C．加校正因子的主成分自身对照法D．不加校正因子的主成分自身对照法E．面积归L化法ChP2010中以下药物有关物质检查采用的方法是D11.盐酸氯丙嗪D12.奋乃静[13—15]A．直接分光光度法B．提取后分光光度法C．差示分光光度法D．提取后双波长分光光度法E．正交函数分光光度法B13.盐酸异丙嗪口服液的含量测定，可采用A14.盐酸氯丙嗪糖衣片的含量测定，可采用D15.盐酸氯丙嗪注射液的含量测定中，为消除样品中氧化物对测定的干扰，可采用（三）多项选择题ABCDE16.吩噻嗪类药物的理化性质有A．多个吸收峰的紫外光谱特征B．易被氧化C．可以与金属离子络合D．杂环上的氮原子碱性极弱E．侧链上的氮原子碱性较强ABCD17.紫外分光光度法用于吩噻嗪类药物鉴别的参数有A．最大吸收波长B．吸光度C．吸光度比值D．吸收系数E．最小吸收波长ACE18.吩噻嗪类药物的母核在下列波长处有最大吸收的有A.205nmB.220nmC.254nmD.289nmE.300nmBCDE19.RP-HPLC法测定吩噻嗪类药物的含量，常用的扫尾剂有A．三氟乙酸B．三乙胺C．二乙胺D．醋酸铵E．乙腈ABC20.采用离子对高教液相色谱法测定吩噻嗪类药物的含量，可以采用的离子对试剂有 A．三氟乙酸B．戊烷磺酸钠C．庚烷磺酸钠D．四丁基氢氧化铵E．四丁基溴化铵（四）是非判断题21.由于辅料影响，吩噻嗪类药物制剂的鉴别不能采用红外分光光度法(F)22.当某药物的含量测定采用色谱法时，可以该法对该药物进行鉴别(T)23.为严格控制药物制剂的质量，与盐酸氯丙嗪相比，盐酸氯丙嗪制剂的有关物质检查相应严格了限制(F)24.非水溶液滴定法可以用于吩噻嗪类药物片剂及注射剂的直接测定(F)25.非水溶液滴定法测定吩噻嗪类药物可以采用甲醇钠，甲醇作为溶剂(F)（五）简答题26.采用HPLC法检查奋乃静中的有关物质的系统适用性试验：取奋乃静对照品25mg，置25ml量瓶中，加甲醇15ml溶解后，加入300％过氧化氢溶液2ml，摇匀，用甲醇稀释至刻度，摇匀，放置1.5小时，作为系统适用性试验溶液，取系统适用性试验溶液20VI洼入液相色谱仪，使奋乃静峰保留时间约为27分钟，与相对保留时间约为0.73的降解杂质峰的分离度应大于7.0。请回答下列问题：(1)加入过氧化氢的作用是什么？(2)为什么溶液需放置1.5小时？27.采用乙醇-水溶液中的氢氧化钠滴定法测定吩噻嗪类药物盐酸盐的含量的原理是什么？28.盐酸氯丙嗪注射液的含量测定：精密量取本品适量，约相当于盐酸氯丙嗪100mg，置500ml量瓶中，用0.Imol/L盐酸溶液稀释至刻度，摇匀；精密量取l0ml，置250ml分液漏斗中，加水约20ml，加入氨水，乙醚25ml提取4次，合并乙醚提取液，用0.1mol/L盐酸溶液25ml提取4次，合并盐酸提取液并置250ml量瓶中，挥去残留乙醚，用0.1mol/L盆酸溶液稀释至刻度，摇匀。另取盐酸氯丙嗪对照品适量，精密称定，用0.1mol/L盐酸溶液溶解并稀释制成每1ml中约含8p_g的溶液，作为对照品溶液。取上述两种溶液，分别置于lcm石英比色皿中，照紫外一可见分光光度法测定含量。请回答下列问题：(1)加入氨水和盐酸溶液的作用是什么？(2)结合本例简述双波长分光光度法的原理。29.简述钯离子比色法的原理及其优点。 30.采用钯离子比色法测定盐酸异丙嗪片的含量，供试品溶液：取本品不少于20片，精密称定，研细，精密称取适量，置125ml棕色分液漏斗中，加饱和氯化钾溶液20ml、1mol/L氢氧化钠溶液l0ml与甲醇溶液l0ml，用正庚烷20ml提取3次，合并正庚烷提取液，无水硫酸钠脱水，滤过；滤液置125ml棕色分液漏斗中，用0.Imol/L盐酸溶液15ml提取3次，合并酸提取液，置50ml棕色容量瓶中，用0.Imol/L盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，请解释以下所用试剂的作用：(1)氢氧化钠溶液；(2)氯化钾；(3)0.1mol/L盐酸溶液。31.USP32-NF27盐酸异丙嗪注射液的含量测定：流动相：取戊烷磺酸钠Ig，加水500ml溶解，加乙腈500ml与冰醋酸5ml。色谱系统：紫外检测器（254nm波长）；苯基柱(30cm×4.6mm)；流速1.5ml/min。请问：该方法为RP-HPLC方法中的哪一种？其原理是什么？为什么可以用于吩噻嗪类药物的分析？（六）计算题32.盐酸三氟拉嗪的含量测定：精密称取本品0.2089g，加无水甲酸l0ml与醋酐40ml溶解后，依照电位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1023mol/L)滴定，消耗高氯酸滴定液8.46ml，另取无水甲酸l0ml与醋酐40ml，同法测定，消耗高氯酸滴定液0.06ml，请计算盐酸三氟拉嗪的含量。每1ml高氯酸滴定液(O.1mol/L)相当于24.02mg的C21H24F3N3S．2HCI。33.盐酸氯丙嗪片的含量测定：取本品（标示量为25mg/片）10片，去糖衣后精密称定，重0.5130g，研细，称取片粉0.0206g，置l00ml量瓶中，加盐酸溶液(9→1000)70ml，振摇使盐酸氯丙嗪溶解，用溶剂稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤渡5ml，置lOOml量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀，于254nm波长处测定吸光度为o．453，按吸收系数计算每片的含量。（七）设计题34.请采用适当的化学方法将盐酸氯丙嗪(A)、癸氟奋乃静(B)和奋乃静(C)三种药物区分开。35.已知某药物的结构式、分子式与分子量如下：请根据药物的结构与性质，设计一个化学分析的方法测定其含量，包括原理、操作要点（溶剂、滴定液、指示终点的方法等）、含量计算公式。 第十三章莨菪烷类抗胆碱药物的分析一、基本要求1．掌握：莨菪烷类抗胆碱药物的结构特征、理化性质与分析方法之间的关系；莨菪烷类药物含量测定的酸性染料比色法、非水酸碱滴定法和HPLC法。2．熟悉：莨菪烷类药物的鉴别和特殊杂质检查方法原理与应用。3．了解：其他分析方法在莨菪烷类药物分析中的应用。二、基本内容莨菪烷类抗胆碱药物是由莨菪烷衍生的氨基醇与不同有机酸缩合成的酯类生物碱，具有水解性和旋光性，分子结构中具五元脂环氮原子，碱性较强，易与酸成盐。本章围绕莨菪烷类抗胆碱药物化学结构、理化性质和分析方法的关系，结合中国药典（2010年版）重点讲解本类药物的鉴别、检查和含量测定的原理和方法（表13-1）。三、习题与题解(一)最佳选择题E1．莨菪烷类生物碱的特征反应是A．与三氯化铁反应B．与生物碱沉淀剂反应C．重氮化·偶合反应D．丙二酰脲反应E．Vitali反应A2．药物水解后，与硫酸·重铬酸钾在加热的条件下，生成苯甲醛，而逸出类似苦杏仁的臭味的药物是A．氢溴酸山莨菪碱B．异烟肼C．硫酸奎宁D．盐酸氯丙嗪E．地西泮C3．ChP2010中收载的莨菪烷类原料药都采用的鉴别方法是A．Vitali鉴别反应B．UV鉴别C．IR鉴别D．硫酸盐鉴别反应E．溴化物鉴别反应A4．影响酸性染料比色法的最主要因素是A．水相的pHB．酸性染料的种类C．有机溶剂的种类D．酸性染料的浓度E．永分的影响A5．在冰醋酸非水介质中，硫酸阿托品与高氯酸反应的化学计量摩尔比是 A.1:1B.1:2C.1:3D.1:4E.2:3C6．能与二氯化汞的乙醇溶液生成白色沉淀的药物是A．阿托品B．后马托品C．氢溴酸东莨菪碱D．异烟肼E．苯巴比妥A7．BP2000检查氢溴酸东莨菪碱中其他生物碱采用的方法是A．TLC自身稀释对照法B．TLC对照品对照法C．HPLC法D．PC法E．UV法B8．以下药物没有旋光性的是A．氢溴酸东莨菪碱B．阿托品C．丁溴东莨菪碱D．甲溴东莨菪碱E．氢溴酸山莨菪碱B9．ChP2010硫酸阿托品中有关物质检查的方法是A．HPLC标准品对照法B．HPLC主成分自身对照法C．TLC标准品对照法D．TLC自身稀释对照法E．UV法A10.采用酸性染料比色法测定药物含量，如果溶液pH过低对测定造成的影响是A．使In-浓度太低，而影响离子对的形成B．有机碱药物呈游离状态C．使In-浓度太高D．没有影响E．有利于离子对的形成（二）配伍选择题[11—14]A．HPLC法B．酸性染料比色法C．硝酸银电位滴定D．非水溶液滴定法E．双相滴定法以下药物ChP2010含量测定的方法是D11.硫酸阿托品原料药含量测定方法B12.硫酸阿托品制剂含量测定方法A13.氢溴酸东莨菪碱的含量测定方法C14.丁溴东莨菪碱原料药的含量测定方法[15—16] A．UV法B．HPLC法C．TLC法D．与三氯化铁呈色E．Vh出反应以下药物ChP2010杂质检查的方法是C15.氢溴酸山莨菪碱其他生物碱的检查B16.丁溴东莨菪碱有关物质的检查[17—19]A．重氮化一偶合反应B．Vitali厦应C．麦芽酚反应D．硫色素反应E．与三氯化铁呈色以下药物的特征鉴别试验是C17.链霉素D18.维生素B．B19.氢溴酸山莨菪碱（三）多项选择题ABC20.离子对高效液相色谱法要在流动相中加入与呈解离状态的待测组分离子电荷相反的离子对试剂，分析碱性物质时常用的离子对试剂有A．戊烷磺酸钠B．庚烷磺酸钠C．十二烷基磺酸钠D．四丁基溴化铵E．四丁基氢氧化铵DE21.离子对高效液相色谱法要在流动相中加入与呈解离状态的待测组分离子电荷相反的离子对试剂，分析酸性物质时常用的离子对试剂有A．戊烷磺酸钠B．庚烷磺酸钠C．十二烷基磺酸钠D．四丁基溴化铵E．四丁基氢氧化铵BE22.氢溴酸东莨菪碱中其他生物碱的检查方法是A．水溶液加入氨试液产生浑浊B．水溶液加入氨试液不得发生浑浊C．加入氢氧化钾试液则有浑浊D．加氢氧化钾试液无浑浊E．加氢氧化钾试液数滴，只发生瞬即消失的类白色浑浊 （四）是非判断题23.莨菪烷类抗胆碱药物是由莨菪烷衍生的氨基醇与不同有机酸缩合成酯的生物碱(T)24.莨菪烷类抗胆碱药物都具有水解性、碱性和旋光性(F)25.硫酸阿托品原料药的含量测定可以采用酸性染料比色法(F)26.ChP2010收载的莨菪烷类原料药都可以采用IR标准图谱对照法鉴别(T)27.ChP2010收载的丁溴东莨菪碱原料药含量测定方法是以硝酸银为滴定剂，电位法指示终点(T)（五）简答题28.简述酸性染料比色法的原理和影响因素29.简述莨菪烷类药物的结构与性质30.今有三瓶药物分别为硫酸阿托品(A)、氢溴酸东莨菪碱(B)和氢溴酸后马托品(C)，但瓶上标签脱落，请采用适当的化学方法将三者区分开。（六）计算题31.硫酸阿托品片（规格：0.3mg/片）的含量测定对照品溶液的制备：精密称取在120C干燥至恒重的硫酸阿托品对照品25.2mg，置25ml容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置l00ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。供试品溶液的制备：取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于硫酸阿托品2.5mg），置50ml量瓶中，加水振摇使溶解，并稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸过滤，收集续滤液，即得。测定法：精密量取对照品溶液和供试品溶液各2ml，分别置预先精密加入三氯甲烷l0ml的分液漏斗中，各加溴甲酚绿2.Oml，振摇提取两分钟后，静止分层，分取澄清的三氯甲烷液，在420nm波长处分别测定吸光度，计算，即得本品(C17H23N03)：．H2S04．H20相当标示量的百分含量。已知：供试品相对照品溶液的吸光度分别为0.375和0.349；供试品取样量为1.6905g;20片总重3.9728g。32.ChP2010硫酸阿托品含量测定：取本品约0.Sg，精密称定，加冰醋酸与醋酐各10ml溶解后，加结晶紫指示液1—2滴，用高氯酸滴定液(0.Imol/L)滴定至溶液显纯蓝色，并将滴定结果用空白试验校正。每Iml高氯酸滴定液(0.Imol/L)相当于69.48mg的(C17H23N03)2.H2S04.H20。已知：取样量为0.5009g，高氯酸滴定液浓度C=0.1028mol/L，滴定度T=69.48mg/ml；=0.04ml；V=7.05ml。 （七）设计题33.已知某原料药的结构式、分子式与分子量如下，请根据药物的结构与性质，设计本原料药的鉴别试验和采用容量分析法的含量测定方法，包括原理、操作要点（溶剂、滴定液、指示液等）、含量计算公式， 第十四章维生素类药物的分析一、基本要求1．掌握：维生素类药物的化学结构与理化性质的关系；掌握维生素A的三氯化锑鉴别反应（Carr-Price反应），紫外分光光度法（三点校正法）的原理与方法；维生素Bi的硫色素鉴别反应，非水滴定法和紫外分光光度法测定含量的原理与方法；维生素C的硝酸银、二氯靛酚钠的鉴别反应，碘量法和二氯靛酚滴定法测定含量的原理与方法。2．熟悉：维生素A的高效液相色谱法；维生素E的显色反应和气相色谱法测定含量的方法。3．了解：维生素类药物的其他鉴别反应和含量测定方法；维生素C的杂质检查方法；维生素D的显色反应和含量测定方法，麦角甾醇和有关物质的检查；生育酚及其有关物质的检查。二、基本内容从结构上看，维生素类药物并不属于同一类化合物，它们的化学性质和分析方法彼此均无联系。因此，只能逐个加以学习和记忆。本章介绍了维生素A、维生素B．、维生素C、维生素D、维生素E五种药物的结构、性质、鉴别试验、杂质检查（维生素C、维生素D、维生素E）和含量测定的原理与方法。三、习题与解答（一）最佳选择题C1．需检查游离生育酚杂质的药物是A．地西泮B．异烟肼C．维生素ED．丙磺舒E．甲芬那酸C2．可与2，6-=氯靛酚试液反应的药物是A．维生素AB．维生素B．C．维生素CD．维生素DE．维生素ED3．非水溶液滴定法测定维生素Bi时，维生素Bi与高氯酸的摩尔比是A.1:5B.1:4C.1:3D.1:2E.1:1D4．三点校正紫外分光光度法测定维生素A醋酸酯含量时，采用的溶剂是A．甲醇B．丙酮C．乙醚 D．环己烷E．三氯甲烷D5．三点校正紫外分光光度法测定维生素A醋酸酯含量时，规定在300nm、316nm、328nm、340nm、360nm五个波长下测得的吸光度比值与药典规定的吸光度比值之差不超过以下数值时，用在328nm波长处测得的吸光度计算含量A．±0.1B.土0.2C.±0.01D．±0.02E.±0.002B6．需要检查麦角甾醇杂质的药物是A．维生素EB．维生素D2C．维生素CD．维生素B．E．维生素AE7．维生素B．愿料药的含量测定方法是A．碘量法B．酸性染料比色法C．双相滴定法D．酸碱滴定法E．非水溶液滴定法B8．ChP2010收载的维生素E的含量测定方法是A．HPLC法B．CC法C．荧光分光光度D．UV法E．比色法C9．维生素B．注射液的含量测定方法是A．非水溶液滴定法B．异烟肼比色法C．紫外分光光度法D．Kober反应比色法E．碘量法（二）配伍选择题[10~11]A．硫色素反应B．三氯化锑反应C．与硝酸银反应D．水解后重氮化一偶合反应E．麦芽酚反应下列药物可采用的鉴别方法是B10.