GBT28076-2011三叶斑潜蝇检疫鉴定方法.pdf 10页

'ICS65．020．01B16囝亘中华人民共和国国家标准GB／T28076--2011三叶斑潜蝇检疫鉴定方法DetectionandidentificationofLiriomyzatrifolii(Burgess)2011-12-30发布2012-06-01实施宰瞀鹊紫瓣警糌瞥鐾发布中国国家标准化管理委员会仪19 标准分享网www.bzfxw.com免费下载月Jj盖GB／T28076--201本标准按照GB／T1．1—2009给出的规则起草。本标准由全国植物检疫标准化技术委员会(SAC／TC271)提出并归口。本标准起草单位：中国检验检疫科学院、中华人民共和国广东出入境检验检疫局、中华人民共和国山东出入境检验检疫局、中华人民共和国云南出入境检验检疫局、中华人民共和国北京出入境检验检疫局、中华人民共和国湖南出入境检验检疫局、中华人民共和国江西出入境检验检疫局、中华人民共和国广西出入境检验检疫局。本标准主要起草人：陈乃中、吴佳教、魏晓棠、刘海军、刘忠善、张俊华、江丽辉、卢建、姜金林、黄丽莉、冯贤。 标准分享网www.bzfxw.com免费下载1范围三叶斑潜蝇检疫鉴定方法GB／T28076--2011本标准明确了三叶斑潜蝇的检测、饲养、标本制作和室内鉴定等方法。本标准适用于进出境植物检疫、国内植物检疫和大田防治工作中的三叶斑潜蝇的检测、饲养和鉴定。2术语和定义2．12．22．32．42．52．62．72．82．9下列术语和定义适用于本文件。内顶鬃innerverticals单眼三角区后侧面2对鬃靠内的1对鬃。外顶鬃outerverticals单眼三角区后侧面2对鬃靠外的1对鬃。后顶鬃postverticals位于单眼三角区后方的1对鬃。2．10髭vibris∞e位于口器上面颊下角部位最粗的1对鬃。上眶鬟upperorbitals位于眼眶上半部的鬃。下眶鬃lowerorbitals位于眼眶下半部的鬃。眶毛orbitalsetulae着生于眼眶部位的细毛。盾片scutum双翅目昆虫中胸节背板位于盾间沟和小盾沟之间的骨片。中侧片anepisternum中胸节的上前方侧片。是位于背侧片与腹侧片之间、翅侧片之前的大型骨片。腹侧片katepisternum中胸节的下前方侧片。是位于中侧片下方的一近似三角形的骨片。 标准分享网www.bzfxw.com免费下载GB／T28076--20”2．11端阳体distiphallus雄成虫阳茎的端部构造，又称阳茎端。3三叶斑潜蝇基本信息学名：Liriomyzatrifolii(Burgess，1880)。异名：L．alliovoraFrick，1925。俗名：Americanserpentineleafminer、serpentineleafminer和chrysanthemumleafminer。属于双翅目Diptera，潜蝇科Agromyzidae，植潜蝇亚科Phytomyzinae，斑潜蝇属LiriomyzaMik。斑潜蝇属在全世界已知共370余种，属内形态上与三叶斑潜蝇近似的重要多食性种类还有美洲斑潜蝇L．sativaeBlanchard、南美斑潜蝇L．huidobrensis(Blanchard)和番茄斑潜蝇L．bryoniaeKalten—bach。三叶斑潜蝇的其他信息参见附录A。4方法原理根据三叶斑潜蝇的危害状，在检疫现场或发生疑似三叶斑潜蝇的田地，肉眼观察寄主叶片，取得幼虫或蛹虫样，饲养获得成虫，解剖制作雄外生殖器标本，用显微镜观察，根据形态特征对种类进行判定。5器材和试剂5．1器材可封I：1塑料袋、标签、培养皿、吸水纸、镊子、生物培养箱、小毛笔、指形管、纱布、冰箱、三角纸剪刀、昆虫针、滴管、培养皿、载玻片、盖玻片、体视显微镜。5．2试剂荷燕尔胶(用阿拉伯树胶30g：蒸馏水50mL：水合氯醛2009：甘油zomL配方配制而成)、树脂胶、无水乙醇、氢氧化钠或氢氧化钾、蒸馏水。6检测与饲养6．1检测在检疫现场或发生疑似三叶斑潜蝇的田地，观察有关寄主植物叶片(参见附录A)，如发现上表发白、由细变粗、弯曲甚至缠绕的疑似虫道，观察虫道末尾有无半透明的幼虫，并进一步查找附近有无长椭圆形长约2．0mm的黄褐色蛹粒。