维生素AA11.维生素B1[12—14]A．硫色素反应B．糖类的反应C．三氯化锑反应D．三氯化铁反应E．坂口反应下列药物可采用的鉴别方法是C12.维生素DD13.维生素EB14.维生素C [15—18]A．氨基嘧啶环和噻唑环B．共轭多烯侧链C．烯二醇和内酯环D．B一内酰氨环和氢化噻唑环E．苯并二氢吡喃下列药物具有的结构是B15.维生素AC16.抗坏血酸A17.维生素B．E18.维生素E（三）多项选择题BE19.维生素A的含量测定方法有A．汞量法B．三点校正紫外分光光度法C．碘量法D．双相滴定法E．三氯化锑比色法ABC20.维生素C的鉴别方法有A．与硝酸银反应生成黑色银沉淀B．与碱性酒石酸铜试液反应生成砖红色沉淀C．在三氯醋酸存在下水解、脱羧、失水，再加入吡咯加热至50℃产生蓝色D．在碱性溶液中被铁氰化钾氧化生成硫色素，溶于正丁醇中显蓝色荧光E．在二氯乙烷溶液中，与三氯化锑试液反应即显橙红色，逐渐变为粉红色ACE21.维生素E的鉴别方法有A．硝酸反应B．三氯化锑反应C．三氯化铁反应D．硫色素反应E．紫外光谱法（四）是非判断题22.维生素A的结构为具有一个共轭多烯醇侧链的环己烯，因而具有许多立体异构体，具有相似的化学性质、光谱特性和生物效价(F)23.用三点校正紫外分光光度法测定维生素A醋酸酯含量时，应计算各波长下的吸光度与实际最大吸收波长处吸光度的比值(F)24.硫色素荧光反应为维生素B．的专属性反应，是测定维生素B-原料药的首选方法(F)25.维生素C显酸性，酸性的来源为C2-OH(F) 26.维生素C分子中的烯二醇基具极强的还原性，易被氧化为二酮基而成为无生物活性的去氢抗坏血酸(F)（五）简答题27.三点校正紫外分光光度法测定维生素A含量的依据（原理）是什么？28.用三点校正紫外分光光度法测定维生素A含量时，三点波长选择的原则是什么？第一法和第二法有何不同？29.维生素A可能含有的杂质有哪些？30.三点校正紫外分光光度法测定维生素A时，第一法（直接测定法）和第二法（皂化法）适用的情况，测定形式和所用溶剂有何不同？分别写出测定波长和校正公式。（六）计算题31.维生素A醋酸酯胶丸的含量测定：取内容物形，加环己烷溶解并稀释至l0ml，摇匀。精密量取0.1ml，再加环己烷稀释至l0ml，使其浓度为9~15IU/ml。已知内容物平均重量W为80.0mg，其每丸标示量为3000IU。求：取样量（形）的范围(g)。32.维生素AD胶丸中维生素A醋酸酯的测定方法如下：取内容物0.04lOg，加环己烷溶解并稀释至50ml，摇匀。取出2ml，加环己烷溶解并稀释至25ml，摇匀，在下列五个波长处测定吸收度值如下：已知：平均丸重（平均内容物重）=0.09lOg；标示量=10000IU/丸。求：维生素A醋酸酯的标示量%?（七）设计题33.根据以下药物的结构，用碘量法测定含量（包括反应方程式，使用溶剂或试剂及其目的，滴定剂，使用指示剂及滴定终点判断方法，取样量范围，并写出测定操作过程）。 第十五章甾体激素类药物的分析一、基本要求1．掌握：甾体激素类药物的分类、结构特征与分析方法之间的关系及甾体激素类药物的化学鉴别法、有关物质的色谱检查法、含量测定的HPLC法和UV法。2．熟悉：甾体激素类药物的光谱鉴别法、比色法测定含量的原理。3．了解：甾体激素类药物的其他分析方法。二、基本内容甾体激素类（steroidhormones）药物是一类具有环戊烷并多氢菲母核的激素类药物，有着十分重要的生理功能，包括天然激素类和人工合成品及其衍生物，目前临床使用的主要是后者。甾体激素类药物按药理作用可分为肾上腺皮质激素（adrenocorticalhormones）和性激素（sexhormones）两大类。性激素又可分为雄激素及蛋白同化激素(androgenandanabolicagent)、孕激素(progestin)和雌激素(estrogen)等。肾上腺皮质激素（简称皮质激素），代表性药物主要有氢化可的松、醋酸地塞米松、地塞米松磷酸钠、醋酸去氧皮质酮和醋酸曲安奈德等；雄激素及蛋白同化激素代表性药物主要有睾酮和苯丙酸诺龙；孕激素代表性药物主要有黄体酮、醋酸甲地孕酮、炔诺酮(norethisterone)相左炔诺孕酮；雌激素代表性药物主要有雌二醇、炔雌醇。以上药物为本章重点介绍的甾体激素类药物。甾体激素类药物均为具有甾烷母核的弱极性有机化合物，所以，均具有旋光性、脂溶性和紫外特征吸收的共同特征。不同的甾体激素药物具有不同的官能团，利用官能团的反应可以区别不同的药物。皮质激素类药物分子结构中C17位上的d一醇酮基具有还原性，能与四氮唑试液反应呈色广泛应用于皮质激素药物的鉴别、杂质检查和含量测定。皮质激素、孕激素、雄激素和蛋白同化激素药物结构中含有C3-酮基和C20-酮基，可以和异烟肼等羰基试剂反应，形成黄色的腙而用于鉴别。该反应也可用于定量分析，异烟肼可选择性地作用于C3-酮基，用于比色含量测定。黄体酮的分子结构中含有C17-甲酮基，具有活泼氢，可与亚硝基铁氰化钠反应，生成蓝紫色产物，该反应作为黄体酮的专属、灵敏的鉴别方法。雌激素C3位上的酚羟基，可与重氮苯磺酸反应生成红色偶氮染料，JP利用此反应对苯甲酸雌二醇进行鉴别。一些具有炔基的甾体激素药物，如炔雌醇、炔诺酮等，遇硝酸银试液，即生成白色的炔银沉淀加以鉴别。除此之外，甾体激素类药物还可采用紫外分光光度法、薄层色谱法、红外分先光度法进行鉴别。甾体激素类药物的有关物质检查常采用薄层色谱法或高效液相色谱法。 高效液相色谱法专属性强，目前已广泛应用于甾体激素类药物原料和制剂的含量测138药物分析学习指导与习题集定，各国药典多采用反相高效液相色谱法测定。紫外分光光度法虽然准确、简便，但专属性不强，不能区别药物和有关物质的紫外吸收，制剂中的一些辅料也有干扰。中国药典目前有少部分本类药物及制剂采用紫外分光光度法测量含量，如炔雌醚、炔孕酮、醋酸泼尼松龙片和氢化可的松片等。Kober反应是指雌激素与硫酸一乙醇的呈色反应，在515nm附近有最大吸收。此反应可用于雌性激素类药物的含量测定，但目前已被HPLC法取代。本类药物的分析方法见表15-1：三、习题与解答（一）最佳选择题C1．黄体酮的专属反应是A．与硫酸的反应B．斐林反应C．与亚硝基铁氰化钠的反应D．异烟肼反应E．硝酸银反应D2．甾体激素类药物的基本结构是A．分子结构中含酚羟基B．分子结构中含具有炔基C．分子结构中含芳伯氨基D．分子结构中具有环戊烷并多氢菲母核E．分子结构中含醇酮基B3．与碱性酒石酸铜试液反应生成砖红色沉淀的药物是A．黄体酮B．醋酸地塞米松C．炔雌醇D．甲睾酮E．苯丙酸诺龙E4．炔孕酮中存在的特殊杂质是A．氯化物B．重金属C．铁盐D．淀粉E．有关物质A5．地塞米松磷酸钠中游离磷酸盐的检查方法是A．磷钼酸比色法B．HPLC法C．红外分光光度法D．三氯化铁比色法E．TLC法E6．氢化可的松红外吸收光谱图中，羰基的伸缩振动波数是A.3600.3300cm－1B.3300.3000cm一1C.3000~2700cm-lD.2400-2lOOcm－1E.1900-1650cm-l B7．可与硝酸银试液生成白色沉淀的药物是A．氢化可的松B．炔诺酮C．雌二醇D．四环素E．青霉素D8．TLC法检查“有关物质”，采用自身稀释对照法进行检查时，所用的对照溶液是A．所检杂质的对照品B．规定对照品的稀释液C．规定使用的对照品D．供试品的稀释液E．所检药物的对照品C9．各国药典对甾体激素类药物常用HPLC法测定其含量，主要原因是A．它们没有特征紫外吸收，不能用紫外分光光度法B．不能用滴定分析法进行测定C．由于“有关物质”的存在，色谱法可消除它们的干扰D．色谱法比较简单，精密度好E．色谱法准确度优于滴定分析法E10.可同时用于甾体激素类药物的含量测定和“有关物质”检查的方法是A．TLC法B．薄层色谱洗脱分别定量法C．计算分光光度法D．紫外分光多波长法E．高效液相色谱法（二）配伍选择题[11~13]A．显有机氟化物的鉴别反应B．可发生硫色素反应C．加硝酸银试液，生成白色沉淀D．可发生戊烯二醛反应E．与重氮苯磺酸反应生成红色偶氮染料以下药物的鉴别反应是C11.炔雌醇A12.地塞米松磷酸钠E13.苯甲酸雌二醇[14—16]A．四氮唑比色法B．硫酸呈色反应C．气相色谱法D．硝酸银一氢氧化钠滴定法E．异烟肼比色法D14.利用分子中的乙炔基所建立的分析方法为 E15.利用A4.3-酮基所建立的分析方法为A16.利用C17-a-醇酮基所建立的分析方法为[17—18]A．高效液相色谱法B．荧光分析法C．气相色谱法D．紫外一可见分光光度法E．异烟肼比色法D17.倍他米松磷酸钠中游离磷酸盐的检查所采用的方法为C18.地塞米松磷酸钠中甲醇和丙酮的检查所采用的方法为（三）多项选择题ABDE19.关于药物结构特征下列说法正确的有A．雌激素的A环为苯环B．黄体酮具有甲酮基C．炔雌醇C10上有角甲基D．雌二醇具有酚羟基E．醋酸地塞米松C17上为－醇酮基的醋酸酯ABCDE20.下列试剂中，可用于氢化可的松反应呈色鉴别的有A．2,4-=硝基苯肼/H+B．浓硫酸C．硫酸苯肼/H+D．异烟肼/H+E．红四氮唑/OH-ABDE21.甾体激素类药物应检查的特殊杂质有A．硒B．游离磷酸盐C．聚合物D．甲醇和丙酮E．其他甾体ABD22.测定雌二醇含量可采用的方法有A．HPLC法B．UV法C．四氮唑比色法D．Kober反应比色法E．异烟肼比色法ABD23.以下属于的四氮唑盐有A.RTB.BTC.BTBD.TTCE.TB（四）是非判断题24.红外光谱法鉴别甾体激素类药物，《中国药典》主要采用对照品对照法(F)25.孕激素的A环为苯环，C17位有甲酮基，这些结构特征都可以供分析用(F)26.许多甾体激素能与强酸反应呈色，其中与磷酸的呈色反应应用广泛(F)（五）简答题27.用合适的化学方法区分下列药物：氢化可的松(A)、甲睾酮(B)、黄体酮(C)和雌二醇(D)。28.异烟肼比色法的反应原理、条件、应用范围以及测定中应注意的问题。 29.甾体红外光谱为何成为甾体鉴别的重要手段？（六）计算题30.地塞米松磷酸钠中游离磷酸盐的检查：精密称取本品20mg，置25ml量瓶中，加水15ml使溶解；另取标准磷酸盐溶液[精密称取经105℃干燥2小时的磷酸二氢钾0.35g，置1000ml量瓶中，加硫酸溶液(3→l0)l0ml与水适量使溶解，并稀释至刻度，摇匀；临用时再稀释10倍]4.0ml，置于另一个25ml量瓶中，加水11ml；各精密加钼酸铵硫酸试液2.5ml与l一氨基一2一萘酚-4-磺酸溶液1ml，加水至刻度，摇匀，在20℃放置30~50分钟，在740nm的波长处测定吸光度。供试品溶液的吸光度不得大于对照溶液的吸光度。计算其杂质限量。31.氢化可的松软膏(规榕：l0g：l00mg)的含量测定。对照品溶液的制备：精密称取氢化可的松对照品20mg，置l00ml量瓶中，加无水乙醇适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。供试品溶液的制备：精密称取样品2.0134g，置烧杯中，加无水乙醇约30ml，在水浴上加热使溶解，再置冰水中冷却，滤过，滤液置l00ml量瓶中，如此提取3次，滤液并人量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。测定法：精密量取对照品溶液与供试品溶液各1ml，分别置于干燥的具塞试管中，各精密加无水乙醇9ml与氯化三苯四氮唑试液1ml，摇匀，各精密加入氢氧化四甲基铵试液1ml，摇匀，在25℃的暗处放置40~45分钟，在485nm的波长处分别测定吸光度。测得：供试品溶液的吸光度为0.513；对照品溶液的吸光度为0.525。计算：氢化可的松软膏的标示量%。（七）设计题32.已知某药物结构式为：(1)该药物属于哪类药物，有哪些结构特点。(2)根据药物的结构，设计合理的化学鉴别反应（5个）；该药物应检查何种特殊杂质，现行版中国药典采用何种方法检查；其含量测定现行版中国药典采用何种方法；含量测定，亦可采用哪些比色法，简述其原理。33.今有三瓶药物分别为醋酸泼尼松(A)、苯丙酸诺龙(B)和炔诺酮(C)，但瓶上标签脱落，请采用适当的化学方法将三者区分开。（徐勤） 第十六章抗生素药物的分析一、基本要求1．掌握：抗生素类药物的化学结构特点与分析方法间的关系；B一内酰胺类抗生素的鉴别和含量测定方法；氨基糖苷类抗生素的鉴别和含量测定方法。2．熟悉：四环类抗生素有关物质的来源、检查方法（包括降解产物及异构体）。3．了解：抗生素类药物的主要杂质及检查法。二、基本内容（一）p内酰胺类抗生素青霉素和头孢菌素分子中都有一个游离羧基和酰胺侧链。氢化噻唑环或氢化噻嗪环与p-内酰胺并合的杂环，分别构成二者的母核。青霉素类分子中的母核称为6一氨基青霉烷酸（6-aminopenicillanicacid，简称6-APA）；头孢菌素类分子中的母核称为7一氨基头孢菌烷酸（7-aminocephalosporanicacid，简称7-ACA）。由此也可以说，青霉素类的分子结构由侧链RCO-与母核6-APA两部分结合而成；头孢菌素类是由侧链RCO-与母核7-ACA组成。本类药物的分子结构中有一个游离羧基，因此具有一定的酸性，能与氢氧化碱或有机碱成盐；B一内酰胺环是该类抗生素分子结构中最不稳定部分，在不同条件下部分水解生成青霉噻唑酸（碱性或青霉素酶）、青霉烯酸(pH4)和青霉酸(pH2)，在强酸、如热或金属离子催化下完全水解生成青霉醛、青霉胺和二氧化碳等降解产物而失活；青霉素类分子中含有三个手性碳原子，头孢菌素类含有两个手性碳原子，故都具有旋光性；头孢菌素类母核部分具有O=C-N-C=C结构，R取代基具有苯环等共轭系统，有紫外吸收；青霉素及头孢菌素可发生羟肟酸铁反应、茚三酮反应和钾盐或钠盐的火焰反应。本类药物的鉴别试验，ChP、USP、BP采用的方法主要为HPLC、IR和TLC法。本类抗生素的杂质主要有高分子聚合物、有关物质、异构体等，一般采用HPLC法控制其限量，也有采用测定杂质的吸光度来控制杂质量的。此外，有的还进行结晶性、抽针与悬浮时间等有效性试验，部分抗生素还要检查有机溶剂残留量。各国药典收载的青霉素类和头孢菌素类的含量测定除少数几个样品采用抗生素微生物检定法测定外，大多采用HPLC测定方法。 （二）氨基糖苷类抗生素本类抗生素的化学结构都是以碱性环己多元醇为苷元，与氨基糖缩合而成的苷，故称为氨基糖苷类抗生素（aminoglycosideantibiotics）。链霉素（streptomycin，SM，即链霉素A）的结构为一分子链霉胍和一分子链霉双糖胺结合而成的碱性苷。其中链霉双糖胺是由链霉糖与N-甲基-L-葡萄糖胺所组成。链霉胍与链霉双糖胺间的苷键结合较弱，链霉糖与N-甲基-L-葡萄糖胺间的苷键结合较牢。庆大霉素(gentamycin)是由绛红糖胺、脱氧链霉胺和加洛糖胺缩合而成的苷。它是庆大霉素C复合物，其主要组分是C1、C2、C1a。及C2a。尚有少量次要成分(如庆大霉素A1、A2、A3、A4、B、B1、X……)。庆大霉素C1、C2、C1a。三者结构相似，仅在绛红糖胺C石位及氨基上甲基化程度不同。C2a是C2的异构体。巴龙霉素(paromomycin)由巴龙胺和巴龙二糖胺结合而成的苷。本类药物的分子结构具有一些共同或相似处，具有相似的性质，如旋光性、水解反应及颜色反应。其中，与茚三酮反应、糠醛反应（Molisch反应）、葡萄糖胺反应(Elson-Morgan反应）等属于共有反应；而坂口反应（Sakaguchi反应）、麦芽酚反应（Maltol反应）是硫酸链霉素的特征反应。本类药物多为硫酸盐，因此，各国药典都将硫酸根的鉴定作为鉴别这类抗生素的一个方法。各国药典对本类抗生素的有关物质检查主要采用TLC和HPLC法。本类抗生素多为同系物组成的混合物，同系物的效价、毒性各不相同，为保证药品的质量，必须控制各组分的相对含量，如ChP2010对硫酸庆大霉素、硫酸小诺米星等规定了组分分析。本类抗生素的效价测定主要有微生物检定法和HPLC法。目前各国药典仍主要采用抗生素微生物检定法。各国药典对本类的部分药物采用HPLC法测定，如ChP2010采用HPLC-蒸发光散射法测定硫酸卡那霉素、硫酸依替米星等药物的含量。本类药物的分析方法见表16.2。（三）四环素类抗生素 本类抗生素在化学结构上，都具有四并苯或萘并萘环构成，故统称为四环素类(tetracyclines)抗生素。四环素类抗生素在酸性和碱性条件下均不稳定，四环素类药物中含有许多羟基、烯醇羟基及羰基，在中性条件下能与多种金属离子形成不溶性螯合物。与钙或镁离子形成不溶性的钙盐或镁盐，与铁离子形成红色络合物，与铝离子形成黄色络合物。本类药物分子中具有不对称碳原子，因此有旋光性；同时本类药物内含有共轭双键系统，在紫外光区有吸收；遇硫酸立即变色，不同的四环素类具有不同的颜色，加水稀释后变为黄色，可予以鉴别。本类药物在弱酸性(pH2.0~6.0)溶液中会发生差向异构化反应，形成差向四环素类(ETC)；在酸性条件下(pH<2)，特别是在加热情况下，生成脱水四环素(ATC)；在碱性溶液中，C环破裂，生成无活性的具有内酯结构的异构体。脱水四环素亦可进一步形成差向异构体，称差向脱水四环素(EATC)。本类药物中的有关物质主要是指在生产和贮存过程中易形成的异构杂质、降解杂质（ETC、ATC、EATC）等。ChP2010、USP34-NF29和BP2010均采周HPLC法控制四环素类抗生素中的有关物质。本类药物分子结构中含有共轭系统，在紫外光区有吸收，目前各国药典多采用高效液相色谱法进行含量测定。本类药物的分析方法见表16-3。三、习题与解答（一）最佳选择题A1．具有6-APA母核的药物是A．青霉素钠B．硫酸庆大霉素C．盐酸土霉素D．盐酸四环素E．头孢克洛E2．《中国药典》（2010年版）青霉素V钾的含量测定方法是A．碘量法B．微生物法C．酸性染料比色法D．气相色谱法E．高效液相色谱法C3．青霉素在pH=2条件下，易发生分子重排，其产物是A．青霉烯酸B．青霉醛C．青霉酸D．青霉胺E．青霉噻唑酸E4.具有B-内酰胺环结构的药物是 A.阿司匹林B．奎宁C．四环素D．庆大霉素E．阿莫西林A5．在碱性或青霉素酶的作用下，青霉素易发生水解，生成A．青霉噻唑酸B．青霉胺C．青霉酸D．青霉烯酸E．青霉醛D6.青霉素族药物在pH=4条件下，易发生分子重排，其产物是A．青霉胺B．青霉醛C．青霉酸D．青霉烯酸E．青霉噻唑酸B7．具有7-ACA母核的药物是A．阿米卡星B．头孢拉定C．盐酸四环素D．硫酸奈替米星E．盐酸美他环素D8．各国药典中用于氨基糖苷类药物的含量测定方法主要是A．紫外分光光度法B．红外分光光度法C．薄层法D．抗生素微生物检定法E．气相色谱法B9．可用糠醛反应（Molisch反应）鉴别的药物是A．青霉素钠B．庆大霉素C．盐酸四环素D．头孢拉定E．盐酸美他环素A10.链霉素具有的特征反应是A．坂口反应B．柯柏反应C．硫色素反应D．差向异构反应E．戊烯二醛反应E11.可发生麦芽酚反应的药物是A．氨苄西林B．头孢呋辛酯C．庆大霉素A12.HPLC法测定庆大霉素C组分，《中国药典》用蒸发光散射检测器检测的原因是A．分子结构中无共轭体系，在紫外区无吸收B．利用庆大霉素与巯基醋酸反应后具有紫外吸收C．利用分子结构中的氨基与茚三酮反应后具有紫外吸收D．利用分子结构中的氨基与邻苯二醛反应后具有紫外吸收E．利用分子结构中的氨基与8一羟基喹啉反应后具有紫外吸收D13.各国药典中四环素类药物的主要含量测定方法是A．紫外分光光度法B．气相色谱法C．比色法 D．高效液相色谱法E．微生物检定法A14.在弱酸性(pH=2.0~6．O)溶液中可发生差向异构化的药物是A．四环素B．土霉素C．青霉素D．多西环素E．美他环素E15.在酸性(pH<2)溶液中可发生脱水反应的药物是A．庆大霉素B．氨苇西林C．头孢呋辛酯D．链霉素E．四环素D16．盐酸四环素在碱性条件下，易降解生成的产物是A．金霉素B．差向脱水四环素C．脱水四环素D．异四环素E．差向四环素（二）配伍选择题[17—18JA．羟肟酸反应B．柯柏反应C．硫色素反应D．四氮唑盐反应E．麦芽酚反应下列药物可发生的反应是A17.磺苄西林钠E18.硫酸链霉素[19—21]A．与硫酸呈色反应B．戊二醛反应C．坂口反应D．火焰反应E．C．，．仅一醇酮基的呈色反应可用于下列药物鉴别的反应是D19.青霉素钾C20.硫酸链霉素A21.盐酸四环素[22~23]A．抗生素微生物检定法B．HPLC法C．碘量法D．硫色素荧光法 E．四氮唑比色法用于下列药物含量测定的方法是B22.青霉素钠B23.盐酸四环素[24—27]A．绛红糖胺B．链霉胍C．氢化噻嗪环D．氢化噻唑环E．环戊烷并多氢菲下列药物分子中含有的结构是C24.头孢氨苄D25.阿莫西林A26.庆大霉素B27.链霉素（三）多项选择题ABCDE28.具有旋光性的抗生素类药物有A．盐酸四环素B．头孢氨苄C．氨苄西林钠D．盐酸土霉素E．硫酸庆大霉素ACDE29.能发生羟肟酸铁反应的抗生素类药物有A．青霉素钾B．硫酸链霉素C．氨苄西林钠D．头孢他啶E．阿莫西林钠ABCE30.能用于链霉素鉴别的有A．N一甲基葡萄糖胺反应B．麦芽酚反应C．坂口反应D．硫色素反应E．茚三酮反应AD31.在弱酸性(pH2.0-6.0)溶液中可发生差向异构化的药物有A．盐酸四环素B．盐酸多西环素C．盐酸美他环素D．盐酸金霉素E．盐酸土霉素（四）是非判断题32.抗生素类药物具有化学纯度低、稳定性差的特点(T)33.一内酰胺类药物的一内酰胺环不稳定，易水解开环(T)34．四环素类药物分子结构中含有二甲氨基、酚羟基和烯醇基，具有酸碱两性(T) （五）简答题35.试比较抗生素类药物含量测定的微生物检定法与理化测定法的优缺点。36.简述一内酰胺类抗生素的结构特点与性质。37．简述氨基糖苷类药物的结构特点与鉴别反应。38.简述四环素类药物的稳定性。（胡震） 第十七章合成抗菌药物的分析一、基本要求1．掌握：喹诺酮类和磺胺类代表药物的常用鉴别方法和含量测定原理。2．熟悉：喹诺酮类和磺胺类药物的结构和性质；有关物质的检查方法。3．了解：喹诺酮类和磺胺类药物的体内分析方法。二、基本内容抗菌药包括喹诺酮类、磺胺类、抗结核药及抗真菌药等，本章主要讨论喹诺酮类和磺胺类药物的物理化学性质、鉴别反应、杂质检查、含量测定方法与原理。（一）喹诺酮类药物喹诺酮类抗菌药主要是由吡啶酮酸并联苯环、吡啶环或嘧啶环等芳香环组成的化合物，显示酸碱两性，具有紫外吸收特征，遇光照易分解。本类药物分子结构中含有共轭体系、分子中的叔胺基团与丙二酸和醋酐共热，生成有色产物，故可用与丙二酸的呈色反应及紫外光谱法进行鉴别。同时，ChP2010也广泛采用薄层色谱法、高效液相色谱法和红外光谱法鉴别该类药物；喹诺酮类药物有关物质的来源主要有工艺杂质和降解产物，ChP2010采用高效液相色谱法检查其有关物质；利用喹诺酮类药物具有酸碱两性和紫外吸收的特征，目前中国药典主要采用非水溶液滴定法、紫外分光光度法和高效液相色谱法等测定其含量。（二）磺胺类药物磺胺类药物具有对氨基苯磺酰胺结构，在水中几乎不溶，溶于稀盐酸或氢氨化钠溶液，易溶于乙醇、丙酮，显酸碱两性。一般含有游离的芳伯氨基，可发生重氮化一偶合反应，结构中磺酰氨基的氢原子比较活跃，可被金属离子（如银、铜、钴等）取代，生成不同颜色的金属盐沉淀。常以金属离子的取代反应、芳香第一胺反应、红外光谱法和高效液相色谱法鉴别该类药物；磺胺类药物大多需要进行酸度、碱性溶液的澄清度与颜色、氯化物等一般杂质的检查。此外，还需要进行特殊杂质的检查，检查方法一般采用薄层色谱法；ChP2010主要采用高效液相色谱法、容量分析法（非水溶液滴定法、沉淀滴定法和亚硝酸钠滴定法）等测定磺胺类药物的含量。ChP2010收载喹诺酮类原料药及制剂共45个品种，磺胺类药物原料及制剂共34个品种，本章药物的分析方法见表17-1和表17-2。三、习题与解答 （一）最佳选择题A1．下列能作为测定左氧氟沙星中光学异构体的HPLC流动相添加剂使用的金属离子是A.Cu2+B.Fe3+C.C02+D.Na+E.Au3+C2．《中国药典》（2010年版）鉴别诺氟沙星采用的方法是A．紫外分光光度法B．气相色谱法C．高效液相色谱法D．化学反应鉴别法E．红外分光光度法A3．具有丙二酸呈色反应的药物是A．诺氟沙垦B．磺胺嘧啶C．磺胺甲嗯唑D．司可巴比妥E．盐酸氯丙嗪C4．《中国药典》（2010年版）氧氟沙星中“有关物质”检查采用的方法是A．紫外分光光度法B．薄层色谱法C．高效液相色谱法D．气相色谱法E．毛细管电泳法C5．《中国药典》（2010年版）对于盐酸洛美沙星片的含量测定采用的方法是A．紫外分光光度法B．非水溶液滴定法C．离子对高效液相色谱法D．气相色谱法E．荧光分光光度法A6．左氧氟沙星原料药的含量测定，《中国药典》（2010年版）采用的是离子对高效液相色谱法，其中所用的离子对试剂是A．高氯酸钠B．乙二胺C．磷酸二氢钠D．庚烷磺酸钠盐E．氢氧化四丁基铵D7．复方磺胺甲嗯唑中所包含的有效成分是A．磺胺甲嗯唑和磺胺嘧啶B．磺胺嘧啶和对氨基苯磺酸C．磺胺异嗯唑和磺胺甲嗯唑D．磺胺甲嗯唑和甲氧苄啶E．磺胺和对氨基苯磺酸B8．下列含量测定方法中，磺胺类药物未采用的方法是A．沉淀滴定法B．溴酸钾法C．紫外分光光度法D．非水溶液滴定洼E．亚硝酸钠滴定法A9．用亚硝酸钠滴定法测定磺胺甲嗯唑含量时，ChP2010选用的指示剂或指示终点的方法是A．永停法B．外指示剂法’C．内指示剂法D．淀粉E．碘化钾一淀粉 A10.复方磺胺甲嚼唑注射液中磺胺、对氨基苯磺酸以及甲氧苄啶降解产物的检查．ChP2010采用的方法是A．薄层色谱法B．紫外分光光度法C．高效液相色谱法D．比色法E．高效毛细管电泳法（二）配伍选择题[11—12JA．吸光度B．甲醇与乙醇C．光学异构体D．乙醚、乙醇与丙酮E．防腐剂E11.除去吸光度外，诺氟沙星滴眼液应检查的是C12.左氧氟沙星应检查的是[13—15]A．重氮化反应B．与生物碱沉淀剂反应C．铜盐反应D．A与B两项均有E．以上各项均没有C13.利用磺胺类药物结构中的磺酰胺基进行鉴别的反应有E14.利用磺胺类药物结构中Nl上具有嘧啶类取代基的分解产物，而进行鉴剔的反应有B15.利用磺胺类药物结构中N1上的含氮杂环取代基进行鉴别的反应有[16—19]A．紫外分光光度法B．双波长分光光度法C．非水酸量法D．两步滴定法E．高效液相色谱法E16.ChP2010复方磺胺嘧啶片中的甲氧苄啶含量测定采用B17.ChP2005复方磺胺甲嚼唑片中的甲氧苄啶含量测定采用E18.ChP2010中诺氟沙星乳膏的含量测定采用C19.ChP2010中磺胺异嗯唑的含量测定采用[20—23]A．溴化钾B．盐酸C．NOBrD．快速重氮化法E．分子间反应用永停滴定法测定磺胺类药物含量时，反应条件为：A20.为使反应速度加快，可加入D21.为避免亚硝酸挥发与分解，缩短滴定时间，可采用C22.在酸性溶液中，溴化钾与亚硝酸反应可生成 E23.重氮化反应为（三）多项选择题BCDE24.喹诺酮类药物采用的鉴别反应或方法有A．硫酴铜反应B．红外光谱法C．高效液相色谱法D．丙二酸反应E．紫外分光光度法ABC25.喹诺酮类药物的含量测定方法有A．非水溶液滴定法B．紫外分光光度法C．HPLC法D．荧光分光光度法E．配位滴定法ACE26．磺胺类药物的鉴别方法有A．红外光谱法B．烯丙基的反应C．与硫酸铜的反应D．三氯化铁反应E．芳香第一胺的反应BCD27.测定磺胺类药物含量常用的方法有A．电泳法B．紫外分光光度法C．非水溶液滴定法D．永停滴定法E．碘量法AB28．能与金属离子C02+反应显色的药物有A．巴比妥B．磺胺嘧啶C．阿托品D．异烟肼E．氧氟沙星ABCD29．具有酸碱丙性的药物有A．磺胺嘧啶B．磺胺异嗯唑C．吡哌酸D．依诺沙星E．硫喷妥钠ABC30.复方磺胺甲嗯唑注射液中有关物质检查包括A．磺胺B．对氨基苯磺酸C．甲氧苄啶降解产物D．光学杂质E．甲醇（四）是非判断题31．喹诺酮类药物有关物质的来源主要分为2个途径，一是工艺杂质，二是降解产物(T)32.ChP2010规定了左氧氟沙星原料药中右氧氟沙星的限量，采用手性色谱柱法测定(F)33.磺胺甲嗯唑用亚硝酸钠滴定法测定含量时，选用外指示剂法指示终点(F)34.ChP2010规定磺胺异嚼唑中有关物质检查采用薄层色谱法(T) 35.磺胺类药物的含量测定方法有高效液相色谱法、滴定法（非水溶液滴定法、永停滴定法和络合滴定法）等(F)（五）计算题36.盐酸左氧氟沙星胶囊含量测定：取装量差异项下的内容物，混匀，精密称取适量（约相当于左氧氟沙星40mg），置l00ml星瓶中，加0.1mol/L盐酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过。精密量取续滤液10ml，置l00ml量瓶中，用0.1mol/L盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，精密量取20l注入液相色谱仪，记录色谱图；另取左氧氟沙星对照品适量，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。已知盐酸左氧氟沙星胶囊的规格为0.1g；平均装量为0.1889g；称取内容物质量0.0988g。若对照品溶液的浓度为40g/ml，供试品溶液与对照品溶液的峰面积分别为：1467和1165，求其标示量的百分含量。37.精密称取磺胺异嚼唑0.5000g，加二甲基甲酰胺适量使溶解，加偶氮紫指示液3滴，用甲醇钠滴定液(0.1mol/L)漓定至终点，结果消耗滴定液18.65ml，空白试验消耗0.09ml。求磺胺异嗯唑的含量。每1ml甲醇钠滴定液(0.1mol/L)相当于26.73mg的CIIH13N303S。（六）简答题38.左氧氟沙星原料药中右氧氟沙星的限量。采用配合交换手性流动相高效液相色谱法测定，其原理是什么？39.采用永停滴定法测定磺胺类药物含量时，为何要在强酸性中进行？40.试述双波长法测定复方磺胺嘧啶片含量的原理。（七）设计题41.用简便的化学方法区分下列各组药物：吡哌酸和氧氟沙星；磺胺甲嗯唑和磺胺嘧啶；磺胺异嗯唑和磺胺甲嗯唑。42.已知某药物的结构式（分子式与分子量）如下：请根据药物的结构与性质，设计合理的含量测定方法，包括原理、操作要点、含量计算公式。（杜斌） 第十八章药物制剂分析概论一、基本要求1．掌握：片剂和注射剂的分析。2．熟悉：软膏剂的分析和复方制剂分析。3．了解：药物制剂类型及其分析特点。二、基本内容由于药物制剂含有活性成分和辅料，其组成复杂，有些药物制剂有效成分含量低，药物制剂须进行剂型检查等，药物制剂分析通常比原料药分析困难。