如发现疑似蛹粒，用指形管盛装；如发现上述幼虫，摘取叶片，用可封口塑料袋装。上述管、袋均加标签，或编号，记录时间、地点、寄主、采集人等，带回实验室。6．2饲养带虫叶片置于皿底铺有吸水纸的培养皿中，蛹盛于指形管中，用纱布扎口，防止羽化成虫逃逸，放人生物培养箱中25℃～30℃下培养。成虫羽化24h后可将指形管置于冰箱一1℃下不短于1h将成虫冷冻杀死。2 标准分享网www.bzfxw.com免费下载7标本的制作准备7．1成虫标本7．1．1针插标本GB／T28076--201成虫标本可制作为针插标本。其中，粘虫用的三角纸应用三角纸剪刀制作；可用荷燕尔胶或其他快干的树脂胶作为粘虫胶；成虫翅向外方、头部露出、侧身粘在三角纸尖上；要有注明地点、寄主、羽化时间等信息的标签。7．1．2浸泡标本也可以用无水乙醇浸泡保存成虫标本。但如果要备分子试验用，则可用无水乙醇浸泡，并冷冻保存。7．2雄外生殖器玻片标本用昆虫针取下雄虫腹部(见附录B)投入5％氢氧化钠或氢氧化钾溶液中煮沸3mint5rain(体视显微镜下观察，以骨质部分保留深色、肌肉脂肪等溶解为佳)；用滴管吸移至培养皿装薄层蒸馏水中浸洗；在体视显微镜下(载物台为白色背景)用细针解剖，除去背腹板等物，仅剩第9背板及其附属构造(雄外生殖器)；用针尖粘取第9背板及其附属构造至载玻片上荷燕尔胶滴中，体视显微镜下整姿，尽量使雄外生殖器构造在视野中为正面图像；封片；自然干燥或用烘箱45℃24h烘干。8实验室鉴定将成虫标本置于体视显微镜下，雄外生殖器玻片标本置于显微镜下，观察是否符合以下鉴定特征(见附录B和附录c)。8．1潜蝇科成虫的鉴别特征体小或微小，长l_5mm～4．0mm。有髭，后顶鬃分歧，上眶鬃分歧，下眶鬃内向。翅C脉仅在sc脉端处折断，sc脉端部退化为一褶痕或与R脉合并，R脉3分支直达翅缘。腹部扁平，雌第7节长而骨化，不能伸缩。8．2植潜蝇亚科Phytomyzinae成虫的鉴别特征sc脉端部退化为一褶痕，独立于R。脉之基伸达前缘脉。8．3包括三叶斑潜蝇在内的具经济意义Liriomyzaspp．成虫鉴别特征上额眶鬃2对，眶毛后倾；小盾片通常为黄色；翅C脉伸达M。+。脉端，它们终止于翅端附近，有第2横脉。8．4三叶斑潜蝇的鉴别特征8．4．1成虫8．4．1．1头部触角各节亮黄色；内、外顶鬃均着生于黄色区域，至少外顶鬃着生于黑黄交界处。3 标准分享网www.bzfxw.com免费下载GB／T28076--20118．4．1．2胸部盾片黑色无光泽，带灰白色绒毛被(侧光照射可见)；小盾片鲜黄色；中侧片下缘具黑斑，腹侧片大部分黑色；翅M。脉末段长是次末段的约3倍；足基节黄色。腿节大部分黄色，有时有淡褐色条纹，胫节、跗节暗褐色。8．4，1．3雄外生殖器阳茎端阳体基半部分明显凸起，中间部位缢缩明显；柄部(中阳体)长，长度接近端阳体长度。8．4．2卵白色，长椭圆形，长约0．25HIITI。8．4．3幼虫和蛹幼虫3龄，初产幼虫长约0．5mri2，老熟幼虫长约3．0rexl"n，略呈蛆形。蛹长椭圆形，长约2．0l"nITl，腹面扁平，有突出的前、后气门，后气门有3个指状突。9结果判定以8．1、8．2、8．3、8．4．1为主要依据，8．4．3和附录C可作参考，符合8．4．1．1和8．4．1．2的可初步判定为三叶斑潜蝇，且符合8．4．1．3的可判定为三叶斑潜蝇。10标本保存经过鉴定的三叶斑潜蝇标本应永久保存，并加注明时间、地点、寄主、采集人等信息的标签。 标准分享网www.bzfxw.com免费下载A．1地理分布附录A(资料性附录)三叶斑潜蝇其他信息GB／T28076--201韩国、日本、菲律宾、印度、塞浦路斯、以色列、黎巴嫩、土耳其、也门、奥地利、比利时、保加利亚、克罗地亚、捷克、丹麦、芬兰、法国、德国、匈牙利、冰岛、意大利、马耳他、荷兰、挪威、波兰、葡萄牙、罗马尼亚、俄罗斯、斯洛伐克、斯洛文尼亚、西班牙、瑞典、瑞士、英国、南斯拉夫、贝宁、象牙海岸、埃及、埃塞俄比亚、几内亚、肯尼亚、马达加斯加、毛里求斯、马约特岛、尼日利亚、留尼汪、塞内加尔、南非、苏丹、坦桑尼亚、突尼斯、赞比亚、津巴布韦、加拿大、美国、巴哈马、巴巴多斯、百慕大、哥斯达黎加、古巴、多米尼加共和国、瓜德罗酱、危她马拉、马提尼克岛、特立尼达和多巴哥、巴西、哥伦比亚、法属圭亚那、圭亚酃、秘鲁、委内瑞拉、美属萨摩亚、密克罗尼西亚、关岛、北马里亚纳群岛，萨摩亚、汤加(其中有的国家或地区声称已根除)。