不同类型的药物制剂，其质量控制项目、质量指标、分析方法及样品预处理方法也常常不同。药物制剂的性状鉴别是药物制剂质量控制不可缺少的组成部分，能够在一定程度上体现药品的质量。药物制剂的鉴别方法可以由相应原料药的鉴别方法修改得到。通常，药物制剂的辅料对药物的鉴别有干扰，可排除干扰后鉴别、取消该鉴别试验或改用其他鉴别方法（多改为分离分析方法）；当药物制剂的辅料对药物的鉴别无干扰时，可直接采用原料药的鉴别试验鉴别制剂。如ChP2010阿司匹林片剂直接采用了原料药三氯化铁反应鉴别试验，取消了原料药水解反应和红外分光光度法鉴别试验，增加了具有分离和分析功能的HPLC鉴别试验。当药物制剂的辅料对药物的鉴别无干扰时，可直接采用原料药的鉴别试验鉴别制剂。药物制剂检查包括杂质检查、剂型检查和安全性检查。药物制剂的杂质检查主要包括似下两个方面：①制剂制备和贮藏过程中可能产生的（原料药未控制的）杂质；②制剂制备和贮藏过程中可能增加的（原料药已控制的）杂质。为了保证药物制剂的稳定性、均一性、有效性和安全性，ChP2010在附录“制剂通则”收载的剂型项下规定了不同剂型的常规检查项目，主要包括剂型检查与安全性检查。《中国药典》规定片剂、注射剂、软膏剂常规检查项目，见表18.1。药物制剂的含量测定方法常常与相应原料药的含量测定方法不同。药物制剂的辅料常需采用过滤、提取、色谱分离等方法排除其干扰，或使用选择性更强的分析方法；小剂量制剂常需采用浓缩等方法提高供试品溶液浓度，或使用灵敏度更高的分析方法；缓释制剂常需采用超声等方法促使药物释放完全。如ChP2010硫酸阿托品的含量采用非水溶液滴定法测定，硫酸阿托品片（0.3mg/片）的含量采用酸性染料比色法测定。片剂和注射剂中常见附加剂的干扰及其排除，见表18-2。 表18-2片剂和注射剂中常见附加剂的干扰及其排除制剂的含量计算公式：片剂的含量测定结果通常以相当于标示量的百分率表示。计算公式如下：1．容量分析法(1)直接滴定法：(2)直接滴定法，同时进行空白试验：(3)剩余滴定法，同时进行空白试验：式中，T为滴定度(mg/ml)，每1ml规定浓度的滴定液相当于被测组分的mg数；F为滴定液浓度校正因数；蚝和V0分别为样品和空白消耗滴定液的体积(ml)；W为片粉的取样量(g)；形为平均片重（g/片）。2．紫外一可见分光光度法(1)百分吸收系数法：(2)对照比较法：式中，AX为供试品溶液的吸光度；D为稀释体积（相当于片粉的总溶解体积，ml）；为平均片重（g／片）；E：二为百分吸收系数；100为浓度换算因数，系将g/l00ml换算为g/ml；W为片粉的取样量(g)；标示量（g／片）；CR.AR分别为对照溶液的浓度和吸光度。3．HPLC法式中，Ax.AR分别为供试品溶液和对照品溶液中待测物的峰面积；其他符号意义同前。三、习题与解答（一）最佳选择趣D1．平均片重0.30g以下片剂重量差异限度为 A.±1.00-10B.±3.0%C.±5.O%D.t7.5%E.±loo-/oD2．注射用无菌粉末，平均装量为0.50g以上时，其装量差异限度为A.±15%B.±l0%C.±7%D.±5%E.±1%B3．以淀粉、糊精等作为稀释剂时，对片剂的主药进行含量测定，最有可能受到干扰的测定方法是A．EDTA滴定法B．氧化还原滴定法C．HPLC法D．GC法E．酸碱滴定法C4.2010年版《中国药典》复方磺胺甲嚼唑含量测定方法是A．分光光度法B．双波长分光光度法C．HPLC法、D．GC法E．容量分析法A5．含量均匀度检查主要针对A．小剂量的片剂B．大剂量的片剂C．水溶性药物的片剂D．难溶性药物片剂E．以上均不对（二）配伍选择题[6—9]A．不溶性微粒B．崩解时限C．溶散时限D．粒度E．沉降体积比B6．片剂检查项目A7．注射剂检查项目D8．散剂检查项目E9．混悬荆检查项目[10—11]A.应加入氰化钾作为掩蔽剂B.应加入丙酮作为掩蔽剂C．应利用主药和抗氧剂紫外吸收光谱差异进行测定D．应提取分离后滴定E．应避免使用HPLC法B10.采用碘量法测定维生素C注射液含量时，排除抗氧剂的干扰D11.采用非水溶液滴定法滴定片剂含量时，排除润滑剂硬脂酸镁的干扰[12~13] A．乳糖B．硬脂酸镁C．滑石粉D．水E．麻油A12.干扰氧化还原滴定法的附加剂是B13.干扰配位滴定法的附加剂是（三）多项选择题CD14.片剂常规检查项目有A．粒度B．融变时限C．重量差异D．崩解时限E．干燥失重AB15.注射剂中细菌内毒素检查方法有A．凝胶法B．光度测定法C．酸碱滴定法D．氧化还原法E．比色法CE16.药物制剂的检查中，以下说法正确的有A．杂质检查项目应与原料药的检查项目相同B．杂质检查项目应与辅料的检查项目相同C．除杂质检查外还应进行制剂方面的常规检查D．不再进行杂质检查E．杂质检查主要是检查制剂生产、贮存过程中引入或产生的杂质BCDE17．当注射剂中有抗氧剂亚硫酸钠或亚硫酸氢钠时，可被干扰的含量测定方法有A．络合滴定法B．亚硝酸钠滴定法C．铈量法D．碘量法E．氧化还原滴定法BCE18.排除注射剂中注射用植物油干扰的方法有A．加入掩蔽剂B．萃取法C．有机溶剂稀释法D．容量法E．柱色谱法（四）是非判断题19.当主药与片剂辅料的混合不均匀时，应以含量均匀度检查替代重量差异检查(T)20.凡规定检查溶出度的制剂，不再检查崩解时限(T)21.在制剂分析中对所用原料药物做过的检查项目，没有必要重复做(T)22．以植物油为溶剂的注射液需要检查植物油的酸值、碘值、皂化值及羟基(T)23.糖衣片与肠溶衣片的重量差异检查应在包衣后进行(F)（五）简答题 24.药物制剂分析与原料药分析相比较有哪些不同？25.片剂中的糖类对哪些分析测定方法有干扰？如何进行消除？26.硬脂酸镁对哪些测定方法有干扰？如何进行消除？27.注射液中抗氧剂对哪些测定方法有干扰？如何排除注射液中抗氧剂的干扰？（六）计算题28.采用紫外分光光度法测定片剂含量：精密称取片剂10片，重量为3.5622g，研细。取上述片粉适量，精密称定重量为0.0433g，置250ml量瓶中，加规定溶剂使溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置l00ml量瓶中，加规定溶剂稀释至刻度，摇匀，在257nm波长处测定溶液的吸光度为0.485。已知：药物吸收系数()为715，片剂标示量为每片0.30g。计算：片剂含量为标示量的百分数。29.取标示量为0.Sg/片的阿司匹林片剂10片，称定重量为5.7683g，研细后，精密称取片粉0.3577g，采用两步滴定法测定。已知：终点时消耗硫酸滴定液(0.05020mol/L)22.94ml，空白试验消耗该硫酸滴定液39.85ml。每1ml硫酸滴定液(0.05mol/L)相当于1ml氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)，相当于18.02mg的阿司匹林。试求：阿司匹林片标示量%。30.异烟肼片的含量测定，取标示量为l00mg的本品20片，总重量为2.2680g，研细，称取片粉0.2887g．置l00ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml，用溴酸钾滴定液(0.01733mol/L)滴定，消耗17.92ml。每1ml溴酸钾滴定液(0.01667mol/L)相当于3.429mg的异烟肼，求其含量占标示量的百分率%。（七）设计题31.已知复方甘草片的处方为：制法：取甘草浸膏烘干，研碎，加苯甲酸钠、阿片粉或罂粟果提取物粉均匀混合制成颗粒后，加入用少量乙醇溶解的樟脑与八角茴香油，混匀压制成片，即得。本品为祛痰镇咳药，每片中含无水吗啡(C17H19NO3)应为0.36～0.44mg;含甘草酸(C42H62016)不得少于7.3mg。本品性状为棕色片或棕褐色片或薄膜包衣片，除去包衣 后，显棕色或棕褐色；有特臭，味甜；易吸潮。请设计其定性、定量的分析方法，包括原理和操作方法。（丘琴） 第十九章中药及其制剂分析概论一、基本要求1．掌握：中药及其制剂的质量标准；中药分析常用的方法和技术；中药样品的主要制备方法。2．熟悉：各类中药及其制剂的质量分析要点。3．了解：中药和中药分析的特点；体内中药分析研究现状及进展。二、基本内容中药分析是以中医药理论为指导，应用现代分析方法，研究中药材和饮片、提取物和中药制剂质量的一门学科。ChP2010-部收载的药品为药材和饮片、植物油脂和提取物、成方制剂和单味制剂，中药分析根据每一类中药的特点进行，各部分质量控制应严格执行国家药品标准。（一）取样中药及其制剂的分析检验，一般多采取估计取样，取样要具有代表性，应严格按照规定的取样方法进行，并遵循均匀、合理的基本原则。（二）中药分析用样品制备方法中药及其制剂组成复杂，除含有附加剂外，原药材的提取物中还含有许多的化学成分，在测定前需提取待测组分，常用的提取方法有超声提取法、回流提取法、连续回流提取法（使用索氏提取器连续进行提取）、萃取法、水蒸气蒸馏法（适用于挥发性组分）、超临界流体萃取法(SFE)等。如果制剂的组成复杂，或使用专属性不太强的测定方法，则要对提取液进行纯化处理。纯化方法多采用色谱法，加柱色谱法，或固相萃取等。（三）中药的鉴别中药及其制剂的鉴别主要是根据中药材、中药制剂的性状、组织学特征以及所含化学成分的理化性质，采用一定的分析方法，通过确认其中所含药味的存在或某些特征成分的检出，来判断该中药材及其制剂的真伪。鉴别方法主要包括性状鉴别、显微鉴别（药材和饮片及含药材粉末的制剂）、理化鉴别和色谱鉴别等。色谱鉴别常用纸色谱法、薄层色谱法(TLC)、气相色谱法(GC)、高效液相色谱法(HPLC)和高效毛细管电泳法等。其中’rLC法应用最多，GC法适用于含挥发性成分的药物（冰片、麝香等）的鉴别，HPLC法鉴别常与含量测定同时进行。（四）中药的检查项目与内容 中药及其制剂的检查项目主要有药材中混杂的杂质检查、水分测定、总灰分和酸不溶性灰分测定、重金属及有害元素测定、农药残留量测定、其他必要的有关杂质检查、黄曲霉素、乙醇量、膨胀度和酸败度测定等。其中，水分测定法ChP2010-部收载的有4种：烘干法（不含或少含挥发性成分）、甲苯法（含挥发性成分）、减压干燥法（含挥发性成分贵重药）和气相色谱法。总灰分系指药材或制剂经炽灼灰化后残留的无机物，测定总灰分主要是控制药材中泥土、砂石的量，同时还可以反映药材生理灰分的量。酸不溶性灰分能更准确地反映出外来杂质的量。对中药及其制剂中残留农药检查时，当接触农药不明时，一般可以测定总有机氯和总有机磷的限量。中药及其制剂的农药残留量除另有规定外均采用气相色谱法测定。ChP2010对中药注射剂全部增加重金属和有害元素限度标准。（五）中药及其制剂中化学成分的含量测定中药及其制剂定量分析时指标成分的选择原则为：①首选君药及贵重药、剧毒药建立含量测定方法，其次考虑臣药或其他药味。中药和化学药品组成的复方制剂，除君药外所含化学药品也必须建立含量测定项且。②应选专属性强的有效成分或指标成分测定含量。③成分类别清楚的，可测某一类总成分的含量。④检测成分应归属某单一药味。⑤测定成分应与中医理论、用药的功能主治相近。⑥确实无法含量测定的，可测定药物的总固体量。中药及其制剂的含量测定方法有HPLC法、GC法、薄层色谱扫描法(TLCS)、高效毛细管电泳法(HPCE)、电化学方法、分光光度法、化学分析法和生物学方法等。其中HPLC法是中药及其制剂含量测定的首选方法，GC法主要用于测定药材和饮片、制剂中含挥发油及其他挥发性组分的含量。薄层色谱扫描法可以作为高效液相色谱法的补充，用于无紫外吸收或不能采用高效液相色谱法分析的组分的含量测定。（六）中药及其制剂质量整体控制中药药效的发挥是通过多种成分协同作用于机体的多个靶点而实现的，因此应从整体上来控制中药的质量。中药及其制剂分析大都选择多指标成分进行含量测定，力求更客观地表征其内在质量。中药外标法加校正因子的含量测定方法适用于对照品难得、制备成本高或不稳定的情况下的同类多成分的同时测定。中药指纹图谱，特别是色谱指纹图谱是目前最能满足表征中药成分整体特性的技术。色谱指纹图谱在中药质量评价中能够尽可能多地厦映中药的全貌，不需要清楚每一个组分的化学结构，不需要对每一个组分都进行定量，只要求不同批号的同一种药品的指纹图谱保持一致。三、习题与解答（一）最佳选择题 A1．中药检查项下的总灰分是指A．药材或制剂经炽灼灰化后残留的无机物B．药材或制剂经炽灼灰化遗留的有机物质C．中药材所带的泥土、砂石等不溶性物质D．药物中遇硫酸氧化生成硫酸盐的无机杂质E．中药的生理灰分E2．对中药制剂分析的项目叙述错误的是A．中药注射剂的检查项目有装量差异、无菌、澄明度和pH等B．合剂、口服液的检查项目有相对密度和pH测定等C．颗粒剂的检查项目有粒度、水分、溶化性、装量等D．散剂的检查项目有粒度、外观均匀度、水分和装量等E．丸剂的检查项目主要有溶散时限和含糖量等C3．中药及其制剂分析时，最常用的纯化方法是A．萃取法B．结晶法C．柱色谱法D．薄层色谱法E．水蒸气蒸馏法C4．在中药及其制剂分析中，应用最多的鉴别方法是A．HPLC法B．GC法C．TLC法D．UV法E．IR法C5．在中药材的灰分检查中，更能准确地反映外来杂质质量的是A．总灰分B．硫酸盐灰分C．酸不溶性灰分D．生理灰分E．碳酸盐灰分C6．对中药及其制剂进行残留农药检查时，当接触农药不明时，一般可测定A．总有机氯量B．总有机磷量C．总有机氯量和总有机磷量D．总有机溴量E．总有机溴量和总有机氯量D7．以下药品中需进行显微鉴别的是A．山楂叶提取物B．肉桂油C．清开灵注射液D．三七E．西洋参口服液E8．对易霉变的桃仁、杏仁、酸枣仁等需额外进行的检查项目是．A．含氯量测定B．含磷量测定C．妥布霉素测定D．含硫量测定E．黄曲霉素测定 （二）配伍选择题[9—10]以下水分测定法中A．甲苯法B．减压干燥法C．烘干法D．气相色谱法E．高效液相色谱法B9．含挥发性成贫贵重药的药品中水分测定用C10.不含或少含挥发性成分的药品中水分测定用[11—13]A．性状鉴别B．微量升华法鉴别C．色谱鉴别D．显微鉴别E．化学鉴别A11.利用其外观、形状及感官性质等特征作为真伪鉴别依据的方法是E12.矿物药的主要成分为无机化合物，其鉴别方法是C13.中药制剂中最常用的鉴别方法是[14~17]A．硅胶G板B．氧化铝板C．纤维素板D．聚酰胺板E．硅藻土板B14.薄层色谱法鉴别生物碱类成分，通常采用的是D15.薄层色谱法鉴别黄酮类成分，通常采用的是D16.薄层色谱法鉴别酚类化合物，通常采用的是C17.薄层色谱法鉴别氨基酸成分，通常采用的是[18—20]A．超声波提取法B．萃取法C．连续回流法D．水蒸气蒸馏法E．超临界流体萃取法D18.提取挥发性有效成分，常采用的方法是B19.提取液体制剂中的待测组分，常采用的方法是C20.需使用索氏提取器迸行的提取方法是[21~23]A．正丁醇B．乙酸乙酯C．三氯甲烷D．石油醚E．四氯化碳C21.生物碱类成分的萃取溶剂多选用D22.挥发油类成分的萃取溶剂多选用 A23.皂苷类成分的萃取溶剂多选用（三）多项选择题ABDE24．《中国药典》2010年版（一部）正文收载的药品有A．丸单味制剂B．中药材和饮片C．药用辅料D．成方制剂E．植物油脂和提取物ABCDE25.以下项目可用气相色谱法分析的有A．冰片B．麝香C．肉桂油中含水量的测定D．有机氯类农药残留E．丁香酚ABE26.中药及其制剂定性分析中可以作薄层鉴别用对照物的有A．有效成分对照品B．有效部位对照品C．内标溶液D．待测样品稀释液E．对照药材、（四）是非判断题27.中药制剂的鉴别应着重于君药和臣药、贵重药和毒副药(T)28.显微鉴别几乎可适用于所有中药制剂(F)29.各类中药制剂的取样量均应当不少于检测用量的3倍(F)30.超临界流体萃取法中最常使用的超临界流体是C02，其具有较低的临界温度和临界压力(T)31.萃取用溶剂应根据组分的溶解性来选择，测定组分在其中的溶解度小，杂质在其中的溶解度大(F)32.中药定量分析时若确实无法进行含量测定的，可测定药物的总固体量(T)（五）简答题33.试述中药及其制剂的鉴别药味的选取原则。34.中药材检查的主要项目有哪些？35.中药及其制剂的含量测定中，测定成分的选择原则是什么？36.中药制剂化学成分含量测定的主要方法有哪些？各有何优缺点？（六）设计题37.藏木香（上racemosaHook.f）为菊科旋覆花属（Inulae）植物，以根入药。藏木香中主要活性成分土木香内酯和异土木香内酯，具有显著的抗炎、抑菌、保肝、调节心脏、抗病毒及抗肿瘤等作用。试根据所学知识设计藏木香中主要活性成分异土木香内酯和土木香内酯的含量测定方法并进行方法学验证。（石玉杰） 第二十一章药品质量控制中现代分析方法的进展一、基本要求1．掌握：药物分析主要新技术的原理。2．熟悉：药物分析主要新技术的应用。3．了解：药物分析新技术的发展。二、基本内容随着药品质量的日益重视和我国自主创新药物研制的迫切需要，色谱分析和光谱分析已成为最重要的分析方法，色谱分析和光谱分析技术结合的联用技术更是必不可少，发展亦十分迅速，已广泛应用于药物及其制剂质量控制中的鉴别、检查或含量测定各项。应该说，现代药物分析方法与技术为现代药学的发展提供了适时而有效的辅佐和动力。本章介绍了几种有应用前景的现代分析方法与技术，包括毛细管电泳、超高效液相色谱、手性HPLC技术、GC-MS技术、LC-MS技术、LC-NMR技术等。有的方法为国内外近版药典附录中新增者，本章对其基本原理、基本方法和应用示例作了简要阐述。三、习题与解答（一）最佳选择题A1．下列化合物不属于手性HPLC技术中手性流动相添加剂的是A．纤维素B．环糊精C．光活性氨基酸D．奎宁E．奎尼丁B2．下列不属于毛细管电泳技术中常用检测器的是A．紫外一可见分光检测器B．热导检测器C．激光诱导荧光检测器D．电化学检测器E．质谱检测器C3．在毛细管电泳中将样品夹在两种电解质间的电泳模式是A．乇细管等电聚焦电泳B．毛细管电色谱C．毛细管等速电泳D．毛细管凝胶电泳E．胶束电动毛细管色谱（二）配伍选择题[4～6]A．以牛血清蛋白(BSA)和人血中主要成分仅．一酸性糖蛋白(AGP)通过氨基酸键 合到微粒硅胶上制成蛋白质类键合固定相B．将手性试剂加入流动相中，手性添加剂与样品所形成的各种手性络合物C．色谱分离时，当UV检测到色谱峰时，将流出物收集并暂时贮存到不同的毛细管回路内，由NMR谱仪逐一离线测定各流份D．当样品色谱峰最高点到达NMR液槽的中心位置时，停止流动，进行一维或二维NMR采样E．样品由HPLC常规检测器（UV等）出口，用毛细管直接连接到专用NMR探头的液槽以下各类LC-NMR联用技术的操作模式是E4．连续流动操作模式D5．停流操作模式C6．峰存贮操作模式[7—9]A．颗粒度和柱床填装的优良程度B．色谱柱内径对分离的影响C．传质D．填料种类对分离的影响E．轴向扩散在UPLC的vanDeemter方程式中，A、B、C各项代表的含义是A7．A代表E8．B代表C9．C代表（三）多项选择题ABCDE10.ChP2010中LC-MS联用的接口技术有A．电喷雾接口B．热喷雾接口C．离子喷雾接口D．粒子束接口E．解吸附技术BCE11.UPLC存在的问题有A．压力较普通液相低B．溶剂的压缩性C．安全因素D．分离效率差E．摩擦热效应BDE12.GC-MS联用的接口类型有A．电喷雾接日B．直接导入型 C．大气压化学离子化接口D．分流型E．浓缩型（四）是非判断题13.UPLC色谱柱的填料颗粒直径在5m左右(F)14.CZE电泳模式中只能使用水相缓冲溶液(F)15.UPLC操作中流速不受限制，且越高越好(F)（五）简答题16.简述毛细管电泳的主要分离模式。17.简述手性流动相拆分法常用的手性添加剂类别。18.简述UPLC关键技术。1、简述《中国药典》附录收载的内容。答：药典附录主要收载制剂通则、通用检测方法和指导原则。制剂通则系按照药物的剂型分类，针对剂型特点所规定的基本技术要求。通用检测方法系正文品种进行相同检查项目的检测时所应采用的统一的设备、程序、方法及限度等。指导原则系为执行药典、考察药品质量、起草与复核药品标准等所制定的指导性规定。2、简述药品标准中药品名称的命名原则。答：药品中文名称须按照《中国药品通用名称》收载的名称及其命名原则命名。《中国药典》收载的药品中文名称均为法定名称；药品英文名称除另有规定外，均采用国际非专利药名。有机药物的化学名称须根据中国化学会编撰的《有机化学命名原则》命名，母体的选定须与国际纯粹与应用化学联合会的命名系统一致。3、简述药品标准的制定原则。答：药品标准的制定必须坚持“科学性、先进性、规范性和权威性”的原则。（1）科学性：国家药品标准适用于对合法生产的药品质量进行控制，保障药品安全有效质量可控。所以，药品标准制定首要的原则是确保药品标准的科学性。应充分考虑来源、生产、流通及使用等各个环节影响药品质量的因素，设置科学的检测项目、建立可靠的检测方法、规定合理的判断标准/限度。（2）先进性：质量标准应充分反映现阶段国内外药品质量控制的先进水平。在标准的制定上应在科学合理的基础上坚持就高不就低的标准先进性原则。坚持标准发展的国际化原则，注重新技术和新方法的应用，积极采用国际药品标准的先进方法，加快与国际接轨的步伐。（3）规范性：药品标准制定时，应按照国家药品监督管理部门颁布的法律、规范和指导原则的要求，做到药品标准的体例格式、文字术语、计量单位、数字符号以及通用检测方法等的统一规范。（4）权威性：国家药品标准具有法律效力。应充分体现科学监管的理念，支持国家药品监督管理的科学发展需要。4、简述中国药典凡例的性质、地位与内容。答：凡例是正确使用《中国药典》进行药品质量检定的基本原则，是对《中国药典》正文、附录及与质量检定有关的共性问题的统一规定。凡例和附录中采用“除另有规定外”这一用语，表示存在与凡例或附录有关规定不一致的情况时，则在正文品种中另作规定，并按该规定执行。凡例中有关药品质量检定的项目规定包括：名称及编排，项目与要求，检验方法和限度，标准品、对照品、对照药材、对照提取物或参考品，计量，精确度，试药、指示剂，动物试验，说明书、包装、标签等。5、简述药品检验工作的机构和基本程序。 答：药品检验工作的机构有国家食品药品监督管理局领导下的国家级药品检验机构即中国药品生物制品检定所（中国药品检验总所），以及省级（各省、自治区、直辖市）、市级药品检验所，分别承担各辖区内的药品检验工作。药品检验工作的基本程序一般为取样（检品收检）、检验、留样、报告。取样必须具有科学性、真实性和代表性，取样的基本原则应该是均匀、合理；常规检验以国家药品标准为检验依据；按照质量标准及其方法和有关SOP进行检验，并按要求记录；检验过程中，检验人员应按原始记录要求及时如实记录，并逐项填写检验项目；根据检验结果书写检验报告书，药品检验报告书是对药品质量作出的技术鉴定，是具有法律效力的技术文件。1、简述药物分析中常用的鉴别方法。答：药物分析中常用的鉴别试验方法有化学、光谱、色谱、显微、生物学、指纹图谱与特征图谱鉴别法。（1）化学鉴别法：包括测定生成物的熔点，在适当条件下产生颜色、荧光或使试剂褪色，发生沉淀反应或产生气体。（2）光谱鉴别法：包括紫外光谱鉴别法、红外光谱鉴别法、近红外光谱法、原子吸收法、核磁共振法、质谱法、X射线粉末衍射法。（3）色谱鉴别法：色谱鉴别法是利用不同物质在不同色谱条件下，产生各自的特征色谱行为（Rf值或tR值）进行的鉴别试验。采用与对照品（或经确证的已知药品）在相同的条件下进行色谱分离、高效液相色谱、气相色谱法。（4）显微鉴别法：主要用于中药及其制剂的鉴别，通常采用显微镜对药材的切片（饮片）、粉末、解离组织或表面制片及含饮片粉末的制剂中饮片的组织、细胞或内含物等特征进行鉴别的一种方法。（5）生物学法：利用药效学和分子生物学等有关技术来鉴定药物品质的一种方法，主要用于抗生素、生化药物以及中药的鉴别，通常分为生物效应鉴别法和基因鉴别法两大类。（6）指纹图谱与特征图谱鉴别法：中药指纹图谱建立的目的是通过对所得到的能够体现重要整体特性的图谱识别，提供一种能够比较全面的控制中药质量的方法，从化学物质基础的角度保证中药制剂质量的稳定和可靠。2、简述影响鉴别试验的条件。答：鉴别试验的目的是判断药物的真伪，它以所采用的化学反应或物理特性产生的明显的易于察觉的特征变化为依据，因此，鉴别试验必须在规定条件下完成，否则将会影响结果的判断。影响鉴别反应的因素主要有被测物浓度，试剂的用量，溶液的温度、pH、反应时间和干扰物质等。（1）溶液的浓度：在鉴别试验中加入的各种试剂一般是过量的，溶液的浓度主要是指被鉴别药物的浓度。鉴别试验多采用观察沉淀、颜色或测定各种光学参数（λmax、λmin、A）的变化来判定结果，药物的浓度直接影响上述参数的变化，必须严格规定。（2）溶液的温度：温度对化学反应的影响很大，一般温度每升高10℃，可使反应速度增加2~4倍。但温度的升高也可使某些生成物分解，导致颜色变浅，甚至观察不到阳性结果。（3）溶液的酸碱度：许多鉴别反应都需要在一定酸碱度的条件下才能进行。溶液酸碱度的作用，在于能使各反应物有足够的浓度处于反应活化状态，使反应生成物处于稳定和易于观测的状态。（4）试验时间：有机化合物的化学反应和无机化合物不同，一般反应速度较慢，达到预期试验结果需要较长的时间。这是因为有机化合物是以共价键相结合，化学反应能否进行，依赖于共价键的断裂和新价键形成的难易，这些价键的更替需要一定的反应时间和条件。同时在化学反应过程中，有时存在着许多中间阶段，甚至需加入催化剂才能启动反应。因此，使鉴别反应完成，需要一定时间。3、简述红外光谱鉴别法试样制备方法。 答：（1）压片法：取供试品约1mg，置于玛瑙研钵中，加入干燥的溴化钾或氯化钾细粉约200mg，充分研磨混匀，移置于直径为13mm的压模中，使铺布均匀，抽真空约2分钟后，加压至0.8~1GPa，保持2~5分钟，除去真空，取出制成的供试片，目视检查应均匀透明，无明显颗粒（也可采用其他直径的压模制片，样品与分散剂的用量可相应调整以制得浓度合适的片子）。讲供试片置于仪器的样品光路中，并扣除用同法制成的空白溴化钾或氯化钾片的背景，录制光谱图。要求空白片的光谱图的基线应大于75%透光率；除在3440cm-1及1630cm-1附近因残留或附着水而呈现一定的吸收峰外，其他区域不应出现大于基线3%透光率的吸收谱带。（2）糊法：取供试品约5mg，置于玛瑙研钵中，滴加少量液状石蜡或其他适宜的液体，制成均匀的糊状物，取适量夹于两个溴化钾片（每片重约150mg）之间，作为供试片；以溴化钾约300mg制成空白片作为背景补偿，录制光谱图。亦可用其他适宜的盐片夹持糊状物。（3）膜法：参照上述糊法所述的方法，将液体供试品铺展于溴化钾片或其他适宜的盐片中录制；或将供试品置于适宜的液体池内录制光谱图。若供试品为高分子聚合物，可先制成适宜厚度的薄膜，然后置样品光路中测定。（4）溶液法：将供试品溶于适宜的溶剂内，制成1%~10%浓度的溶液，置于0.1~0.5mm厚度的液体池中录制光谱图，并以相同厚度装有同一溶剂的液体池作为背景补偿。9、药用规格与化学试剂规格有何不同？答：化学试剂不考虑杂质的生理作用，其杂质限量只是从可能引起的化学变化对使用的影响来限定的，对试剂的使用范围和使用目的加以规定，它不考虑杂质对生物体的生理作用及毒副作用；而药物纯度主要从用药安全、有效和对药物稳定性等方面考虑。化学试剂是不能代替药品来使用的。10、杂质的来源途径有哪些？杂质包括哪些种类？答：（1）药物总的杂质主要有两个来源：一是由生产过程中引入，在合成或半合成的原料药及其制剂生产过程中，原料或辅料及试剂不纯或未反应完全、反应的中间体与反应副产物在精制时未能完全除去而引入杂质；二是在贮藏过程中受外界条件的影响，引起药物理化特性发生变化而产生，在温度、湿度、日光、空气等外界条件影响下，或因微生物的作用，引起药物发生水解、氧化、分解、异构化、晶型转变、聚合、潮解和发霉等变化，使药物中产生有关的杂质。（2）药品中的杂质按照其来源可以分为一般杂质和特殊杂质：一般杂质是指在自然界中分布较广泛，在多种药物的生产和贮藏过程中容易引入的杂质；特殊杂质是指在特定药物的生产和贮藏过程中引入的杂质，这类杂质随药物的不同而不同。按照其毒性分类，杂质又可分为毒性杂质和信号杂质，如重金属、砷盐为毒性杂质；信号杂质一般无毒，但其含量的多少可反映出药物的纯度和生产工艺情况，氯化物、硫酸盐属于信号杂质。按化学类别和特性分为：无机杂质、有机杂质及残留溶剂。无机杂质可能来源于生产过程，如反应试剂、配位体、催化剂、重金属、其他残留的金属、无机盐、助滤剂、活性炭等，它们一般是已知的和确定的；有机杂质主要包括合成中未反应完全的原料、中间体、副产物、降解产物等。有机杂质分为特定杂质和非特定杂质。特定杂质是指在质量标准中分别规定了明确的限度，并单独进行控制的杂质。特定杂质包括结构已知的杂质和结构未知的杂质；非特定杂质是指在质量标准中未单独列出，而仅采用一个通用的限度进行控制的一系列杂质，其在药品中出现的种类与几率并不固定。11、简述薄层色谱法用于杂质限量检查的几种方法。答：常用的方法有：（1）杂质对照品法，适用于已知杂质并能制备杂质对照品的情况。根据杂质限量，取供试品溶液和一定浓度的杂质对照品溶液，分别点样于同一薄层板上，展开、斑点定位，供试品溶液除主斑点外的其他斑点与相应的杂质对照品溶液或系列浓度杂质对照品溶液的主斑点进行比较，判断药物中杂质限量是否合格。（2）供试品溶液自身稀释对照法，适用于杂质的结构不能确定，或无杂质对照品的情况。该法仅限于杂质斑点的颜色与主成分斑点颜色相同或相近的情况下使用。先配制一定浓度的供试品溶液，然后将供试品溶液按限量要求稀释至一定浓度作为对照溶液，将供试品溶液和对照溶液分别点样于同一薄层板上，展开、斑点定位。结果判断：供试品溶液所显杂质斑点与自身稀释对照溶液或系列自身稀释对照溶液所显主斑点比较，不得更深。（3）杂质对照品法与供试品溶液自身稀释对照法并用，当药物中存在多个杂质时，其中已知杂质有对照品时，采用杂质对照品法检查；共存的未知杂质或没有对照品的杂质，可采用供试品溶液自身稀释对照法检查。（4）对照药物法，当无合适的杂质对照品，或者是供试品显示的杂质斑点颜色与主成分斑点颜色有差异，难以判断限量时，可用与供试品相同的药物作为对照品，此对照药物中所含待检杂质需符合限量要求，且稳定性好。12、简述高效液相色谱法用于杂质检测的几种方法及其适用条件。 答：高效液相色谱法用于杂质检测主要有以下几种方法：（1）外标法（杂质对照品法），适用于有杂质对照品，而且进样量能够精确控制（以定量环或自动进样器进样）的情况。（2）加校正因子的主成分自身对照测定法，该法仅适用于已知杂质的控制。