我国台湾和大陆局部也有发生。大陆实施官方控制。A．2寄主植物该虫为害包括重要花卉、果、蔬、棉和牧草等在内的20余科植物。重要的寄主作物包括菊花、扶朗花、大丽花、百日菊、石竹花、丝石竹花、黄瓜、南瓜、甜瓜、西瓜、旱芹、番茄、辣椒、马铃薯、豌豆、菜豆、豇豆、甜菜、菠菜、蒜、韭、洋葱、青菜、白菜、莴苣、苜蓿和棉等。其中菊科、茄科、葫芦科和旱芹是三叶斑潜蝇的嗜食寄主。A．3生物学及传播途径产卵于寄主叶片表皮下，幼虫孵出后郎潜食叶肉，主要危害上表皮下的橱栏组织，叶面上表可见弯曲缠绕的虫道，幼虫老熟后弹出，在土中或叶片上化蛹。成虫取食叶片汁液，交配、产卵。卵、幼虫和蛹等随寄主叶片传带是主要传播途径。A．4三叶斑潜蝇及其相关种类的危害状寄主植物叶片上弯曲虫道及取食刻点是斑潜蝇可能存在的标识性被害状。斑潜蝇成虫取食刻点圆，直径约0．2mm，在叶片上表呈现为白色小斑点。三叶斑潜蝇及美洲斑潜蝇、番茄斑潜蝇幼虫主要潜食叶片上面部分的栅栏组织，并在取食过程中排出粪便，因此，外观虫道为白色，并透过虫道上留下的叶片上表皮可见虫道两侧交替出现的断续的黑色线状细斑。斑潜蝇种类和寄主种类等因素对虫道式样有一定影响，三叶斑潜蝇的虫道在一些寄主上缠绕比较紧密，末端甚至成块状，而美洲斑潜蝇、番茄斑潜蝇的虫道比较疏松，南美斑潜蝇的虫道常顺叶脉伸展和或限于叶脉之间。南美斑潜蝇及田间常见的豌豆彩潜蝇ChomatomyiahorticolaGoureau既危害叶片上面部分的栅栏组织，也危害下面静海绵组织，故叶片下表也可见虫道。斑潜蝇幼虫老熬后，一般弹出化蛹，其弹出孔呈半圆性裂麓。豌豆彩潜蝇的蛹(白色)主要在虫道内化蛹，往往露出前截在叶片下表外。 标准分享网www.bzfxw.com免费下载附录B(规范性附录)叶斑潜蝇殛其重要近缘种成虫重要形态特征图B1三叶斑潜蝇头部背面观围B2三叶斑潜蝇翅脉示意图⑨穆图B3三叶斑潜蝇雄成虫腹部(采白Collins)图B4三叶斑潜蝇雌成虫腹部(采自Collins)箭**☆*端日体图B5斑潜蝇雄外生殖器侧观囤(采自Collins 标准分享网www.bzfxw.com免费下载a)="斑镕Mb)*Ⅲ*潜*c)自|m镕蝇d)*§女**图B6三叶斑潜蝇及其重要近缘种雄外生殖器阳茎端阳体的比较(采自Collins”¨甾。，、一∥≯妇；≯，。％，，挝醛』Ilo守爷，、艮 标准分享网www.bzfxw.com免费下载GB／T28076--20”附录C(规范性附录)三叶斑潜蝇及其重要近缘神成虫鉴别检索表1内、外顶鬃均着生于黄色区域，或至少外顶鬃着生于黑黄交界处⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2内、外顶鬃均着生于黑色区域，或至少内顶鬃着生于黑黄交界处⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··⋯⋯⋯-32中胸盾片带灰白色绒毛被；Ma+t脉末段长是次末段长的约3倍；幼虫和蛹后气门有3个指状突⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯三叶斑潜蝇Liriomyzatrifolii(Burgess)中胸盾片无如上述灰白色绒毛被；M，+t脉末段长是次末段长的约2倍；幼虫和蛹后气门有7～12个指状突⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯番茄斑潜蝇L．bryoniaeKaltenbach3M。+．脉末段长是次末段长的约3倍～4倍；触角鲜黄色；腿节主要为鲜黄色；幼虫和蛹后气门有3个指状突⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯美洲斑潜蝇L．sativaeB1anchardM。+。脉末段长是次末段长的2倍～2．5倍；触角棕黄色；腿节有黑色斑块或全为黑色；幼虫和蛹后气门有6～9个指状突⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··⋯南美斑潜蝇L．^“id06reHs如(Blanchard)'