以主成分为对照，用杂质对照品测定杂质的校正因子，杂质的校正因子和相对保留时间直接载入各品种质量标准中，在常规检验时用相对保留时间定位，以校正该杂质的实测峰面积。（3）不加校正因子的主成分自身对照测定法，适用于没有杂质对照品的情况。（4）面积归一化法，适用于粗略测量供试品中杂质的含量。9、检查重金属时其限度以何种金属的限度表示？原因是什么？ChP2010收载了几种检查方法？分别适用于哪些药物中的重金属检查？答：（1）重金属检查以铅的限量表示重金属的限量。（2）因为在药品生产中遇到铅的机会较多，且铅易蓄积中毒，故作为重金属的代表。（3）ChP2010中规定了三种重金属检查方法：①硫代乙酰胺法，适用于溶于水、稀酸和乙醇的药物，为最常用的方法；②炽灼后的硫代乙酰胺法，适用于含芳环、杂环以及难溶于水、稀酸、稀碱及乙醇的有机药物；③硫化钠法，适用于溶于碱性水溶液而难溶于稀酸或在稀酸中即生成沉淀的药物，如磺胺类、巴比妥类药物等。10、砷盐检查的方法有哪些？每种方法的原理是什么？答：（1）古蔡氏法：金属锌与酸作用产生新生态的氢，与药物中微量砷盐反应生成具有挥发性的砷化氢，遇溴化汞试纸产生黄色或棕色的砷斑，与相同条件下一定量标准砷溶液所生成的砷斑比较，判断砷盐的含量。（2）二乙基二硫代氨基甲酸银法：金属锌与酸作用产生新生态的氢，与药物中微量砷盐反应生成具有挥发性的砷化氢，生成的砷化氢将二乙基二硫代氨基甲酸银还原为红色的胶态银，与一定量标准砷溶液同法处理后得到的有色物质比较，判断砷盐的含量。（3）白田道夫法：氯化亚锡在盐酸中将砷盐还原成棕褐色的胶态砷，与一定量标准砷溶液用同法处理后的颜色比较，判断砷盐的含量。（4）次磷酸法：在盐酸酸性液中，次磷酸将砷盐还原为棕色的游离砷，与一定量的标准砷溶液用同法处理后所显颜色比较，判断砷盐的含量。11、简述药物中有机杂质鉴定的方法。答：在进行药物中有机杂质的鉴定中，常常需要对杂质进行分离纯化制备或合成制备，以供安全性和质量研究。主要有以下两种杂质的鉴定方法。对杂质结构的研究，可以从分析药物合成工艺或药物的性质，推测其可能引入的环节及相应化合物的结构开始，然后再按以下两种方法鉴定。（1）有杂质对照品鉴定法：当样品中的杂质量较小，且杂质的分离纯化较为困难时，可以合成杂质对照品，通过比较杂质与对照品的色谱性质、UV曲线特征和MS信息，判断杂质与对照品是否是同一种化合物，从而确定杂质的结构。（2）无杂质对照品鉴定法：当药物中被鉴定的杂质量较大时，先分离得到特定杂质，然后再通过元素分析、UV、IR、NMR和MS来确定有关物质的结构。16、简述紫外分光光度法对溶剂的要求。答：含有杂原子的有机溶剂，通常均具有很强的末端吸收。因此，当作溶剂使用时，它们的使用范围均不能小于截止使用波长。例如甲醇、乙醇的截止使用波长为205nm。另外，当溶剂不纯时，也可能增加干扰吸收。因此，在测定供试品之前，应先检查所用的溶剂在供试品所用的波长附近是否符合要求，即将溶剂置于1cm石英吸收池中，以空气为空白（即空白光路中不置任何物质）测定其吸光度。溶剂和吸收池的吸光度在220~240nm范围内不得超过0.40；在241~250nm范围内不得超过0.20；在251~300nm范围内不得超过0.10、在300nm以上时不得超过0.05。17、简述气相色谱法的进样方式。答：气相色谱法的进样方式一般可采用溶液直接进样或顶空进样。（1）溶液直接进样：采用微量注射器、微量进样阀或有分流装置的气化室进样；采用手动进样或自动进样时，进样口稳定应高于柱温30~50℃；进样量一般不超过数微升；柱径越细，进样量应越少，采用毛细管柱时，一般应分流以免过载。（2） 顶空进样：适用于固体和液体供试品中挥发性组分的分离和测定。将固态或液态的供试品制成供试液后，置于密闭小瓶中，在恒温控制的加热室中加热至供试品中挥发性组分在液态和气态达到平衡后，由进样器自动吸取一定体积的顶空气注入色谱柱中。16、简述凯氏定氮法的原理与应用。答：凯氏定氮法系将含氮药物与硫酸在凯氏烧瓶中共热，药物分子中有机结构被氧化分解（亦称“消解”或“消化”）成二氧化碳和水，有机结合的氮则转变为无机氨，并与过量的硫酸结合为硫酸氢铵，经氢氧化钠碱化后释放出氨气，并随水蒸气馏出，用硼酸溶液或定量的酸滴定液吸收后，再用酸滴定液滴定。为使有机药物中的氮定量转化，必须使有机结构破坏完全，但消解液长时间受热可导致铵盐分解。因此，常在硫酸中加入硫酸钾（或无水硫酸钠）提高硫酸沸点，以提高消解温度；同时加入催化剂加快消解速度，以缩短消解时间。常用的催化剂是价廉、低毒、无挥发性的硫酸铜。本法主要应用于含有氨基或酰氨（胺）结构药物的含量测定。对于以偶氮或肼等结构存在的含氮药物，因在消解过程中易于生成氮气而损失，需在消解前加锌粉还原后再依法处理；而杂环中的氮，因不易断键而难以消解，可用氢碘酸或红磷还原为氢化杂环后再进行消解。17、简述氧瓶燃烧法用于含碘药物测定时的燃烧产物以及吸收液的选择。答：测定含碘药物时，分解产生的碘化氢可被氧气进一步氧化，其燃烧产物主要为单质碘，并含有少量的五价碘（HIO3）与二价碘（HIO）和微量的碘化氢（HI），当使用硝酸银滴定法测定含量时，可用水-氢氧化钠溶液-二氧化硫饱和溶液作为吸收液；若使用间接碘量法测定时，则可以水-氢氧化钠溶液为吸收液，此时吸收液中的待测物为碘酸钠与碘化钠，可用溴-醋酸溶液氧化全部转化为碘酸后，加碘化钾定量生成单质碘，再用硫代硫酸钠滴定液滴定生成的碘。18、简述体内药物分析中常用的去蛋白质法及其特点。答：在体内药物分析中，常用的去除蛋白质有以下几种方法：（1）溶剂沉淀法：加入与水相混溶的有机溶剂（亲水性有机溶剂），溶液的介电常数下降，蛋白质分子间的静电引力增加而聚集；同时亲水性有机溶剂的水合作用使蛋白质水化膜脱水而析出沉降，并使与蛋白质以氢键及其他分子间力结合的药物释放出来。常用的水溶性有机溶剂有：乙腈、甲醇、丙酮、四氢呋喃等。含药物的血浆或血清与水溶性有机溶剂的体积比为1：（2~3）时，可以将90%以上的蛋白质除去。上清液偏碱性，pH为8.5~9.5。（2）中性盐析法：加入中性盐，溶液的离子强度发生变化，蛋白质因分子间电排斥作用减弱而凝聚；同时中性盐的亲水性使蛋白质水化膜脱水而析出沉降。常用的中性盐有：饱和硫酸铵、硫酸钠、硫酸镁、氯化钠、磷酸钠等。按血清与饱和硫酸铵溶液的比例为1：2混合，可除去90%以上的蛋白质。所得上清液近中性，pH为7.0~7.7。（3）强酸沉淀法：当溶液pH低于蛋白质的等电点时，蛋白质以阳离子形式存在，可与酸根阴离子形成不溶性盐而沉淀。常用的强酸有：10%三氯醋酸或6%高氯酸溶液。含药物血清与强酸的比例为1：0.6混合，可以除去90%以上的蛋白质。所得上清液呈强酸性（pH0~4），在酸性下分解的药物不宜用本法除去蛋白。（4）热凝固法：当待测物热稳定性好时，可采用加热的方法将一些热变性蛋白质沉淀。通常可加热至90℃，本法简单，但只能除去热变性蛋白。19、与常规药物分析相比，生物样品有哪些特点？体内药物分析的特点是什么？答：（1）生物样品特点如下：①采样量少，体内样本采样量一般为数毫升至数十微升，且多数在特定条件下采集，不易重新获得；②待测物浓度低，体内样本中待测药物及其代谢物或内源性生物活性物质浓度通常在10-9~10-6g/ml级，甚至低至10-12g/ml；③干扰物质多，生物样本，尤其是血样中含有蛋白质、脂肪、尿素等有机物和Na+、K+等大量内源性物质通常对测定构成干扰；且体内的内源性物质可与药物结合，也能干扰测定；即使是药物的代谢产物也往往干扰原形药物的分析。（2）体内药物分析的特点如下：①体内样品需经分离与浓集，或经化学衍生化处理后才能进行分析；②对分析方法的灵敏度及专属性要求较高；③分析工作量大，测定数据的处理和结果的阐明较为繁杂。基于上述特点，体内药物分析中常用的分析方法主要有：气相色谱法、高效液相色谱法、放射免疫测定法、酶免疫测定法，以及气相色谱-质谱联用、液相色谱-质谱联用等各种联用技术。20、简述体内药物分析方法验证与体外药物分析方法验证的区别。答：（1）体内药物分析与体外药物分析方法验证的项目有区别。 1）体内药物分析方法验证的项目有：特异性（特异性要做空白生物基质、模拟生物样品和实际生物样品）、标准曲线与线性范围（标准曲线与线性范围用加权最小二乘法进行线性回归）、定量下限（是线性范围最低浓度点，要符合精密度和准确度的要求，要达到测试生物样品Cmax的1/10~1/20）、精密度和准确度[日间精密度、日内精密度，一般选择高、中、低3个浓度的QC样品同时进行方法的考察，每一浓度至少制备并测定5个样品。为获得日间RSD，应在不同天（每天1个分析批）连续制备并测定，至少有连续3个分析批，不少于45个样品的分析结果]、提取回收率和稳定性（含药体内样品在室温等待处理、体内样品的处理过程中，以及制备样品在室温或特定温度下等待进样测试期间，样品中待测物的稳定性；含药体内样品在冰冻和冻融条件下、标准储备液在特定温度下以及不同存放时间的稳定性）。2）体外药物分析方法验证的项目有：特异性、标准曲线与线性范围、定量限、检测限、精密度、准确度、耐受性。其中，检测限在体内药物分析中通常不进行验证；耐用性则相当于体内药物分析方法验证项目的提取回收率和稳定性。（2）体内药物分析与体外药物分析方法验证的限度要求有区别：考虑到体内药物分析的特点，体内药物分析比体外药物分析方法验证的限度要求较宽松。标准曲线要求回归方程的相关系数r≥0.99；精密度一般要求RSD不超过15%，在LLOQ附近RSD应不超过20%；准确度RR应在85%~115%范围内（RE不超过±15%），在LLOQ附近应在80%~120%范围内（RE不超过±20%）；提取回收率要求高、中、低3个浓度的提取回收率应一致、精密和可重现。中、高浓度的RSD应不大于15%，低浓度的RSD应不大于20%。23、简述阿司匹林片两步滴定法的原理与操作要点。答：因阿司匹林片剂中除存在其水解产物水杨酸及醋酸外，在制剂工艺中添加了抑制阿司匹林水解的稳定剂酒石酸或枸橼酸。为消除片剂中酸性降解产物及稳定剂对阿司匹林测定的干扰，可采用两步滴定法测定阿司匹林片的含量。两步滴定法系指测定过程分为两步进行：第一步中和制剂中的酸性水解产物和酸性稳定剂（同时中和阿司匹林的游离羧基）；第二部水解与滴定，即水解后剩余量滴定法。中和：加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）振摇，使阿司匹林溶解，加酚酞指示液，用氢氧化钠滴定液滴定至溶液显粉红色。水解与滴定：在中和后的供试品溶液中，精密加入定量过量的氢氧化钠滴定液，加热水解后，用硫酸滴定液回滴定。24、简述柱分配色谱-紫外分光光度法测定阿司匹林胶囊含量的原理。答：阿司匹林胶囊中含有干扰辅料及降解产物，采用直接紫外分光光度法测定时，会干扰测定。采用柱分配色谱-紫外分光光度法测定时，在硅藻土-碳酸氢钠色谱柱中，阿司匹林及水杨酸成钠盐保留于色谱柱上，先用三氯甲烷洗涤除去、中性或碱性杂质，再用少量冰醋酸三氯甲烷溶液洗涤除去弱酸性杂质，同时使阿司匹林酸化游离，进而用大量的冰醋酸三氯甲烷溶液洗脱阿司匹林。因为水杨酸的酸性较强，醋酸不能使其游离而被保留于色谱柱上，进而获得分离。25、简述二氟尼柳中有关物质检查的原理。答：二氟尼柳在合成过程中可能产生多种苯或联苯类中间体及副产物，而且其制备工艺存在多条合成路线，产品中可能存在的有关物质的结构与性质相差较大，使用单一模式的色谱分离技术难以完全检出有关物质。故《中国药典》分别采用TLC（正相）和反相HPLC法，以自身对照法检查有关物质A和B。采用两种相反的色谱体系，可对极性和非极性杂质进行有效的控制。26、简述溴量法测定苯乙胺类药物的基本原理。答：盐酸去氧肾上腺素和重酒石酸间羟胺原料药采用溴量法测定含量。其测定原理系药物分子中的苯酚结构，在酸性溶液中酚羟基的邻、对位活泼氢能与过量的溴定量地发生溴代反应，再以碘量法测定剩余的溴，根据消耗的硫代硫酸钠滴定液的量，即可计算供试品的含量。27、苯乙胺类药物的鉴别试验主要有哪些？答：（1）三氯化铁显色反应：本类药物的分子结构中若具有酚羟基，可与Fe3+配位显色，加入碱性溶液，随即被高铁离子氧化而显紫色或紫红色等。（2）甲醛-硫酸反应：可与甲醛在硫酸中反应，形成具有醌式结构的有色化合物。如肾上腺素显红色，盐酸异丙肾上腺素显棕色至暗紫色。（3） 氧化反应：本类药物分子结构中多数具有酚羟基，具有还原性，易被碘、过氧化氢、铁氰化钾等氧化剂氧化而呈现不同的颜色。如肾上腺素在酸性条件下，被过氧化氢氧化后，生成肾上腺素红而显血红色，放置可变为棕色多聚体；盐酸异丙肾上腺素在偏酸性条件下被碘迅速氧化，生成异丙肾上腺素红，加硫代硫酸钠使碘的棕色消退，溶液显淡红色。（2）双缩脲反应：盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱和盐酸去氧肾上腺素等药物分子结构中，芳环侧链具有氨基醇结构，可显双缩脲特征反应。23、苯乙胺类药物具有哪些结构特点和理化性质？答：具有苯乙胺基本结构，其中肾上腺素、盐酸异丙肾上腺素、重酒石酸去甲肾上腺素、盐酸多巴胺和硫酸特布他林分子结构中苯环的3，4位上都有2个邻位酚羟基。理化性质主要有：1.酚羟基特性；2.弱碱性；3.旋光性；4.紫外吸收特性。24、肾上腺素需要检查什么杂质？如何检查？答：肾上腺素的生产过程存在通体氢化还原制备工艺，若氢化过程不完全，易引入酮体杂质，影响药品质量。为此，ChP2010规定应检查肾上腺素的合成工艺杂质酮体。采用紫外分光光度法检查其中含有的酮体杂质，在310nm波长处，浓度2mg/ml的样品溶液吸光度应不超过0.05。25、ChP2010如何区别重酒石酸去甲肾上腺素与盐酸异丙肾上腺素？答：重酒石酸去甲肾上腺素在酸性条件下比较稳定，几乎不被碘氧化。ChP2010规定本品加酒石酸氢钾饱和溶液10ml溶解，加碘试液1ml，放置5分钟后，加硫代硫酸钠试液2ml，溶液为无色或仅显微红色或淡紫色，盐酸异丙肾上腺素在此条件下，可被氧化产生明显的红棕色或紫色。可采用这个试验加以区别。26、亚硝酸钠滴定法测定芳胺类药物的原理是什么？在测定中应注意哪些反应条件？答：测定的基本原理是方伯胺基或水解后生成方伯胺基的药物在酸性溶液中与亚硝酸钠定量发生重氮化反应，生成重氮盐，可用永停滴定法指示终点。重氮化反应的速度受多种因素的影响，亚硝酸钠滴定液及反应生成的重氮盐也不够稳定，因此在测定中应注意一下主要条件：（1）加入适量溴化钾加快反应速度。（2）加过量盐酸加速反应。（3）反应温度：滴定一般在低温下进行。（4）滴定速度：重氮化反应速度相对较慢，故滴定速度不宜太快。27、如何区别盐酸利多卡因和盐酸普鲁卡因？答：盐酸利多卡因在碳酸钠试液中与硫酸铜反应生成蓝紫色配位化合物，此有色化合物转溶入三氯甲烷中显黄色，而盐酸普鲁卡因在同样条件下不发生此反应。28、亚硝酸钠滴定法常采用的指示重点的方法有哪些？《中国药典》收载的是哪种？答：常用的方法为：电位法、永停滴定法、外指示剂和内指示剂法；《中国药典》采用的是永停滴定法。29、盐酸普鲁卡因的特殊杂质是什么？中国药典采用什么方法对其进行限量检查？答：盐酸普鲁卡因分子结构中有酯键，可发生水解反应，产生特殊杂质对氨基苯甲酸。ChP2010中采用高效液相色谱法检查对氨基苯甲酸。30、盐酸普鲁卡因注射液为什么会变黄？答：盐酸普鲁卡因分子结构中有酯键，可发生水解反应。特别是在注射液制备过程中受灭菌温度、时间、溶液pH、贮藏时间以及光线和金属离子的影响，易发生水解反应生成对氨基苯甲酸和二乙氨基乙醇。其中对氨基苯甲酸随贮藏时间的延长或高温加热，可进一步脱羧转化为苯胺，而苯胺又可被氧化为有色物，使注射液变黄，疗效下降，毒性增加。31、硝苯地平中为何要进行有关物质的检查？一般采用什么方法及方法的注意事项？答：二氢吡啶类药物遇光不稳定，易发生光化学歧化作用，引入杂质。硝苯地平在光照和氧化剂存在条件下分别生成两种降解氧化产物，对人体有害，因此应进行有关物质检查。检查方法多采用HPLC法，且在操作中注意应在避光条件下操作。32、简述铈量法测定硝苯地平的原理及操作要点。答：硝苯地平的二氢吡啶环具有还原性，可用铈量法测定含量。铈量法以硫酸铈为滴定液，反应摩尔比为1：2，酸度较低时Ce4+易水解，故本滴定在强酸性条件下进行；以邻二氮菲为终点指示液，终点时微过量的Ce4+将指示液中的Fe2+氧化成Fe3+，橙红色消失以指示终点，邻二氮菲指示液应临用前新配制。33、简述测定生物样品中二氢吡啶类药物浓度的主要注意事项？ 答：二氢吡啶类药物的口服剂量小，血药浓度低，生物样品的分析应选择灵敏度高，专属性强的方法。二氢吡啶类药物对光敏感，分析时应注意避光操作。23、简述巴比妥类药物的结构与理化性质的关系。答：母核环状酰脲结构具有1，3-二酰亚胺基团，能使其分子互变异构形成烯醇式结构，在水溶液中可以发生二级电离。因此，本类药物的水溶液显弱酸性，可与强碱形成水溶性的盐类；巴比妥类药物基本结构中具有酰亚胺结构，与碱溶液共沸即水解产生氨气，可使湿润的红色石蕊试纸变蓝；丙二酰脲集团在适宜的pH溶液中，可与某些重金属离子进行反应，生成可溶或不溶的有色物质；因巴比妥类药物分子结构中具有活泼氢，可与香草醛在浓硫酸存在下发生缩合反应，产生棕红色产物。24、简述巴比妥类药物含量测定方法及常用方法的测定原理。答：巴比妥类药物的含量测定方法有银量法、溴量法、紫外分光光度法、酸碱滴定法、提取重量法、HPLC法、GC法及电泳法等。其中常用的是，银量法、溴量法、酸碱滴定法和紫外分光光度法。银量法：根据巴比妥类药物在适当的碱性溶液中，易与重金属离子反应，并可定量地形成盐的化学性质。在滴定过程中，巴比妥类药物首先形成可溶性的一银盐，当被测供试品完全形成一银盐后，继续用硝酸银滴定液滴定，稍过量的银离子就与巴比妥类药物形成难溶性的二银盐沉淀，使溶液变浑浊，以此指示滴定终点。溴量法：凡在5位取代基中含有不饱和双键的巴比妥类药物，其不饱和键可与溴定量地发生加成反应，故可采用溴量法进行含量测定。酸碱滴定法：巴比妥类药物呈弱酸性，可作为一元酸以标准碱液直接滴定。根据所用溶剂的不同，可分为以下三种滴定方法：在水-乙醇混合溶剂中的滴定；在胶束水溶液中进行的滴定；非水溶液滴定法。紫外分光光度法：巴比妥类药物在酸性介质中几乎不电离，无明显的紫外吸收，但在碱性介质中电离为具有紫外吸收特征的结构，因此可采用紫外分光光度法测定其含量。25、简述巴比妥类药物与银盐、铜盐、钴盐及汞盐反应的原理和现象。答：巴比妥类药物分子结构中含有丙二酰脲或酰亚胺基团，在合适pH的溶液中，可与某些金属离子，如Ag+、Cu2+、Co2+、Hg2+等反应呈色或产生有色沉淀。与银盐反应：巴比妥类药物分子结构中含有酰亚胺基团，在碳酸钠溶液中，生成钠盐而溶解，再与硝酸银溶液反应，首先生成可溶性的一银盐，加入过量的硝酸银溶液，则生成难溶性的二银盐白色沉淀。与铜盐反应：巴比妥类药物在吡啶溶液中生成的烯醇式异构体与铜吡啶试液反应，形成稳定的配位化合物，产生类似双缩脲的呈色反应。巴比妥类药物呈紫堇色或生成紫色沉淀，含硫巴比妥类药物则呈现绿色。与钴盐反应：巴比妥类药物在碱性溶液中可与钴盐反应，生成紫堇色配位化合物。与汞盐反应：巴比妥类药物与硝酸汞或氯化汞溶液反应，可生成白色汞盐沉淀，此沉淀能在氨试液中溶解。26、简述苯二氮杂卓类药物的主要理化性质。答：本类药物结构中二氮杂卓环为七元环，环上的氮原子具有强的碱性，苯基的取代使碱性降低。在强酸性溶液中，本类药物可水解，形成相应的二苯甲酮衍生物，这也是本类药物的主要有关物质。其水解产物所呈现的某些特性，也可用于本类药物的鉴别和含量测定。本类药物均含有较大共轭体系，有一定的紫外吸收。27、采用HPLC法检查奋乃静中的有关物质的系统适应性试验：取奋乃静对照品25mg，置25ml量瓶中，加甲醇15ml溶解后，加入30%过氧化氢溶液2ml，摇匀，用甲醇稀释至刻度，摇匀，放置1.5小时，作为系统适用性试验溶液，取系统适用性试验溶液20μl注入液相色谱仪，使奋乃静峰保留时间约为27分钟，与相对保留时间约为0.73的降解杂质峰的分离度应大于7.0。请回答下列问题：（1）加入过氧化氢的作用是什么？（2）为什么溶液需放置1.5小时？答：（1）制备系统适用性试验溶液时，将少量30%过氧化氢溶液加入奋乃静的甲醇溶液中，使部分奋乃静氧化，故溶液中含有奋乃静及其氧化降解产物，可用于系统分离能力的测试。（2）由于氧化还原反应速度较慢，溶液需放置1.5小时。 44、采用乙醇-水溶液中的氢氧化钠滴定法测定吩噻嗪类药物盐酸盐的含量的原理是什么？答：吩噻嗪类药物盐酸盐的水溶液显酸性，在乙醇-水溶液中，可采用氢氧化钠滴定液测定其含量。在水中，吩噻嗪类药物的盐酸盐与氢氧化钠发生中和反应，生成的氯丙嗪溶于乙醇，反应可定量进行。在反应体系中加入适量的盐酸，采用电位法指示滴定终点，即可准确读取滴定曲线上两个化学计量点间相应的氢氧化钠滴定液的体积，据此可计算吩噻嗪类药物的盐酸盐的含量。第一个化学计量点：H++Cl-+NaOH→H2O+NaCl第二个化学计量点：BH++Cl-+NaOH→B+H2O+NaCl45、盐酸氯丙嗪注射液的含量测定：精密量取本品适量，约相当于盐酸氯丙嗪100mg，置500ml量瓶中，用0.1mol/L盐酸溶液稀释至刻度，摇匀；精密量取10ml，置150ml分液漏斗中，加水约20ml，加入氨水，乙醚25ml提取4次，合并乙醚提取液，用0.1mol/L盐酸溶液25ml提取4次，合并盐酸提取液并置150ml量瓶中，挥去残留乙醚，用0.1mol/L盐酸溶液稀释至刻度，摇匀。另取盐酸氯丙嗪对照品适量，精密称定，用0.1mol/L盐酸溶液溶解并稀释制成每1ml中约含8μg的溶液，作为对照品溶液。取上述两种溶液，分别置于1cm石英比色皿中，照紫外-可见分光光度法测定含量。请回答下列问题：（1）加入氨水和盐酸溶液的作用是什么？（2）结合本例简述双波长分光光度法的原理。答：（1）注射液所含盐酸氯丙嗪在氨水碱性条件下转化为游离碱氯丙嗪，以使用乙醚提取；经乙醚提取分离后，用盐酸溶液提取，氯丙嗪转化为盐酸氯丙嗪进入水层。（2）在0.1mol/L盐酸溶液中，氯丙嗪的氧化物在氯丙嗪的最大吸收波长254nm处有吸收，且该吸收在277nm波长处有等吸收。采用双波长分光光度法，测定样品溶液在254nm和277nm两个波长处的吸光度差，据此计算注射液中盐酸氯丙嗪的含量，消除了氧化物对测定的干扰，提高了测定的准确度。46、简述钯离子比色法的原理及其优点。答：（1）吩噻嗪类药物在pH2±0.1的缓冲溶液中，与钯离子形成红色配合物，在500nm波长附近具有最大吸收，可采用比色法测定其含量。（2）由于钯离子仅与未被氧化的硫元素配合显色，消除了药物中氧化物对测定的干扰。47、采用钯离子比色法测定盐酸异丙嗪片的含量，供试品溶液：取本品不少于20片，精密称定，研细，精密称取适量，置125ml棕色分液漏斗中，加饱和氯化钾溶液20ml、1mol/L氢氧化钠溶液10ml与甲醇溶液10ml，用正庚烷20ml提取3次，合并正庚烷提取液，无水硫酸钠脱水，滤过；滤液置125ml棕色分液漏斗中，用0.1mol/L盐酸溶液15ml提取3次，合并酸提取液，置50ml棕色容量瓶中，用0.1mol/L盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，请解释以下所用试剂的作用：（1）氢氧化钠溶液；（2）氯化钾；（3）0.1mol/L盐酸溶液。答：（1）片剂所含盐酸异丙嗪经氢氧化钠碱化转化为游离碱异丙嗪。（2）在饱和氯化钾溶液的盐析作用下，异丙嗪定量进入正庚烷中，排除不溶性辅料等干扰。（3）分散有机相，用盐酸溶液提取异丙嗪，得到盐酸异丙嗪水溶液，进行测定。48、USP32-NF27盐酸异丙嗪注射液的含量测定：流动相：取戊烷磺酸钠1g，加水500ml溶解，加乙腈500ml与冰醋酸5ml。色谱系统：紫外检测器（254nm波长）；苯基柱（30cm×4.6nm）；流速1.5ml/min。请问：该方法为RP-HPLC方法中的哪一种？其原理是什么？为什么可以用于吩噻嗪类药物的分析？答：（1）该法为离子对反相高效液相色谱法。（2）离子对液相色谱法在具有合适pH的流动相中加入与呈解离状态的待测组分离子电荷相反的离子对试剂，使之与待测组分离子形成离子对，增加待测组分在非极性固定相中的分配（离子对实际的非极性部分越大，形成的离子对分配系数越大，在反向色谱中的保留越强），从而改善其色谱保留与分离行为。（3）在RP-HPLC法中，极性较强的吩噻嗪类药物在固定相中的保留较弱，虽然可以调整流动相的pH抑制吩噻嗪类药物的解离从而改善其色谱行为，但并非均能获得满意的结果。在分析具有碱性的吩噻嗪类药物时，在酸性流动相中，碱性的吩噻嗪类药物呈解离状态，可以与离子对试剂戊烷磺酸钠形成离子对，增加其在固定相中的保留，从而改善其色谱行为。 49、简述为何磷酸咯萘啶要检查甲醛和四氢吡咯。答：在合成磷酸咯萘啶的反应中使用了甲醛进行缩合，甲醛具有毒性，应对产品中可能剩余的甲醛进行检查。在合成磷酸咯萘啶的反应中使用了四氢吡咯进行缩合，四氢吡咯具有毒性，应对产品中可能剩余的四氢吡咯进行检查。甲醛的检查法：取本品50.0mg，加水2ml使溶解，加5%碳酸钠溶液4ml，搅匀，滤过，滤液加硫酸溶液（1→2）3ml，冷却后加品红硫酸试液5ml，在20~30℃保温30分钟，如显色，与新制的甲醛溶液（每1ml含甲醛0.10mg的水溶液）1.0ml用同一方法制成的对照液比较，不得更深（0.2%）。四氢吡咯检查法：取本品10mg，加水2ml溶解后，加5%碳酸钠溶液2ml，搅拌，滤过，滤液加新制的亚硝基铁氰化钠乙醛试液1ml，摇匀，5分钟内不得显蓝紫色。50、简述硫酸奎宁原料药和硫酸奎宁片含量测定消耗高氯酸滴定液的摩尔比为何不同。答：硫酸奎宁具有生物碱的性质，很难在水溶液中用酸直接滴定。而在非水酸性介质中，碱性显著增强，即可以在冰醋酸或醋酐等酸性溶液中，用高氯酸滴定液直接滴定，以指示剂或电位法确定终点。由于硫酸为二元酸，在水溶液中能进行二级解离，但在冰醋酸介质中，只能解离为HSO4-，所以生物碱的硫酸盐在冰醋酸或醋酐等酸性溶液中只能滴定至硫酸氢盐。硫酸奎宁片剂含量测定中要加氢氧化钠溶液碱化后用三氯甲烷萃取，1mol硫酸奎宁可转化为2mol奎宁，每1mol奎宁消耗2mol高氯酸，故1mol硫酸奎宁消耗4mol高氯酸。51、简述青蒿素类原料药目前ChP2010为何均采用HPLC法测定含量。答：青蒿素又名黄蒿素，是从菊科植物黄花蒿中提取分离得到的一个含过氧基团的新型倍半萜内酯。双氢青蒿素、青蒿琥酯、蒿甲醚等均是青蒿素的衍生物。青蒿素结构中C-10位羰基还原成羟基得到二氢青蒿素；在此基础上将二氢青蒿素结构中C-10位羟基进行醚化得到蒿甲醚；在此基础上将二氢青蒿素结构中C-10位羟基进行酯化得到青蒿琥酯。青蒿素类原料药结构相近又来源于同一植物，因此青蒿素类原料药目前ChP2010均采用HPLC法测定含量。52、简述酸性染料比色法的原理和影响因素答：（1）原理：在适当pH的水溶液中，碱性药物（B）可与氢离子结合呈阳离子（BH+），而一些酸性染料可解离成阴离子（In-）。上述的阳离子与阴离子定量结合成有色络合物（BH+In-）离子对，可以定量地被有机溶剂提取，在一定波长处测定该溶液有色离子对的吸收度，即可以计算出碱性药物的含量。也可将呈色的有机相经碱化（如加入醇制氢氧化钠），使与有机碱结合的酸性染料释放出来，测定其吸收度，再计算出碱性药物的含量。（2）影响因素：水相最佳pH的选择，酸性染料及其浓度的选择，有机溶剂的选择和水分的影响。53、简述莨菪烷类药物的结构与性质答：莨菪烷类抗胆碱药物是由莨菪烷衍生的氨基醇与不同有机酸缩合成酯类生物碱。①分子结构中，具有酯的结构，因此易水解具有水解性；②五元脂环上有叔胺氮原子，因此具有较强的碱性，易与酸成盐；③分子结构中含有不对称碳原子，大多具有旋光性，阿托品中虽然也含有不对称碳原子，但是为外消旋体，无旋光性。54、今有三瓶药物分别为硫酸阿托品（A）、氢溴酸东莨菪碱（B）和氢溴酸后马托品（C），但瓶上标签脱落，请采用适当的化学方法将三者区分开。答：取上述三种药物适量，加水适量溶解，滴加氯化钡试液生成白色沉淀的是硫酸阿托品（A）；另取剩余两种药物加水溶解后，置分液漏斗中，加氨试液使成碱性后，加三氯甲烷5ml，摇匀，分取三氯甲烷液，置水浴上蒸干，残渣中加氯化汞的乙醇溶液1.5ml，生成白色沉淀的是氢溴酸东莨菪碱（B）。55、三点校正紫外分光光度法测定维生素A含量的依据（原理）是什么？答：（1）物质对光的吸收具有加和性。（2）杂质的无关吸收在310~340nm范围内几乎呈一条直线，且随波长的增大吸收度下降。56、用三点校正紫外分光光度法测定维生素A含量时，三点波长选择的原则是什么？答：三点波长的选择原则为一点选择在维生素A的最大吸收波长处（即λ1）；其他两点选择在λ1的两侧个选一点（λ2和λ3）。（1）第一法（等波长差法）：使λ3-λ1=λ1-λ2。ChP2010规定，测定维生素A醋酸酯时，λ 1=328nm，λ2=316nm，λ3=340nm，Δλ=12nm。（1）第二法（等吸收比法）：使Aλ2=Aλ3=6/7Aλ1。ChP2010规定，测定维生素A醇时，λ1=325nm，λ2=310nm，λ3=334nm。49、维生素A可能含有的杂质有哪些？答：（1）维生素A2（即3-去氢维生素A）和维生素A3（即去水维生素A）。（2）维生素A的氧化产物：环氧化物、维生素A醛和维生素A酸。（3）维生素A在光照条件下产生的无活性的聚合物：鲸醇。（4）维生素A的异构体等：异构体包括新维生素Aa（2-顺式）、新维生素Ab（4-顺式）、新维生素Ac（2，4-二顺式）、异维生素Aa（6-顺式）、异维生素Ab（2，6-二顺式）；以及合成过程中产生的中间体等。50、三点校正紫外分光光度法测定维生素A时，第一法（直接测定法）和第二法（皂化法）适用的情况、测定形式和所用溶剂有何不同？分别写出测定波长和校正公式。答：直接滴定法适用于纯度高的维生素A醋酸酯的测定，测定形式是维生素A醋酸酯，所用的溶剂是环己烷，分别在300nm、316nm、328nm、340nm和360nm五个波长处测定吸光度，校正公式为A328（校正）=3.52（2A328-A316-A340）；皂化法适用于维生素A醋酸酯中杂质含量较多，不能直接测定，需要进行皂化水解成维生素A醇，所用的溶剂为异丙醇，分别在300nm、310nm、325nm、334nm波长处测定吸光度，校正公式为A325（校正）=6.815A325-2.555A310-4.260A334。51、用合适的化学方法区分下列药物：氢化可的松（A）、甲睾酮（B）、黄体酮（C）和雌二醇（D）。答：①在碳酸钠和醋酸铵条件下，加亚硝基铁氰化钠生成蓝紫色的是黄体酮（C）。②在碱性条件下，加氯化三苯四氮唑（或蓝四氮唑）生成红色（或蓝色）的是氢化可的松（A）；或与氨制硝酸银反应生成黑色的银沉淀或与碱性酒石酸铜反应生成红色氧化亚铜的是氢化可的松（A）。③在酸性条件下，加异烟肼（或2，4-二硝基苯肼、硫酸苯肼）生成黄色的是甲睾酮（B）。④剩下的是雌二醇（D），或与重氮苯磺酸反应生成红色为雌二醇（D）。52、异烟肼比色法的反应原理、条件、应用范围以及测定中应注意的问题。答：原理：甾体激素C3-酮基及其他位置上的酮基能在酸性条件下与羰基试剂异烟肼缩合，形成黄色的异烟腙，在420nm波长附近具有最大吸收。条件、应用范围以及测定中应注意的问题：（1）溶剂的选择：用无水乙醇和无水甲醇作为溶剂均能得到满意的结果。（2）酸的种类和浓度：显色反应须在酸性条件进行，当酸与异烟肼的摩尔比为2：1时可获得最大的吸光度。盐酸最常用。（3）水分、温度、光线和氧的影响：当溶液中含水量增高时，吸光度随之降低。因为甾体激素与异烟肼的缩合反应为可逆反应，水分可促使产物水解，而使反应逆转。温度升高，反应速度加快。在具塞玻璃容器（如量瓶）中进行反应时，光与氧对反应的影响不大。（4）反应的专属性：具有Δ4-3-酮基的甾体激素在室温下不到1小时即可定量地完成与异烟腙的反应，本法对Δ4-3-酮甾体具有一定的专属性。53、甾体红外光谱为何成为甾体鉴别的重要手段？答：甾体激素类药物的结构复杂，有的药物之间结构上仅有很小的差异，仅靠化学鉴别法难以区别。红外光谱特征性强，为本类药物鉴别的可靠手段。各国药典中，几乎所有的甾体激素原料药都采用了红外分光光度法进行鉴别。54、试比较抗生素类药物含量测定的微生物检定法与理化测定法的优缺点。答：抗生素微生物检定法系在适宜条件下，根据量反应平行线原理设计，通过检测抗生素对微生物的抑制作用，计算抗生素活性（效价）的方法。测定方法可分为管碟法和浊度法。 微生物检定法的优点是灵敏度高、需用量小，测定结果较直观；测定原理与临床应用的要求一致，更能确定抗生素的医疗价值；而且适用范围广，较纯的精制品、纯度较差的制品、已知的或新发现的抗生素均能应用；对同一类型的抗生素不需分离，可一次测定其总效价，是抗生素药物效价测定的最基本的方法。但其存在着操作步骤多，测定时间长，误差大等缺点，随着抗生素类药物的发展和分析方法的进步，理化方法逐渐取代了生物学法，但对于分子结构复杂、多组分的抗生素，生物学法仍然是首选的效价测定方法。理化测定法根据抗生素的分子结构特点，利用其特有的化学或物理化学性质及反应而进行的。对于提纯的产品以及化学结构已确定的抗生素，能较迅速、准确地测定其效价，并具有较高的专属性。但本法也存在不足：如化学法通常是利用抗生素化学结构上官能团的特殊化学反应，对含有具同样官能团杂质的供试品就不适用，或需采取适当方法加以校正。而且当该法是利用某一类型抗生素的共同结构部分的反应时，所测得的结果，往往只能代表药物的总含量，并不一定能代表抗生素的生物效价。因此，通常在以理化方法测定抗生素含量时，不但要求方法正确可靠、具有专属性、操作简单、省时、试剂易得、样品用量少，而且要求测定结果必须与生物效价吻合。目前世界各国药典所收载的抗生素的理化方法主要是HPLC法，如β-内酰胺类、四环素类、大环内酯类等抗生素大多采用HPLC法测定含量。49、简述β-内酰胺类抗生素的结构特点与性质。答：青霉素和头孢菌素分子中都有一个游离羧基和酰胺侧链。氢化噻唑环或氢化噻嗪环与β-内酰胺并合的杂环，分别构成二者的母核。青霉素类分子中的母核称为6-氨基青霉烷酸（简称6-APA）；头孢菌素类分子中的母核称为7-氨基头孢菌烷酸（简称7-ACA）。由此也可以说，青霉素类的分子结构由侧链RCO-与母核6-APA两部分结合而成；头孢菌素类是由侧链RCO-与母核7-ACA组成。Β-内酰胺环是该类抗生素的结构活性中心，其性质活泼，是分子结构中最不稳定部分，易发生水解和分子重排，导致β-内酰胺环的破坏而失去抗菌活性。青霉素类分子中含有三个手性碳原子，头孢菌素类含有两个手性碳原子，故都具有旋光性。青霉素类和头孢菌素类分子中的游离羧基具有相当强的酸性，能与无机碱或某些有机碱形成盐。青霉素类分子中的母核部分无共轭系统，但其侧链酰胺基上R取代基若有苯环等共轭系统，则有紫外吸收特征。50、简述氨基糖苷类药物的结构特点与鉴别反应。答：氨基糖苷类药物的化学结构都是以碱性环己多元醇为苷元，与氨基糖缩合而成的苷。本类药物的分子结构具有一些共同或相似处，因而具有相似的性质，如旋光性、水解反应及颜色反应。其中，与茚三酮反应、Molisch反应、葡萄糖胺反应等属于共有反应；而坂口反应、麦芽酚反应是硫酸链霉素的特征反应。51、简述四环素类药物的稳定性。答：四环素类抗生素对各种氧化剂（包括空气中氧在内）、酸、碱都是不稳定的。干燥的四环素类游离碱和它们的盐类避光条件下保存均较稳定，但其水溶液随pH的不同会发生差向异构化、降解等反应，尤其是碱性水溶液特别容易氧化，颜色很快变深，形成色素。四环素类抗生素在弱酸性（pH2.0~6.0）溶液中会发生差向异构化，形成差向四环素类。在酸性条件下（pH＜2），特别是在加热情况下，生成脱水四环素。在碱性溶液中，C环破裂，生成无活性的具有内酯结构的异构体。脱水四环素亦可形成差向异构体，称差相脱水四环素。52、左氧氟沙星原料药中右氧氟沙星的限量。采用配合交换手性流动相高效液相色谱法测定，其原理是什么？答：将手性试剂加到HPLC流动相中，与手性药物生成可逆的非对映体复合物，根据复合物的稳定性，在流动相中的溶解性和与固定相的键合力差异，于非手性固定相上分离对映体。该法是分离手性氨基酸和类似氨基酸药物的常用方法，但只有能与过渡金属离子形成相应配合物的药物才能被分离，常用的金属离子是Cu2+、Zn2+和Ni2+等，配合剂有L-脯氨酸和D-苯丙氨酸等氨基酸。53、采用永停滴定法测定磺胺类药物含量时，为何要在强酸性中进行？答：因为胺类药物的盐酸盐溶解度较大，在盐酸的强酸性介质中，能加速重氮化反应的速度，增加产物的稳定性，并防止副产物的产生。54、试述双波长法测定复方磺胺嘧啶片含量的原理。答：磺胺嘧啶在盐酸溶液中，于308nm处有最大吸收波长，而甲氧苄啶在该波长处无吸收，故可以直接测定磺胺嘧啶在此波长处的吸光度以计算其含量。甲氧苄啶在盐酸溶液中，于277.4nm波长处有最大吸收，而磺胺嘧啶在此波长附近也有吸收，且其吸光度与308nm波长处的吸光度相等。甲氧苄啶在这两个波长处的吸光度差异大，选定277.4nm波长作为测定波长，以308nm波长作为参比波长，采用双波长分光光度法不经分离即可求出甲氧苄啶的含量。55、药物制剂分析与原料药分析相比较有哪些不同？ 答：药物制剂分析较原料药分析复杂；药物制剂与原料药分析的项目和要求不同；药物制剂含量测定表示方法和限度要求与原料药不同，原料药的测定结果以百分含量来表示，药物制剂含量测定的结果以相当于标示量的百分数来表示。49、片剂中的糖类对哪些分析测定方法有干扰？如何进行消除？答：淀粉、糊精、蔗糖、乳糖等是片剂常用的稀释剂。其中，淀粉、糊精、蔗糖水解产生的葡萄糖具有还原性，乳糖是还原糖，均可能干扰氧化还原测定法。在选择含糖类附加剂的药物制剂的含量测定方法时，不应使用高锰酸钾法、溴酸钾法等以强氧化性物质为滴定剂的容量分析方法；同时应进行阴性对照试验，若阴性对照试验消耗滴定剂，说明附加剂对测定有干扰，应换用其他方法测定。50、硬脂酸镁对哪些测定方法有干扰？如何进行消除？答：硬脂酸镁是片剂常用的润滑剂。其中，镁离子（Mg2+）可能干扰配位滴定法，硬脂酸根离子（C17H35COO-）可能干扰非水溶液滴定法。在配位滴定法中，当pH约为10时，Mg2+与EDTA可形成稳定的配位化合物（lgKMY为8.64）；若被检测金属离子与EDTA滴定液使测定结果偏高，可加入掩蔽剂排除干扰。例如，在pH6.0~7.5条件下，加入掩蔽剂酒石酸，可与Mg2+形成更稳定的配位化合物，排出硬脂酸镁对配位滴定法的干扰。在非水溶液滴定法中，若主药的含量高、硬脂酸镁的含量低，则硬脂酸根离子（C17H35COO-）对测定的干扰可忽略不计。否则，C17H35COO-消耗的高氯酸滴定液使测定结果偏高。对于脂溶性药物，可用适当的有机溶剂提取药物，排除硬脂酸镁的干扰后，再用非水溶液滴定法测定。或者改用其他方法测定。51、注射液中抗氧剂对哪些测定方法有干扰？如何排除注射液中抗氧剂的干扰？答：具有还原性药物的注射剂，常需加入抗氧剂以增加药物的稳定性。常用的抗氧剂有亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠以及维生素C等。这些物质均具有较强的还原性，当用氧化还原滴定法测定药物含量时便会产生干扰。排除干扰的方法有以下几种：①加入掩蔽剂；②加酸分解；③加入弱氧化剂氧化；④利用主要与抗氧剂紫外吸收光谱的差异进行测定。52、试述中药及其制剂的鉴别药味的选取原则。答：中药及其制剂的鉴别药味的选取原则如下：（1）单味制剂，直接选取单一药味进行鉴别。中药复方制剂，应按照君、臣、佐、使依次选择药味。（2）当药味较多时，应首选君药、臣药、贵重药、毒性药进行鉴别。（3）凡有原粉入药者，应该做显微鉴别。有显微鉴别的，可同时进行其他方法的鉴别。（4）原则上处方中的每一药味均应进行鉴别，选择尽量多的药味制订在标准中，但最少也要超过处方的1/3药味。53、中药材检查的主要项目有哪些？答：中药材的检查项目主要有药材中混杂的杂质检查、水分测定、总灰分和酸不溶性灰分测定，重金属及有害元素测定、农药残留量测定、其他必要的有关杂质检查、黄曲霉素、膨胀度和酸败度测定等。54、中药及其制剂的含量测定中，测定成分的选择原则是什么？答：中药及其制剂的含量测定项目选定的选择原则为：（1）首选君药及贵重药，剧毒药建立含量测定方法，其次考虑臣药或其他药味。中药和化学药品组成的复方制剂，除君药外所含化学药品也必须建立含量测定项目。（2）应选专属性强的有效成分或指标成分测定含量。（3）成分类别清楚的，可测某一类成分的总量。（4）检测成分应归属某单一药味。（5）检测成分应与中医理论、用药的功能主治相近。（6）确实无法含量测定的，可测定药物的总固体量。55、中药制剂化学成分含量测定的主要方法有哪些？各有何优缺点？答：中药制剂化学成分含量测定方法主要包括高效液相色谱法、气相色谱法、薄层色谱扫描法、分光光度法和化学分析法等。高效液相色谱法对含有众多成分的复杂体系具有强大的分离功能，且分析速度快，应用范围广，其重现性和准确度均优于薄层色谱扫描法，是中药及其制剂含量测定的首选方法。 气相色谱法为中药制剂分析的常规分析方法，主要用于测定药材和饮片、制剂中含挥发油及其他挥发性组分的含量。薄层色谱扫描法具有分离效能高、简便快速等特点，因而适用于中药制剂的分析。本法的准确度和精密度虽不及高效液相色谱法，但可以作为高效液相色谱法的补充，用于无紫外吸收或不能采用高效液相色谱法分析的组分。分光光度法由于容易受到共存组分的干扰，其使用受到一定限制。化学分析法的准确度高，但不及色谱法等仪器分析法灵敏、专属，多用于制剂组方简单、组分含量较高时的测定。49、简述在安全检查中，原料、半成品和成品之间的异同。答：原料：投产前必须按药典或有关规定要求，进行毒力、特异性和培养特性等试验，检查其生物学特性是否存在异常。血液制品，必须防止将含有病原物质（如HBV、HCV和HIV等）的血液投入生产。半成品：检查对活菌、活毒或毒素的处理，是否有杂菌或有害物质的污染，所加灭活剂、防腐剂是否过量等。成品：进行无菌试验、纯菌试验、毒性试验、热原试验和安全试验等检查。50、简述变量免疫定量攻击法的原理。答：该方法又叫50%有效免疫剂量法。此法多用小白鼠进行试验，因为小白鼠对该方法敏感而且操作简便。疫苗经过稀释制成一系列浓度的样品，分别免疫各组动物，规定时间后，用同一剂量毒素进行攻击，观察，算出能使50%的动物免疫的剂量，就叫做变量免疫定量攻击法。51、生物制品的理化检定包括哪些内容？答：物理检查（外观、真空度、溶解度检查、装量）、蛋白质含量测定、相对分子质量或分子大小测定、蛋白质纯度检查、防腐剂和灭活剂含量测定、其他理化检定项目：如水分含量测定、酸碱度和氯化钠测定等。52、简述毛细管电泳的主要分离模式。答：毛细管电泳是经典电泳技术和现代微柱分离相结合的产物。有以下几种分离模式。（1）毛细管区带电泳。（2）胶束电动毛细管色谱。（3）毛细管凝胶电泳。（4）毛细管等速电泳。（5）毛细管等电聚焦电泳。（6）毛细管电色谱。（7）微芯片毛细管电泳。53、简述手性流动相拆分法常用的手性添加剂类别。答：（1）配基交换型手性添加剂：在众多的手性添加剂中以该类添加剂的基础理论研究较成熟，应用也较广。在CLEC中，手性配基多为光活性氨基酸或其衍生物。它们和二价金属离子螯合，以适当的浓度分布于流动相中，遇到药物消旋体，共同形成配位络合物对，然后在反相或正相柱上完成拆分。（2）环糊精类添加剂：环糊精是由吡喃葡萄糖通过α-（1，4）连接构成的环状低聚糖，CD分子呈截头圆锥体状，边缘排列有许多羟基，内部则是相对疏水的空腔。如果待分析化合物的分子大小与空腔相符合，则可形成CD包合物。常用的CD主要为β-CD、γ-CD和新型改性CD。对溶质分子基团体积（直径）的选择性及其手性识别作用，亦颇有应用前景。（3）手性离子对络合剂：荷电药物能与手性离子对缔合成电中性络合物，即离子对分布于固定相上，其保留特征（如k"）可采用手性离子对浓度及其种类调节外，同时还可由外加的手性络合剂控制。常用的手性离子对络合剂有（+）-10-樟脑磺酸、奎宁和奎尼丁等。54、简述UPLC关键技术。答：（1）新型色谱填料及装填技术：色谱柱技术应该涵盖几个方面的内容，首先是新填料的合成，以得到高质量的填料颗粒，包括耐高压、耐酸碱等；其次是颗粒的筛选，选出颗粒度分布尽可能窄的填料；最后是装填技术，以保证既堵住颗粒不使其外流，又不至于引起背压的大幅升高。（2）超高压液相色谱泵：除了密封、高压动力之外，还须解决超高压下溶剂的压缩性及绝热升温问题。 （2）自动进样器：在超高压液相色谱中，进样系统的设计尤为困难。因为它要求进样阀在高压下不仅密封要良好还要有较小的死体积，同时要保证塞型进样，以减小峰展宽。为了降低死体积、减少交叉污染，自动进样器的设计可采用一些新技术，例如针内针样品探头、压力辅助进样，一强、一弱的双溶剂的进样针清洗步骤，等等。（3）高速检测器：在新的色谱柱技术支持下的高压、高速UPLC对检测提出了挑战。首先是速度问题，在短时间内出现如此多的色谱峰需要更快的数据采集频率，还需要减小检测池体积（＜1μl），降低样品在检测池内的驻留时间，以适应UPLC所产生的非常窄的色谱峰，同时还要降低信噪比。例如ACQUITYUPLCTM使用新型光纤引导、TeflonAF池壁的流通池；10mm的光程（与普通HPLC相同）而体积只有500nl（普通HPLC的二十分之一）。光束通过光纤完全引入流通池后，利用TeflonAF的特征在池壁内全折射，不损失光能量；同时采样速率达到40点/秒。（4）优化系统综合性能的设计：系统的整体设计必须优化使之具有超低系统体积及死体积的特点，才能保障UPLC所带来的低扩散、高速检测优点。这也使其更易适应质谱检测器的电喷雾离子化接口要求。'